m6A甲基化的疑難雜癥與治療方法

 

       處方：按照說(shuō)明書(shū)上給的配制比例進(jìn)行稀釋?zhuān)�用TE buffer稀釋?zhuān)�建議即用即配，計(jì)算好所需的量再進(jìn)行稀釋配制。

 

     （2）為什么有些組分稀釋后需要放置在冰上？

 

       處方：使用前應(yīng)將稀釋的成分（例如PC標(biāo)準(zhǔn)品）放在冰上，以最大程度地減少試劑降解并保持試劑完整性。

 

     （3）稀釋液必須是TE嗎？可以替換成DEPC水或者無(wú)RNAase的水嗎？

 

       處方：可以使用DEPC水替代TE buffer，無(wú)RNAase的水也可以。

 

       5.其他

 

      （1）所有組分需要放置在室溫條件下回溫嗎？

 

       處方：對(duì)于產(chǎn)品組份中的Wash buffer，保存在低溫下可能會(huì)有鹽離子等沉淀，在使用前需要將其拿至室溫進(jìn)行回溫，沉淀即可溶解，這樣可進(jìn)行正常的實(shí)驗(yàn)。

 

     （2）如何減少?gòu)?fù)孔間差異？

 

       處方：

 

       【1】在板中垂直而不是水平地加載復(fù)制樣品，因?yàn)檫@可以確保同時(shí)添加溶液以復(fù)制孔，并有助于最小化復(fù)制差異。

 

       【2】確保從孔中完全去除洗滌緩沖液，因?yàn)槿魏螝埩舻木彌_液都會(huì)增加背景信號(hào)和重復(fù)變異性，尤其是在敏感的ELISA中（例如用于甲基化檢測(cè)的ELISA）。

 

       【3】使用手動(dòng)移液器代替典型的板輕拂/傾倒方法，以確保完全去除緩沖液并最大程度減少孔間污染。

 

       （3）有相關(guān)的參考文獻(xiàn)嗎？

       

       說(shuō)道參考文獻(xiàn)，不僅有，而且非常多，還是處于實(shí)時(shí)更新的狀態(tài)，日期都非常的新（https://www.epigentek.com/catalog/epiquik-m6a-rna-methylation-quantification-kit-colorimetric-p-3646.html）：

 

       Tsuruta K. et. al. et. al. (September 2020). RNA N6-methyladenosine demethylase FTO regulates PD-L1 expression in colon cancer cellsBiochemical and Biophysical Research Communications. 530(1)

       Chen S et. al. (August 2020). WTAP promotes osteosarcoma tumorigenesis by repressing HMBOX1 expression in an m⁶A-dependent manner.Cell Death Dis. 11(8):659.

       Xu Y et. al. (August 2020). The FTO/miR-181b-3p/ARL5B signaling pathway regulates cell migration and invasion in breast cancer.Cancer Commun (Lond).

       Du J. et. al. et. al. (August 2020). N 6-Adenosine Methylation of Socs1 mRNA is Required to Sustain the Negative Feedback Control of Macrophage ActivationDevelopmental Cell.

       Zhang S et. al. (August 2020). Pregnancy carbon black nanoparticles exposure-induced neurobehavioral deficits are associated with m6A modification in offspring.

       Yang Z. et. al. et. al. (August 2020). RNA N6-Methyladenosine Reader IGF2BP3 Regulates Cell Cycle and Angiogenesis in Colon CancerGeneral Surgery.

       Zhu S et. al. (July 2020). Dexmedetomidine Suppressed the Biological Behavior of HK-2 Cells Treated with LPS by Down-Regulating ALKBH5.

       Jian D et. al. (July 2020). METTL14 aggravates endothelial inflammation and atherosclerosis by increasing FOXO1 N6-methyladeosine modifications.10(20):8939-8956.

 

       最后，溫馨提示：這個(gè)產(chǎn)品p-9005是有配套的中文說(shuō)明書(shū)的，但是還請(qǐng)各位同學(xué)們拿到產(chǎn)品后，認(rèn)真閱讀英文說(shuō)明書(shū)喔，英文說(shuō)明書(shū)為主，中文說(shuō)明書(shū)為輔。

 

       以上就是小編整理的同學(xué)們常問(wèn)的有關(guān)這個(gè)試劑盒的問(wèn)題，各位同學(xué)若是有以上問(wèn)題，可以借鑒喲~~

 

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