新冠病毒研究用水系列三：如何獲得完美的核酸電泳條帶

什么是核酸電泳？
核酸電泳是基因操作的核心技術之一，用于分離、鑒定DNA、RNA 分子混合物和純化DNA片段。
核酸電泳最讓大家頭疼的問題 - 異常條帶
核酸電泳實驗中，常常會遇到條帶模糊、拖尾、扭曲等現(xiàn)象，究其原因，除了操作不當，電泳條件未優(yōu)化，電泳緩沖液也是重要的影響因素之一。電泳緩沖液的組成及其離子強度影響DNA的電泳遷移率。  

• 緩沖液離子強度低，電導率小，導致DNA遷移緩慢；如果多次使用，離子強度降低，PH值上升，緩沖能力減弱，從而影響電泳效果。
• 緩沖液離子強度高，則電導率高并明顯產(chǎn)熱，嚴重時會引起凝膠熔化或DNA變性。

   

常見問題	原因	解決方法
條帶模糊	核酸降解	使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液
	電泳緩沖液陳舊	建議經(jīng)常更換緩沖液
	有蛋白污染	使用低有機物的超純水配置緩沖液
	核酸變性	使用超純水或者緩沖液稀釋樣品
條帶黯淡	核酸濃度過低	增加上樣量
	核酸降解	使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液
	條帶被示蹤染料掩蓋	提高上樣量；避免使用與目的片段遷移率相同的示蹤染料
拖帶或涂抹帶	PCR體系或PCR程序不合適	優(yōu)化PCR體系和PCR程序
條帶扭曲	配膠的緩沖液和電泳緩沖液不同	配膠和電泳中使用同一批緩沖液
	電泳時電壓過高	控制電泳時電壓不超過6V/CM

核酸電泳用純水要求
為了防止水中雜質（如：核酸酶、蛋白質、離子等）對電泳結果的影響，核酸電泳實驗配置緩沖溶液或稀釋樣品需要使用超純水：

• 電阻率 18.2 MΩ·cm
• TOC < 10 ppb
• 無核酸酶和蛋白酶
• 細菌總數(shù)< 1 CFU/mL
• 熱原< 0.005 EU/mL
• 0.22μm 或更低的顆粒過濾

核酸電泳用純水機推薦 

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關于樂楓生物
    樂楓生物(Rephile Bioscience，Ltd.) 是一家專業(yè)從事高端水純化和實驗室分離純化產(chǎn)品研發(fā)、設計和制造的企業(yè)，為高科技生物技術和生命科學領域的用戶服務。樂楓公司著眼于全球發(fā)展，在中國、美國、法國、印度、南非等近20個國家建立了銷售機構，同時也為國際大型公司提供OEM和ODM，產(chǎn)品銷往包括歐美的近100個國家。成立十余年，樂楓持續(xù)投入研發(fā)，創(chuàng)立出了自己的產(chǎn)品品牌RephiLe（瑞楓），推出了多個新概念產(chǎn)品- 無線連接的Genie系列純水系統(tǒng)和智能型大流量純水工作站Super-Genie等。目前樂楓純化柱填料配方齊全，也提供多款密理博純水系統(tǒng)的兼容耗材。 
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