EB染色液說明書

產(chǎn)品簡介：

EB染色液是EB的水溶液，濃度為10mg/ml。EB（溴化乙錠）能與核酸分子特異結(jié)合，用于觀察瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中DNA或RNA分子。廣泛應(yīng)用于核酸電泳前后的染色以及流式細(xì)胞儀的樣品染色處理等。溴化乙錠（Ethidium Bromide；C₂₁H₂0N₃Br；分子量為394.32）含有一個可以嵌入DNA 堿基的三環(huán)平面基團。它與DNA 的結(jié)合沒有堿基序列特異性。大約每2.5 個堿基插入一個溴化乙錠分子。當(dāng)染料分子插入后，紫外激發(fā)后呈現(xiàn)熒光，可以檢測到10ng 的DNA 條帶。

● 保存條件：

室溫避光保存。

● 注意事項： 

EB有一定毒性，使用時請使用一次性手套操作，注意防護！

● 使用說明：

使用前，先離心快甩EB溶液至管底，以防開蓋后EB造成的污染。

瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色（預(yù)染法）：

1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時，加入10 mg/ml EB溶液至終濃度為0.5μg/ml （如100ml凝膠加入EB量為5μl）；徹底搖勻后鋪膠并插入梳子。

3. 凝固后，將梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳，電泳結(jié)束后紫外觀察。

瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色（后染法）：

1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時，不要加入EB溶液，直接鋪膠并插入梳子。

3. 凝固后，將梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳。

5. 電泳結(jié)束后將凝膠浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中（染色液配制：100ml 緩沖液中加入150-200 μl EB溶液，混勻）染色15-20分鐘；TAE或TBE緩沖液中脫色10-15分鐘。

6. 紫外觀察結(jié)果。