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ITS和ITSE等無血清培養(yǎng)基添加物在細(xì)胞體外培養(yǎng)的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):3300 發(fā)布日期:2020-4-20  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
 
我們知道,細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入血清,以維持細(xì)胞的生長和存活。血清,尤其是牛血清,因成分復(fù)雜、批間差大和存在病原體污染的可能性等原因廣為人們所詬病,而無血清培養(yǎng)基添加物卻日益受到科研和生物制藥用戶的青睞。BioGems(PeproTech旗下品牌)為您提供多種無血清培養(yǎng)基添加物 (見下表)。
 
 
≡ ITS ≡
ITS (Insulin-Transferrin-Selenium 胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒)是BioGems推出的第一種無血清培養(yǎng)基添加物混合裝,除含有胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白外,還含有另一種無血清培養(yǎng)基必須添加物---硒 (Selenium)。硒是一種微量元素,是谷胱甘肽過氧化物酶、硫氧還蛋白還原酶和其他抗氧化物酶的關(guān)鍵組分。
 
≡ ITSE ≡
 
 
 
≡ 胰島素//Insulin
 
 
胰島素(Insulin)由Sir Frederick Grant Banting和Charles H Best于1921年發(fā)現(xiàn),因其特異性由胰島β細(xì)胞分泌而得名。
 
Insulin結(jié)構(gòu)圖
 
無血清培養(yǎng)基中,胰島素為必加組分,它可以促進(jìn)無血清細(xì)胞培養(yǎng)液中細(xì)胞的生長,調(diào)節(jié)細(xì)胞對葡萄糖、氨基酸和脂類的攝取、利用和儲(chǔ)存,同時(shí)抑制糖原、蛋白質(zhì)和脂肪的分解。需要注意的是,胰島素對細(xì)胞的促生長作用主要是通過其與細(xì)胞膜上胰島素樣生長因子(Insulin-like growth factors, IGFs)受體相互作用而介導(dǎo)的;而對細(xì)胞的代謝調(diào)節(jié)作用主要是通過其與細(xì)胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導(dǎo)的。此外,胰島素也可通過IGFR與IR的介導(dǎo),發(fā)揮抗凋亡作用。
體外培養(yǎng)不同類型細(xì)胞時(shí),無血清培養(yǎng)基中所添加的胰島素量也有所區(qū)別,一般在1-10mg/L之間。
 
≡ 轉(zhuǎn)鐵蛋白//Transferrin
 
 
轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)于1945年首先在人血清中發(fā)現(xiàn),為無血清培養(yǎng)基必需添加物組分,通過與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(Transferrin Receptor , TfR) 相互作用,在無血清細(xì)胞培養(yǎng)過程中發(fā)揮重要功能。轉(zhuǎn)鐵蛋白能與三價(jià)鐵離子可逆性結(jié)合,調(diào)節(jié)鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝,維持細(xì)胞內(nèi)的鐵平衡。我們對轉(zhuǎn)鐵蛋白的轉(zhuǎn)鐵作用都很了解,但其實(shí)它最重要的意義在于維持細(xì)胞的生長和增殖,也就是說它有類似于生長因子的功能。而且,轉(zhuǎn)鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑,可以避免細(xì)胞外環(huán)境中自由基的產(chǎn)生,防止細(xì)胞受到傷害。
 
Transferrin結(jié)構(gòu)圖
 
BioGems的Transferrin 為Holo-transferrin, Holo-transferrin 除發(fā)揮轉(zhuǎn)鐵作用外,自身即可作為細(xì)胞的鐵源,無需在培養(yǎng)基中添加外源性鐵。不同細(xì)胞,對轉(zhuǎn)鐵蛋白的需求量不同,一般原代細(xì)胞的推薦濃度為5 -100mg/L;中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO)推薦濃度為10 -50mg/L;雜交瘤和Vero細(xì)胞推薦濃度為5 -20mg/L。具體使用濃度還是要根據(jù)細(xì)胞的種類、狀態(tài)和想要實(shí)現(xiàn)的功能來通過實(shí)驗(yàn)確定。
 
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