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全套抗體標記工具-全套抗體和蛋白質(zhì)標記試劑盒的使用

瀏覽次數(shù):1283 發(fā)布日期:2020-9-16  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負
       用特定標簽標記抗體已成為生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中的重要且常規(guī)程序,標簽的范圍從視覺標記(例如熒光染料)到半抗原分子(例如生物素),標簽的作用有增強免疫復(fù)合物和蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的可見性,以及用于蛋白質(zhì)的分離和純化。
 
       在確定選擇哪種標簽類型時,應(yīng)側(cè)重于抗體的下游應(yīng)用。熒光標簽主要用于細胞成像,流式細胞儀,熒光印跡和免疫熒光應(yīng)用,而酶標(例如HRP和AP)通常用于WB,ELISA和IHC應(yīng)用。Hapten標簽(例如生物素)在可能的標簽選項中用途更為廣泛,因為它們可用于蛋白質(zhì)分離和純化以及任何上述應(yīng)用。
 
       下面我們?yōu)槟峁┝巳卓贵w和蛋白質(zhì)標記試劑盒供您選擇。這些試劑盒是專為初學(xué)者設(shè)計的,具有最簡單的操作規(guī)程和最少的操作步驟。
 
 
       各類抗體標記試劑盒一覽
 
抗體標記試劑盒 ReadiLink™ 試劑盒 ReadiLink™xtra 試劑盒 Buccutite™ 試劑盒
每個反應(yīng)標記的抗體量 50ug 50ug 25 µg,50 µg或1 mg
標記原理 使用胺反應(yīng)性染料靶向游離胺基 使用胺反應(yīng)性染料靶向游離胺基 使用兩個專有的連接器以促進蛋白-蛋白結(jié)合
可用標簽 iFluor™染料,mFluor™染料,AlexaFluor®等價AF染料,F(xiàn)ITC,Cy3,Cy5,Cy7,生物素 iFluor™染料,AlexaFluor®等效AF染料,F(xiàn)ITC,Cy3,Cy5,Cy7 PE,APC,串聯(lián)染料,HRP,AP
標簽和抗體之間的鍵類型 共價 共價 共價
是否與BSA或其他穩(wěn)定劑兼容
是否需要純化
共軛所需的時間 1小時 1小時 2小時
操作時間 約10分鐘 約10分鐘 約15分鐘
批次間差異
應(yīng)用 成像,F(xiàn)C,IF,WB 成像,F(xiàn)C,IF,WB FC,IF,IHC,WB,ELISA
       
       一、ReadiLink™快速抗體標記試劑盒
 
       ReadiLink™快速抗體標記試劑盒提供了一種快速便捷的方法,可以使用我們的iFluor™染料,mFluor™染料或其他標記物來標記微量的抗體。ReadiLink™試劑盒的獨特化學(xué)性質(zhì)使研究人員無需純化步驟即可輕松標記和回收100%的抗體。由于ReadiLink™共軛物被共價標記,因此可以長期保存,非常適合要求苛刻的應(yīng)用,包括熒光顯微鏡,多色成像,多重流式細胞術(shù),一級檢測,IHC,F(xiàn)ISH,ELISA等。
 
       ReadiLink™快速抗體標記試劑盒的主要功能:
 
       1.標記單克隆抗體,多克隆抗體或其他蛋白質(zhì)
       2.可用于標記100 µg抗體(兩次分別標記50 µg抗體的反應(yīng))
       3.100%的抗體回收,不需要的產(chǎn)物的純化
       4.共軛物可在1小時內(nèi)投入使用,動手時間最短約為10分鐘
       5.可選擇iFluor™染料,mFluor™染料,AlexaFluor®equivalent AF染料,F(xiàn)ITC,Cy3,Cy5,Cy7,BSA,KLH或生物素
       6.避免使用任何含胺的緩沖液(例如Tris或甘氨酸)
       7.標記前必須去除蛋白穩(wěn)定劑(例如BSA或明膠),對于需要與BSA兼容的抗體標記,請使用ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒
 
       方便的設(shè)計以取得最大的效果:
 
