GC-TCD法測(cè)定中草藥中的水分

關(guān)鍵詞：中草藥；水分；GC-TCD

目標(biāo)：建立基于賽默飛 GC-TCD 測(cè)定中草藥中水分的分析方法，采用無(wú)水乙醇提取，外標(biāo)法定量。

簡(jiǎn)介

隨著科學(xué)研究的發(fā)展和生產(chǎn)技術(shù)的進(jìn)步，水分的定量分析已被列為藥品檢驗(yàn)的基本項(xiàng)目之一,作為藥品一項(xiàng)重要的質(zhì)量指標(biāo)。一般情況下，藥品中水分含量異常會(huì)嚴(yán)重地影響藥品的質(zhì)量和療效。因此，對(duì)藥品的水分進(jìn)行檢查并嚴(yán)格控制其限度非常重要。

目前，對(duì)于藥物中水分的分析測(cè)定有很多方法，比如：1）卡爾－費(fèi)休氏(Karl—Fischer)，是通過(guò)碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中與水定量反應(yīng)的一種非水溶液中氧化還原滴定的原理來(lái)測(cè)定水分，因此很容易受到檢測(cè)環(huán)境的影響，而使檢測(cè)結(jié)果不重現(xiàn)，且具有還原性的樣品會(huì)和卡氏里面的碘反應(yīng)而產(chǎn)生誤差；2）干燥失重法，整個(gè)過(guò)程繁瑣、費(fèi)時(shí)、系統(tǒng)誤差大，且熱不穩(wěn)定樣品不適用與此法檢測(cè)；3）甲苯蒸餾法，通過(guò)用甲苯做帶水劑與藥物進(jìn)行共沸蒸餾，如樣品中含乙醇等會(huì)造成測(cè)定誤差大，且整個(gè)操作過(guò)程繁瑣。氣相色譜法測(cè)定微量水分過(guò)程簡(jiǎn)單、且分離測(cè)定準(zhǔn)確度高，因此得到廣泛應(yīng)用。

本文以無(wú)水乙醇提取藥物中的水分，采用賽默飛模塊化氣相色譜儀熱導(dǎo)池檢測(cè)器，對(duì)銀杏葉中的水分進(jìn)行了定量測(cè)定，過(guò)程簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、結(jié)果滿意，適用于各種藥物中水分的定量分析測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)材料

儀器與試劑

儀器

Trace 1310 GC氣相色譜儀（Thermo Fisher Scientific）；Triplus RSH三合一自動(dòng)進(jìn)樣器（Thermo Scientific）；TGBOND Q色譜柱（30m×0.32mm×10μm）（Thermo Fisher scientific，P/N:26004-6030）。

試劑

無(wú)水乙醇購(gòu)于上海國(guó)藥化學(xué)試劑有限公司；水為超純水；銀杏葉由市場(chǎng)購(gòu)買

標(biāo)樣的配制

分別準(zhǔn)確稱取0.25g、0.5g、1.0g、1.5g、2.0g、3.0g超純水，加入到100ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，配制成濃度為2.5mg/mL、5.0mg/mL、10.0mg/mL、15.0mg/mL、20.0mg/mL和30.0mg/mL的水標(biāo)樣。

樣品前處理

精確稱取銀杏葉粉末樣品5.0g于150mL玻璃瓶中，加入100ml無(wú)水乙醇，200rpm震蕩3h，靜置12h，吸取上清液過(guò)0.45um的濾膜，然后裝入色譜瓶中，進(jìn)行GC-TCD分析。

色譜條件

色譜條件：色譜柱：TG-BOND Q（30m×0.32mm×10μm）；柱溫：100℃（0min），20℃/min到200℃（1min）；分流進(jìn)樣，分流比10:1；進(jìn)樣口溫度：200℃；載氣：高純氦（99.999%），恒流模式，3.0mL/min。液體進(jìn)樣模式，進(jìn)樣量：0.5μL。TCD檢測(cè)器：檢測(cè)池220℃，燈絲280℃，參比氣為氦氣，流速1.0mL/min。

結(jié)果與討論

標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

圖1為采用Thermo TG-BOND Q規(guī)格為30m×0.32mm×10μm的色譜柱對(duì)無(wú)水乙醇中水分的分離色譜圖，可以看出乙醇和水分離良好，且在3min內(nèi)即可完成分離分析。

線性、方法的檢出限以及定量限

配制系列水分的標(biāo)準(zhǔn)溶液，各濃度分別為：2.5、5.0、10.0、15.0、20.0和30.0mg/mL，采用上述方法分別進(jìn)樣分析，考察在2.5-30.0mg/mL濃度范圍內(nèi)的線性。本實(shí)驗(yàn)同時(shí)將無(wú)水乙醇作為空白，是為了抵消在標(biāo)樣配制與儲(chǔ)存、以及樣品提取過(guò)程中所不可避免地引入的水分。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明水分在2.5-30.0mg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，線性相關(guān)系數(shù)為0.9988（圖2）。以最低濃度標(biāo)樣峰強(qiáng)度的3倍信噪比計(jì)算其檢出限和10倍的信噪比計(jì)算定量限，使用GC-TCD采用該方法對(duì)水分的檢出限為0.50mg/g，定量限為50mg/g，這一結(jié)果同時(shí)也表明了該TCD檢測(cè)器對(duì)水分測(cè)定時(shí)的高靈敏度特性。

實(shí)際樣品測(cè)試及加標(biāo)回收

按照上述方法對(duì)銀杏葉樣品中的水分進(jìn)行了分析測(cè)定（平行測(cè)定2次），并以空白無(wú)水乙醇作為背景以扣除影響，測(cè)得該銀杏葉中的水分為65.70mg/g，折合成溶液濃度為3.286mg/mL。對(duì)此，進(jìn)行了三個(gè)水平的加標(biāo)回收試驗(yàn)，加標(biāo)量分別為3.0、5.0、10.0mg/mL，以考察該方法的可靠性，其中樣品以及加標(biāo)5.0mg/mL樣品的色譜圖見圖3。實(shí)驗(yàn)的加標(biāo)回收結(jié)果見表1-1，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明三個(gè)水平的加標(biāo)回收率均在87.1%-98.1%之間，且對(duì)該樣品平行測(cè)定6次，RSD小于3.29%，符合日常分析檢測(cè)的要求。

總結(jié)

本文采用Thermo Scientific模塊化氣相色譜Trace 1310配置TCD檢測(cè)器，以無(wú)水乙醇對(duì)銀杏葉樣品中的水分進(jìn)行震蕩提取，并進(jìn)行檢測(cè)。該方法的操作步驟簡(jiǎn)單，對(duì)水分的檢出限為0.50mg/g，定量限為50mg/g，，體現(xiàn)了其較高的檢測(cè)靈敏度；同時(shí)以3種不同濃度水平對(duì)銀杏葉樣品進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，其回收率均在87.1%-98.1%之間，能夠很好地符合對(duì)藥物水分的日常檢測(cè)要求。