一種新型一站式ISET捕獲CTC設(shè)備的可行性研究及其臨床應(yīng)用

醫(yī)生首次在結(jié)直腸癌患者中發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值（NLR）與CTC檢出有明顯相關(guān)性

武漢大學(xué)中南醫(yī)院熊斌教授團(tuán)隊(duì)近期在國(guó)際知名雜志《Oncotarget》（IF=5.008）上發(fā)表結(jié)直腸癌患者循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）檢測(cè)的相關(guān)研究論文（標(biāo)題見下圖）。該研究為熊斌教授團(tuán)隊(duì)與芝友醫(yī)療研發(fā)部合作研究成果。

該研究共入組72例Ⅰ-Ⅳ期結(jié)直腸癌患者，使用CTCBIOPSY平臺(tái)對(duì)這些患者進(jìn)行CTC檢測(cè)。 研究發(fā)現(xiàn)這72例患者中CTC檢測(cè)陽(yáng)性率為52.8%（38/72），CTM（循環(huán)腫瘤微栓）檢測(cè)陽(yáng)性率為18.1%（13/72）。CTC檢測(cè)陽(yáng)性率與淋巴或靜脈浸潤(rùn)、腫瘤浸潤(rùn)深度、淋巴轉(zhuǎn)移和TNM分期等均顯著相關(guān)（P<0.01），研究結(jié)果提示在晚期結(jié)直腸癌患者中檢出CTC預(yù)示著較差的預(yù)后。

（該表引用自文獻(xiàn)：Xiong, et al. Oncotarget. 2017,10;8(2):3029-3041.）

該研究還發(fā)現(xiàn)，CTC檢測(cè)陽(yáng)性的患者，其平均淋巴細(xì)胞數(shù)量要遠(yuǎn)低于未檢出CTC的患者（1.09 x 109/L V.S. 1.85 x 109/L, P < 0.001），中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值（NLR）在CTC陽(yáng)性和陰性組之間有顯著性差異（6.34 V.S. 3.98, P<0.024）。該結(jié)果提示CTC的數(shù)量與腫瘤患者的免疫能力呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，即腫瘤患者的免疫能力越好，CTC越難在外周血循環(huán)系統(tǒng)中生存。近年來(lái)已有多篇文獻(xiàn)報(bào)道NLR可以作為癌癥患者獨(dú)立的預(yù)后因子，本研究在世界上第一次將結(jié)直腸癌患者的CTC檢出與NLR聯(lián)系在了一起，展示了免疫細(xì)胞與CTC的動(dòng)態(tài)關(guān)聯(lián)和免疫系統(tǒng)對(duì)阻止癌癥遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的重要性，也揭示了CTC檢測(cè)對(duì)于評(píng)估免疫治療療效的重要價(jià)值！

（該表引用自文獻(xiàn)：Xiong, et al. Oncotarget. 2017,10;8(2):3029-3041.）

該論文通訊作者熊斌教授這樣評(píng)論:

CTC能夠伴隨血液循環(huán)播散，粘附血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)而侵犯不同的組織器官，檢測(cè)CTC能夠讓我們更為深入了解轉(zhuǎn)移的進(jìn)程。同時(shí)CTC檢測(cè)可以作為一種實(shí)時(shí)“液態(tài)活檢”，更為便捷的監(jiān)視腫瘤生物學(xué)行為，也可以更早的發(fā)現(xiàn)潛在的腫瘤轉(zhuǎn)移。因此，檢測(cè)CTC具有重要的臨床意義，不但可以實(shí)現(xiàn)早期診斷、療效監(jiān)測(cè)，甚至通過(guò)分析CTC的分子生物學(xué)表型，實(shí)現(xiàn)個(gè)體化治療。

本研究所采用的CTC捕獲分析系統(tǒng)，是基于濾膜原理進(jìn)行CTC捕獲，加之后續(xù)自動(dòng)化的瑞氏染色和閱片，形成從捕獲分離至鑒定的一站式分析系統(tǒng)-- ISETos（One-Stop Isolation by Size of Epithelial Tumor cells，ISET）即CTCBIOPSY系統(tǒng)，ISETos利用CTC及CTM與白細(xì)胞在細(xì)胞平均大小上的差異，通過(guò)分布有大量8μm小孔的納米分離薄膜，取得了較高的捕獲效率。同時(shí)，由于納米級(jí)薄膜的應(yīng)用，使得原位觀察分析成為可能。但是由于ISETos仍然是基于大小尺寸的捕獲方式，對(duì)于發(fā)生上皮間質(zhì)化（Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT）的CTC捕獲仍存在爭(zhēng)議，因此可否需要對(duì)于濾膜進(jìn)行進(jìn)一步加工，實(shí)現(xiàn)ISET聯(lián)合抗體的雙重分離系統(tǒng)進(jìn)一步升級(jí)，從而實(shí)現(xiàn)針對(duì)CTC的全面捕獲和分析。同時(shí)，針對(duì)CTC的分子表型，ISETos需完善相關(guān)下游的深度測(cè)序等分子生物學(xué)分析，以利于臨床針對(duì)不同亞型的CTC提出不同的治療策略及監(jiān)測(cè)腫瘤治療的療效。

但是總的來(lái)說(shuō)，ISETos對(duì)于CTC捕獲及分子生物學(xué)研究具有廣闊的前景，能夠切實(shí)可行的分析研究CTC與腫瘤臨床病理特點(diǎn)之間的相關(guān)性，依靠合理的工作流程和技術(shù)平臺(tái)，深入研究CTC在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移中的作用，對(duì)認(rèn)識(shí)和預(yù)防腫瘤進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)治療具有理論和實(shí)踐價(jià)值。

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附熊斌教授研究團(tuán)隊(duì)介紹：

熊斌，醫(yī)學(xué)博士，教授，主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師。武漢大學(xué)中南醫(yī)院腫瘤外科主任，腫瘤教研室主任。熊斌教授團(tuán)隊(duì)多年來(lái)聚焦于惡性腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制研究，通過(guò)不同的技術(shù)平臺(tái)對(duì)腸癌、胃癌、肝癌等患者進(jìn)行CTC的捕獲及隨訪，從液體活檢角度進(jìn)行了大量的創(chuàng)新性的臨床與基礎(chǔ)研究；同時(shí)也一直從事CTC侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)機(jī)制研究，在該領(lǐng)域承擔(dān)國(guó)家自然科學(xué)基金1項(xiàng)。相關(guān)研究工作結(jié)果已經(jīng)發(fā)表在《Advanced Materials》、《Theranostics》、《International Journal of Nanomedicine》、《Oncotarget》、《Free Radic Biol Med》等雜志，引起國(guó)內(nèi)外同行的關(guān)注。為消化道惡性腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的機(jī)制理解、診斷治療提供了理論基礎(chǔ)和實(shí)踐依據(jù)。