 
       ReadiLink™快速抗體標記試劑盒利用胺反應(yīng)性標記來制備共價標記的結(jié)合物。這些反應(yīng)性標記選擇性地靶向并結(jié)合至目標抗體上的伯胺(例如賴氨酸殘基)。要標記您的抗體,只需將您的抗體溶液(濃度約1 mg / mL)與ReadiLink™反應(yīng)緩沖液混合,將混合物添加到預(yù)先配制的標記瓶中,然后孵育30至60分鐘。最后,將TQ™染色淬滅緩沖液添加到混合物中并充分混合。這部分很關(guān)鍵,因為它消除了背景干擾且不需要色譜柱純化步驟。孵育10分鐘后,即可使用標記物。
 
       ReadiLink™——Lightning-Link®抗體標記試劑盒的高性能替代品
 
 
 
標簽套件 CD4(SK3)-共軛 染色指數(shù)
ReadiLink™ Kit CD4-iFluor™488共軛物 43
Lightning-Link® Kit CD4-AlexaFluor®488共軛物 26
 

       圖2.人PBMC細胞的流式細胞儀分析。用ReadiLink™Rapid iFluor488抗體標記試劑盒(貨號:1255)或Lightning-Link®Rapid AlexaFluor®488制備的抗人CD4抗體。使用FITC通道中的ACEA NovoCyte流式細胞儀監(jiān)測熒光信號。
 
 
       表1. ReadiLink™快速抗體標記試劑盒選擇指南
 
熒光團 對應(yīng)替代的熒光團 Ex / Em(nm) 熒光成像 流式細胞 貨號
mFluor™Violet 420 Cascade® Blue 398/411  -- 1105
iFluor™Violet 350 AMCA,AlexaFluor®350 345/442  -- 1220
mFluor™Violet 450 Pacific Blue® 403/454  -- 1100
mFluor™Violet 510 -- 414/508  -- 1110
iFluor™488 FITC,AlexaFluor®488 491/514 1255
FITC -- 494/520 1299
mFluor™Violet 540 Pacific Orange® 405/537  -- 1114
Cy3 -- 555/565  -- 1290
iFluor™555 Cy3,AlexaFluor®555 552/567  -- 1227
mFluor™Blue 570 R-PE 553/570  -- 1120

       二、BSA兼容的ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒
       
       具有BSA兼容性的ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒將一抗標記帶到了全新的便利水平。ReadiLink™xtra試劑盒將優(yōu)化的標記方案與經(jīng)過特殊配制的標記瓶組合在一起,可在常見緩沖液添加劑和蛋白穩(wěn)定劑的存在下快速,可重復(fù)地標記微量的一抗。僅需兩個簡單步驟,無需進行過柱純化,即可共價標記適用于任何基于免疫的應(yīng)用的抗體。
 
       ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒的主要功能:
 
       1.與BSA和其他蛋白穩(wěn)定劑兼容
       2.標記單克隆抗體,多克隆抗體或其他蛋白質(zhì)
       3.標記100 µg抗體(兩次分別標記50 µg抗體的反應(yīng))
       4.100%的抗體回收,不需要產(chǎn)物純化步驟
       5.共軛物可在1小時內(nèi)投入使用,動手時間最短約為10分鐘
       6.可選擇iFluor™染料,mFluor™染料,AlexaFluor®等效AF染料,F(xiàn)ITC,Cy3,Cy5或Cy7
 
       表2. ReadiLink™xtra快速抗體標記試劑盒
 
名稱 Ex(nm) Em(nm) 規(guī)格 貨號
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™350抗體標記試劑盒 344 448 2個標簽 1950
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™488抗體標記試劑盒 491 516 2個標簽 1955
ReadiLink™xtra Rapid AF488抗體標記試劑盒 499 520 2個標簽 1978
ReadiLink™xtra Rapid FITC抗體標記試劑盒 491 516 2個標簽 1970
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™555抗體標記試劑盒 556 569 2個標簽 1958
ReadiLink™xtra Rapid AF555抗體標記試劑盒 553 568 2個標簽 1980
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™594抗體標記試劑盒 587 603 2個標簽 1960
ReadiLink™xtra Rapid AF594抗體標記試劑盒 590 618 2個標簽 1982
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™647抗體標記試劑盒 654 669 2個標簽 1963
ReadiLink™xtra Rapid AF647抗體標記試劑盒 650 671 2個標簽 1985
 
