大鼠腎損傷分子-1（Kim-1）elisa試劑盒操作說(shuō)明

注意事項(xiàng)
1. 試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正�，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過(guò)50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無(wú)微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
操作過(guò)程：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2）依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來(lái)定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9）在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。