小鼠的灌胃給藥技術(shù)指導(dǎo)

從新藥研發(fā)角度來說，因口服給藥是最方便、經(jīng)濟(jì)安全的方式，在研究中最為常用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，灌胃是口服給藥最常用的方法，然而，看似簡(jiǎn)單的幾步，可對(duì)于初學(xué)者常常因?yàn)槭址ú划?dāng)而傷到氣道或食道，進(jìn)而引起小鼠死或者逐漸消瘦至死亡。那么在灌胃的實(shí)驗(yàn)中，我們究竟該掌握哪些注射手法和技巧呢？下面一起來看看！

灌胃： 借助器械（灌胃針）將藥物直接灌入動(dòng)物胃內(nèi)；

藥物循環(huán)途徑：食管→胃→小腸→小腸毛細(xì)血管（吸收入血）→空回腸靜脈→腸系膜上靜脈→肝門靜脈→肝→肝靜脈→下腔靜脈→右心房→右心室的吸收進(jìn)入血液循環(huán)。

灌胃給藥模式圖（來自網(wǎng)絡(luò)）

特點(diǎn)：

• 安全性高：各種給藥方式中，口服給藥是最安全的；

• 可選的劑型比較多：只要保證藥物是均勻且穩(wěn)定即可；

• 給藥體積大：小鼠：0.1-0.8ml（0.2 ml /10g）；大鼠：1-3ml。

• 生物利用度低：藥物經(jīng)胃腸道吸收，并存在胃腸道首過代謝和肝臟首過代謝，生物利用率相對(duì)較低，僅為靜脈的25-30%；對(duì)于部分化合物吸收不恒定，誤差較大。

灌胃的實(shí)驗(yàn)步驟

一、準(zhǔn)備工具

8/9/12號(hào)灌胃針頭配套1.0 ml注射器；如下圖為9號(hào)灌胃針頭/1.0 ml注射器，為了防止插入時(shí)造成損傷，針頭呈倒水滴型。

號(hào)灌胃針頭/1.0ml注射器

注：

• 灌胃針的分類：如下圖為小鼠灌胃常見灌胃針類別，根據(jù)尺寸不同有8/9/12號(hào)；另外還有直頭和彎頭區(qū)別；

• 灌胃針的選擇：尺寸大小的選擇一般可根據(jù)小鼠的年幼決定，如＜30g，建議用8、9號(hào)；30g以上可選擇12號(hào)；其中9號(hào)針頭直徑小于常規(guī)的大頭，特別適用幼鼠；直頭彎頭可根據(jù)個(gè)人習(xí)慣選擇，初學(xué)者建議先適用彎頭練習(xí)；

• 灌胃針的獲取：可直接購(gòu)買，不建議手動(dòng)處理的注射器針頭，易刺傷小鼠食道；

• 灌胃針的深度：因?yàn)閯?dòng)物有個(gè)體差異，實(shí)驗(yàn)前可先測(cè)量小鼠口腔至胃的距離，進(jìn)而選擇合適長(zhǎng)度的灌胃針，避免插入過深或過淺。小鼠入針一般3-4cm，大鼠一般4-6cm。

二、操作步驟

1. 固定小鼠：用左手拇指和食指抓住鼠耳和頸部皮膚，用左手的無名指和小指夾其背部皮膚和尾部，使其頭、頸和身體在一條直線；若第一次抓取時(shí)不得當(dāng)，一定要放開重抓，以免影響后續(xù)操作；

2. 進(jìn)針：右手持注射器（1ml的注射器配灌胃針頭），從一側(cè)嘴角進(jìn)針，輕壓舌根，輕輕向前推，進(jìn)入食管后會(huì)感覺有個(gè)刺空感，緩慢推進(jìn)，一般當(dāng)針插入小鼠3～4cm，即灌胃針的3/4時(shí)即可注射；

3. 注意： 若感到阻力或動(dòng)物掙扎比較厲害時(shí)，說明插錯(cuò)位置，應(yīng)馬上停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬�；待�?dòng)物恢復(fù)平靜后，再次嘗試。

如下為小鼠灌胃視頻:

https://v.qq.com/x/page/a0532rx8owt.html

大鼠灌胃同樣很常用，是不是難度更大呢？下面我們還為大家準(zhǔn)備了大鼠灌胃給藥視頻，請(qǐng)觀看：

https://v.qq.com/x/page/p0532q4jo13.html

常見問題解答

• 灌胃后，為何小鼠死亡？

主要考慮2種原因，① 因?yàn)樾∈蟮臍夤芸拷�食管，若灌胃針誤入氣管，藥物會(huì)進(jìn)入氣管導(dǎo)致小鼠當(dāng)場(chǎng)窒息死亡；②刺傷食道：若入針不當(dāng)，損傷或穿破食管，會(huì)導(dǎo)致小鼠逐漸消瘦并死亡。

• 灌胃時(shí)為了避免小鼠死亡，最應(yīng)該注意？

一定要主要正確抓取和插入。抓取時(shí)：小鼠體位一定要保持，頭、頸部及身體一條線，盡量保證插入的是食管而不是氣管。插入時(shí)：嘴角進(jìn)針，然后豎直向下，先試探性的稍微用力，慢慢向下，一旦感覺有阻礙就得停止，針無阻力才可注射。

• 大鼠灌胃和小鼠區(qū)別主要在于哪里？

大鼠操作步驟與小鼠基本一樣，但因大鼠個(gè)體很大，易掙扎，所以難度更大，所以一定要準(zhǔn)確抓取；另外灌胃針型號(hào)不一樣，多用16號(hào)，20號(hào)適合更大型大鼠，并根據(jù)注射藥物的量配套2或5ml的注射器（如下圖）。

灌胃其實(shí)并不難，但是對(duì)于初學(xué)者我們一定要多加練習(xí)，找到技巧才可以進(jìn)行試驗(yàn)。如果你實(shí)驗(yàn)中的小鼠因?yàn)楣辔附o藥后出現(xiàn)死亡或者身體消瘦、精神萎靡等癥狀，一般應(yīng)是插入氣管或者損傷食管，更有甚者可能是損傷肺部等器官，這時(shí)我們一定要找到原因，多加摸索總結(jié)，找到適合自己的手法。