原料乳與乳制品中三聚氰胺的檢測(cè)方案

【三聚氰胺】
據(jù)醫(yī)學(xué)專家介紹，三聚氰胺原本是一種低毒性化工原料，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，其在動(dòng)物內(nèi)代謝且不會(huì)存留，主要影響泌尿系統(tǒng)，不法商人在某個(gè)環(huán)節(jié)添加入乳制品中，可以人為提高表觀蛋白質(zhì)的含量，從而達(dá)到以次充好，獲取利益的目的，但由于嬰幼兒每天食用奶粉量大，造成三聚氰胺的大量攝入從而引起嬰幼兒的泌尿系統(tǒng)疾患，在患兒的尿液中甚至是腎臟細(xì)胞中都能檢測(cè)出來(lái)，嚴(yán)重者甚至?xí)�發(fā)展為腎功能不全。
                          

【檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)】
奧普斯科技參照GB/T22388-2008檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，采用Welchrom P-SCX固相萃取柱和XB-C18液相色譜柱，建立了原料乳與乳制品中三聚氰胺的前處理方法和高效液相色譜儀檢測(cè)方法，為廣大色譜工作者提供最有利的技術(shù)支持，讓三聚氰胺無(wú)所遁形。

【檢測(cè)方案】
1.適用范圍
適用于原料乳、乳制品以及乳制品中三聚氰胺的定量（適合GB/T22388-2008）
2.提取步驟
稱取2g(精確至0.01g)試樣與50ml具塞塑料離心管中，加入15ml1%三聚乙酸和5ml乙腈，超聲提取10min，再振蕩提取10min后，以不低于4000r/min離心10min,上清液經(jīng)三氯乙酸溶液潤(rùn)濕的濾紙過(guò)濾后，用三氯乙酸溶液定容至25ml，移取5ml濾液，加入5ml水，混勻后待凈化液。
3.SPE凈化步驟
SPE柱：P-SCX固相萃取柱（60mg/3ml）
SPE步驟
1）活化：依次加入3ml甲醇、5ml水活化，流出液棄去；
2）上樣：將提取液加入P-SCX柱中，流出液棄去；
3）淋洗：一次用3ml水、3ml甲醇淋洗，淋洗液棄去；
4）洗脫:用6ml 5%氨水-甲醇溶液洗脫，收集洗脫液；
5）濃縮：5度氮?dú)饣蛘咚�浴蒸發(fā)至干，殘留物用1ml流動(dòng)相定容，渦旋混合1min，過(guò)微孔濾膜后，供HPLC分析。
注：整個(gè)固相萃取全過(guò)程采用的自然重力流速過(guò)柱，不需要加壓也不需要抽真空。
           
4.色譜條件
實(shí)驗(yàn)儀器：APS80-16A二元高壓液相色譜儀
色譜柱：XB-C18（4.6*250mm,5um）
流動(dòng)相：乙腈離子對(duì)試劑緩沖液/乙腈=90/10(混勻，走單泵)
流速：1.5ml/min
進(jìn)樣量：10ul
柱溫：40℃
檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm
注：離子對(duì)試劑緩沖液配制方法。準(zhǔn)確稱取2.1g檸檬酸和2.16g辛烷磺酸鈉，加入約980ml水溶解，調(diào)節(jié)PH值至3.0后，定容至1L備用。
5.色譜圖和加標(biāo)回收率結(jié)果