C57/BL6 小鼠中的競(jìng)爭(zhēng)性骨髓移植實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)述

造血干細(xì)胞 (HSC) 能夠分化形成血液系統(tǒng)的全部細(xì)胞，是維持血液系統(tǒng)所必需的細(xì)胞。造血干細(xì)胞是一種多能干細(xì)胞，具有自我更新的能力，并能夠通過層次過程生成各種血細(xì)胞系統(tǒng)的中期細(xì)胞，從而再生成機(jī)體血細(xì)胞。

為研究干細(xì)胞龕，研究人員必須能夠確定在受控條件下細(xì)胞群生成成體細(xì)胞系統(tǒng)的能力。實(shí)驗(yàn)中采用的典型策略是將富含 HSC 的骨髓移植到受體小鼠血液系統(tǒng)之中，而受體小鼠的血液系統(tǒng)經(jīng)亞致死劑量照射后人為清除。在這些小鼠中，成體血細(xì)胞以及干細(xì)胞、前體細(xì)胞均將在 照射 2 周后死亡。經(jīng)過移植的細(xì)胞可以分化新的血液系統(tǒng)，從而解救小鼠。HSC 可基于其短期 (ST- HSC)、長(zhǎng)期 (LT-HSC) 以及中期 (IT- HSC) 重建能力實(shí)現(xiàn)再次分裂 。在大多數(shù)報(bào)告中，研究人員確定 LT-HSC 的方式是：在移植術(shù)后 16-44 周的不同時(shí)間點(diǎn)，對(duì)其生成循環(huán)單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的能力進(jìn)行測(cè)定。對(duì)移植后細(xì)胞進(jìn)行的第一次競(jìng)爭(zhēng)性分析應(yīng)在移植術(shù)后 4-6 周予以完成。

在移植研究中，通常采用野生型近交 C57/BL6 小鼠，但前提是：這些小鼠攜帶Ptprcb 白細(xì)胞標(biāo)記
(CD45.2/Ly5.2) 等位基因。Sloan Kettering 研究所 通過回交 SJL 小鼠與野生型 C57/BL6 小鼠的方式，培養(yǎng)出了一種被稱為 C57BL/6-Ly5.1 的同類品系小鼠。這些小鼠攜帶 Ptprcb 白細(xì)胞標(biāo)記 (CD45.1/Ly5.1) 等位基因。使用常用的抗 CD45.1 和 CD45.2抗體，研究人員可以輕松鑒定宿主和移植細(xì)胞，并確定 HSC 在競(jìng)爭(zhēng)性實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮的作用。

在本文中，我們概括性地描述了一項(xiàng)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的具體內(nèi)容是：對(duì)經(jīng)照射小鼠進(jìn)行移植后，對(duì)其外周血中Cd45.2- 供體與 CD45.1- 宿主白細(xì)胞進(jìn)行測(cè)定。