       三、Buccutite™蛋白到蛋白標記試劑盒
 
       Buccutite™交聯(lián)技術(shù)提供了一種簡便的方法,可以用辣根過氧化物酶(HRP),堿性磷酸酶(AP)或藻膽蛋白共價標記蛋白質(zhì)和抗體。與傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)結(jié)合技術(shù)(例如SMCC化學(xué)標記方法)相比,Buccutite™結(jié)合顯著增強了穩(wěn)定性,降低了要求。這些試劑盒可在不到兩個小時的時間內(nèi)對微克抗體(每個標記反應(yīng)低至25 µg)進行最佳標記,而無需純化,且收率100%。使用Buccutite™標記試劑盒,可以常規(guī)制備經(jīng)共價標記的結(jié)合物,這些結(jié)合物能夠承受典型的免疫測定(例如ELISA,IHC和Western blot)或流式細胞儀應(yīng)用中通常需要的嚴格洗滌技術(shù)。
 
       Buccutite™快速抗體標記試劑盒的主要功能
 
       1.標記25 µg至1 mg抗體
       2.標簽的選擇包括HRP,AP,藻紅蛋白(PE),別藻藍蛋白(APC),PerCP,PE串聯(lián)染料和   APC串聯(lián)染料
       3.不到2小時的標記時間,無需純化
       4.100%抗體回收
 
       Lightning-Link®抗體標記試劑盒的高性能替代品
 
標簽 CD4(SK3)-共軛 染色指數(shù)
Buccutite™ kit CD4-PE共軛物 55
Lightning-Link® kit CD4-PE共軛物 28
 
       圖3. 人PBMC細胞的流式細胞儀分析。用Buccutite™快速PE抗體標記試劑盒(目錄號:1310)或Lightning-Link®PE制備的抗人CD4抗體。使用ACEA NovoCyte流式細胞儀在FITC通道中監(jiān)測熒光信號
 
       表3. Buccutite™快速抗體標記試劑盒
 
名稱 Ex(nm) Em(nm) 規(guī)格 貨號
Buccutite™快速蛋白質(zhì)交聯(lián)試劑盒*經(jīng)過微尺度優(yōu)化,可在每個反應(yīng)中標記100 ug抗體* -- -- 2個標簽 1315
Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯(lián)試劑盒*針對標記1 mg蛋白進行了優(yōu)化* -- -- 1 kit 5504
Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯(lián)試劑盒*針對標記100 ug蛋白進行了優(yōu)化* -- -- 1 kit 5503
Buccutite™過氧化物酶(HRP)抗體偶聯(lián)試劑盒*針對標記25 ug蛋白進行了優(yōu)化* -- -- 2個標簽 5505
Buccutite™快速PE抗體標記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標記100 ug抗體的微尺度優(yōu)化* 565 575 2個標簽 1310
Buccutite™快速PE抗體標記試劑盒*經(jīng)過微尺度優(yōu)化,可標記每個反應(yīng)25 ug抗體* 565 575 2個標簽 1312
Buccutite™快速PE-Texas Red Tandem抗體標記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標記100 ug抗體的微量優(yōu)化* 565 600 2個標簽 1318
Buccutite™快速PE-Texas Red Tandem抗體標記試劑盒*針對每次反應(yīng)標記25 ug抗體的微尺度優(yōu)化* 565 600 2個標簽 1343
Buccutite™快速PE-Cy5串聯(lián)抗體標記試劑盒*針對每次反應(yīng)可標記100 ug抗體的微量優(yōu)化* 565 674 2個標簽 1322
Buccutite™快速PE-Cy5串聯(lián)抗體標記試劑盒*優(yōu)化用于每次反應(yīng)標記25 ug抗體的微量分析儀* 565 674 2個標簽 1340
 
       看到這兒,您心動了嗎?馬上聯(lián)系小艾吧!
 
       作為一家具有高端的技術(shù)實力、先進的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè),總部位于武漢光谷高新技術(shù)開發(fā)區(qū),服務(wù)面向全國。艾美捷科技是集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品、整合的解決方案,及優(yōu)質(zhì)的物流服務(wù)。為了更好的服務(wù)客戶,公司組建了一支經(jīng)驗豐富的研發(fā)團隊-艾美捷生物技術(shù)中心,進入研發(fā)生產(chǎn)階段,將更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品推薦給國內(nèi)生物領(lǐng)域的同仁們!
 
       艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在短時間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。
 
來源:艾美捷科技有限公司
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