輕松解決細(xì)胞增殖的檢測(cè)方法

無(wú)論單細(xì)胞還是多細(xì)胞都是以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì)胞，進(jìn)行增殖,用來(lái)補(bǔ)充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞。

細(xì)胞增殖的研究方法有很多，主要包括：BrdU，EdU，CCK8等方法。其中EdU檢測(cè)方法是最新的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法。

①試劑盒檢測(cè)細(xì)胞代謝活性（基于mtt、cck-8等）

mtt（噻唑藍(lán)）：通過(guò)添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測(cè)定�；罴�(xì)胞能將四咪唑鹽（如mtt、xtt、wst-1）還原成藍(lán)紫色的甲瓚或甲瓚鹽（formazan），可通過(guò)分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。

ScienCell MTT檢測(cè)試劑盒

MTT法又稱(chēng)MTT比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲臜，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì).

cell counting kit╟8 （cck-8）中的wst-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲舎染料能夠溶解在組織培養(yǎng) 基中，生成的甲舎量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。該試劑盒可適用于96孔板培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞。

②dna的合成的檢測(cè)（基于brdu的免疫法或edu的點(diǎn)擊化學(xué)法），可通過(guò)體內(nèi)成像、微孔板或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) 等多種技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞示蹤。

dna的新組裝合成是細(xì)胞生長(zhǎng)的必要條件，故經(jīng)常被用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞增殖、細(xì)胞活力及凋亡的檢測(cè)。brdu及edu，都是胸腺嘧啶的非放射性類(lèi)似物，能摻入增殖細(xì)胞的dna中，可通過(guò)對(duì)brdu及edu的檢測(cè)，從而對(duì)dna的合 成量進(jìn)行測(cè)定。

③ edu（5-ethynyl-2’- deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶（t）滲 入正在復(fù)制的dna分子中，通過(guò)基于edu與apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞dna復(fù)制活性，適用于細(xì) 胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、dna修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行sirna、mirna、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。