糞便基因組DNA提取試劑盒（Stool DNA Extraction Kit）使用說(shuō)明書

糞便基因組DNA提取試劑盒（Stool DNA Extraction Kit）

存儲(chǔ)室溫(15℃-25℃) 干燥保存，有效期12個(gè)月，2℃-8℃保存時(shí)間更長(zhǎng)�！咀ⅰ吭噭┖虚_封后溶液A、B 、C 、D 需在2-8℃保存。

貨號(hào)&規(guī)格

YJ0219-50 | 50T

YJ0219-100 | 100T

產(chǎn)品組分

試劑盒內(nèi)容 YJ0219-50（50T） YJ0219-100（100T）

溶液A 25mL 50mL

溶液B 3mL 6mL

溶液C 5mL 10mL

溶液D 10mL 20mL

漂洗液 15mL 15mL×2

洗脫液 15mL 30mL

吸附柱 50個(gè) 100個(gè)

收集管 50個(gè) 100個(gè)

說(shuō)明書 1份 1份

 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本試劑盒適合于從各種糞便中提取微生物DNA。對(duì)糞便中各種細(xì)菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生物DNA的多態(tài)性。

使用本試劑盒提取的DNA產(chǎn)量大、完整性好，可直接用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR 、文庫(kù)構(gòu)建、Southern  雜交等實(shí)驗(yàn)。

 使用說(shuō)明

使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

1、稱取糞便樣本 0.1-0.5g，在液氮中充分研磨成細(xì)粉末，加入 450ul  溶液A  震蕩混勻。

*  也可直接稱取樣本 0.1-0.5g 于離心管( 建議使用 2ml  圓底管) ，加入 450ul 溶液 A  劇烈震蕩混勻 1-2min 至沒有固體塊。  使用液氮研磨效果最佳。

2 、加入50ul 溶液B  充分顛倒混勻(  不要?jiǎng)×艺鹗?，65℃水浴 6min，每2min充分顛倒混勻一次。

3 、加入100ul  溶液C  充分顛倒混勻(  不要?jiǎng)×艺鹗?，12000 rpm 離心10min   。

4 、將上清轉(zhuǎn)移到新的離心管，12000rpm離心2min   。

5 、在吸附柱中加入 200ul  溶液D  ，將離心后的上清加入到帶有溶液 D  的吸附柱中，用移液器吹吸幾次混勻，12000 rpm 離心1min。

6 、將收集管中的濾出液混勻后重新吸入吸附柱(  必須)，12000 rpm 離心1min。

7 、倒掉收集管中的廢液，在吸附柱中加入漂洗液 500ul，12000 rpm 離心1min。

8 、倒掉收集管中的廢液，重復(fù)步驟 7  兩次(共漂洗三次)。

9 、倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管，12000 rpm 離心2min   。

10、拿出吸附柱在室溫干燥數(shù)分鐘(  因季節(jié)及氣候等因素不等)，或50℃干燥1min。

11 、將吸附柱放入一個(gè)新的離心管中，加入 50-100ul  洗脫液(65  ℃預(yù)熱)，12000 rpm 離心1min。

12、將離心管中的液體重新加入到吸附柱中，12000 rpm 離心1min。離心管中即為糞便微生物 DNA 溶液。

 注意事項(xiàng)

1 、新鮮的糞便樣本會(huì)得到更高的產(chǎn)率，不同樣本在采樣前應(yīng)先查閱相應(yīng)的最佳保存條件。

2 、若溶液中出現(xiàn)渾濁可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈，不會(huì)影響結(jié)果。

3 、在需要吸取上清液的步驟中應(yīng)避免吸到沉淀，否則會(huì)堵塞吸附柱，并影響產(chǎn)物純度。

4 、洗脫緩沖液的體積最好不少于 50ul ，體積過小會(huì)影響回收效率；建議使用試劑盒附帶的洗脫緩沖液，用水洗脫也會(huì)損失部分產(chǎn)物；DNA應(yīng)保存在-20  ℃避免反復(fù)凍融，以防降解。

5 、 液體試劑避免接觸皮膚，若意外接觸應(yīng)立即使用大量清水沖洗。