NRAMP-1 elisa檢測(cè)試劑盒免疫檢測(cè)方法

NRAMP-1 elisa檢測(cè)試劑盒免疫檢測(cè)方法：

（一）夾心法：

可分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法。

雙抗體夾心法將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體；加入待測(cè)樣本，形成固相抗體-抗原復(fù)合物，洗滌后加入標(biāo)記特異性抗體并孵育，形成固相抗體-抗原-標(biāo)記抗體復(fù)合物，洗滌除去未結(jié)合的標(biāo)記抗體；加入不同的反應(yīng)物質(zhì)（如酶促底物、堿性溶液、氧化劑等），得到反應(yīng)信號(hào)。

雙抗原夾心法與雙抗體夾心法類似，將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗原；加入待測(cè)樣本，孵育使樣本中的抗原與固相抗體充分反應(yīng)，形成固相抗原-抗體復(fù)合物，洗滌除去未結(jié)合物質(zhì)；加入標(biāo)記特異性抗原并孵育，加入反應(yīng)物質(zhì)，判讀結(jié)果。

（二）間接法：

間接法僅能檢測(cè)抗體，基本原理是將特異性抗原包被在固相載體上，加入待測(cè)樣本，形成固相抗原-受測(cè)抗體復(fù)合物；孵育洗滌后，加入標(biāo)記抗體。

（三）競(jìng)爭(zhēng)法：

既檢測(cè)抗體，也可檢測(cè)抗原。

基本原理是先將抗小分子抗原的特異性抗體包被在固相載體上，然后同時(shí)加入待測(cè)樣本與標(biāo)記小分子，待測(cè)樣本中的小分子與標(biāo)記小分子競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體相結(jié)合，溫浴一定時(shí)間后洗滌加入不同的反應(yīng)物質(zhì)，得到反應(yīng)信號(hào)。

（四）捕獲法：

NRAMP-1 elisa檢測(cè)試劑盒可測(cè)定血清中某種特定的免疫球蛋白，目前主要用于IgM抗體的檢測(cè)。通常包被的固相抗體為針對(duì)IgM分子μ鏈的抗體，加入待測(cè)樣本后，特異及非特異的IgM抗體都會(huì)被固相抗體捕獲，之后加入能夠與特異性抗體結(jié)合的已知抗原，再加入能夠與已知抗原相結(jié)合的標(biāo)記抗體。