MycoGuard™支原體檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用

孩子感冒咳嗽老不好，吃了抗生素也沒(méi)有用，小心是支原體惹的禍。

支原體與人類(lèi)健康關(guān)系最為密切的有4種，即肺炎支原體、人型支原體、解脲支原體與生殖支原體。其中，肺炎支原體對(duì)寶寶的危害最大，是引發(fā)肺炎的禍?zhǔn)字�一（后三者主要引起泌尿生殖道感染），稱(chēng)為支原體肺炎。支原體一年四季都可侵襲寶寶，春季尤其猖獗，小自嬰兒大到學(xué)齡兒童都在其覬覦之中，體弱者大多難以幸免。

培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖變慢、形態(tài)漸漸改變，是血清或培養(yǎng)基的問(wèn)題嗎？小心是支原體惹的禍。

除了危害人類(lèi)健康，支原體荼毒科研也是臭名昭著。細(xì)胞污染可分為細(xì)菌、霉菌、酵母菌、支原體污染，其中支原體污染發(fā)生的概率>50%。特別是實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞工廠在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，一直受到支原體污染的困惑。今天小艾帶您一起揪出這危害人類(lèi)健康以及荼毒科學(xué)研究的罪魁禍?zhǔn)?mdash;—支原體。

什么是支原體

支原體又稱(chēng)霉形體，直徑在0.1-0.3μm，是目前發(fā)現(xiàn)的最小的最簡(jiǎn)單的原核生物，可以輕松地通過(guò)濾膜，混入培養(yǎng)系統(tǒng)中，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分支狀等多種形態(tài)。通常依附在細(xì)胞膜表面，支原體沒(méi)有剛性的細(xì)胞壁，因此普通的抗生素對(duì)它根本不起作用，實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的種類(lèi)有：口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、發(fā)酵支原體、人型支原體、唾液支原體、肺支原體和梨支原體等。

支原體污染的后果

支原體污染后導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)變慢，狀態(tài)變差，不會(huì)馬上使細(xì)胞致死，但會(huì)影響細(xì)胞內(nèi)的各種參數(shù)，如改變細(xì)胞膜抗原性，改變細(xì)胞新陳代謝，干擾核酸的合成，改變 DNA 轉(zhuǎn)染效率，導(dǎo)致染色體畸變等。

怎么知道您的細(xì)胞正遭受支原體摧殘呢，推薦以下檢測(cè)方法：

• PCR法支原體檢測(cè)：

GeneCopoeia PCR支原體檢測(cè)試劑盒是一種快速簡(jiǎn)便的，以靈敏的PCR為基礎(chǔ)的支原體檢測(cè)試劑盒。該試劑盒包含經(jīng)過(guò)優(yōu)化的MycoGuard master mix、MycoGuard primer mix、超純水和陽(yáng)性對(duì)照。MycoGuard primer mix中含有的的引物可特異擴(kuò)增支原體基因組中rDNA保守序列，可檢測(cè)所有已知的支原體，包括細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程普遍遇到的種屬，例如M. arginini、M. arthritidis、M. bovis、M. fermentans、M. genitalium、M. hominis、M. hyorhinis、M. neurolyticum、M. orale、M. pirum、M. pneumoniae、M. pulmonis、M. salivarium 和U. urealyticum，本試劑盒能檢測(cè)包括以上常見(jiàn)支原體在內(nèi)的50多種支原體。通過(guò)260bp到280bp長(zhǎng)的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，很容易識(shí)別被支原體污染的樣品。

支原體檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)：

※ 簡(jiǎn)便

方便進(jìn)行PCR反應(yīng)

無(wú)需預(yù)處理細(xì)胞培養(yǎng)基

※ 快速

2小時(shí)即可完成檢測(cè)

※ 特異性強(qiáng)

只擴(kuò)增支原體DNA，真核細(xì)胞和細(xì)胞DNA不被擴(kuò)增

G：GeneCopoeia   A：競(jìng)爭(zhēng)公司    M：100 bp DNA marker    N：陰性對(duì)照

• 生物化學(xué)發(fā)光法

MycoGuard™檢測(cè)試劑盒可快速、簡(jiǎn)單檢測(cè)出細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中存在的支原體。支原體被溶解后，釋放到培養(yǎng)基的支原體酶與 MycoGuardTM 底物相互反應(yīng)，可催化 ADP 轉(zhuǎn)換為 ATP。ATP 含量的變化可通過(guò)生物發(fā)光的原理檢測(cè)，由 ATP 激發(fā)的熒光強(qiáng)度與 ATP 濃度呈線性關(guān)系。通過(guò)計(jì) 算樣本在添加底物前和添加底物后的 ATP 比率，可判斷樣品中是否存在支原體。

※ 操作時(shí)間短：半小時(shí)內(nèi)即可完成實(shí)驗(yàn)操作及檢測(cè)過(guò)程；

※ 靈敏度高：添加底物前，熒光數(shù)值穩(wěn)定；添加底物后，熒光在10分鐘內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定的線性增長(zhǎng)；

※ 穩(wěn)定性強(qiáng)：在不同的孵育時(shí)間條件下，底物濃度與熒光讀數(shù)的增長(zhǎng)關(guān)系保持穩(wěn)定

MycoGuard™支原體檢測(cè)試劑盒與某公司同類(lèi)試劑盒的靈敏度對(duì)比   兩家公司的產(chǎn)品分別檢測(cè)含支原體污染的L-15培養(yǎng)基以及陰性對(duì)照的培養(yǎng)基 (GCI: 紅&綠；某公司: 深藍(lán)&淺藍(lán))。添加底物后，兩家公司的檢測(cè)試劑盒在支原體污染的樣品中均有較明顯的數(shù)值攀升，且數(shù)值上升趨勢(shì)穩(wěn)定。GeneCopoeia (GCI)的試劑盒在陰性對(duì)照中，添加底物后的數(shù)值基本不變，比競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手公司的數(shù)值更穩(wěn)定。

GeneCopoeia致力于為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)工作者提供一流的產(chǎn)品和及時(shí)周到的服務(wù)，通過(guò)豐富的基因、蛋白、抗體、分析試劑盒等產(chǎn)品線，加速您的研究進(jìn)程。作為GeneCopoeia在中國(guó)的區(qū)域一級(jí)代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶(hù)提供最全面的GeneCopoeia產(chǎn)品以及客戶(hù)訂制化服務(wù)。

作為GeneCopoeia在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶(hù)提供最全面的GeneCopoeia公司產(chǎn)品以及客戶(hù)訂制化服務(wù)。