蛋白磷酸酶Cdc25組合熒光檢測(cè)試劑盒在多種癌癥檢測(cè)治療的應(yīng)用

我們知道癌癥最重要的特征就是細(xì)胞的惡性增殖，而細(xì)胞增殖又少不了細(xì)胞分裂周期基因（cell division cycle，Cdc）的參與。細(xì)胞周期中必需的Cdc25基因所表達(dá)的細(xì)胞分裂周期因子25（cell division cyclin25，Cdc25）屬于細(xì)胞周期調(diào)控蛋白，在真核生物的細(xì)胞有絲分裂中起重要調(diào)控作用，是細(xì)胞周期關(guān)鍵因子之一，目前，Cdc25也已逐漸成為癌癥治療的潛在靶標(biāo)。

 

 

細(xì)胞分裂周期的進(jìn)程是通過CDC25磷酸酶激活一組特殊的細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶CDK進(jìn)行調(diào)控的。CDC25蛋白能特異性地脫去CDKs酪氨酸/蘇氨酸殘基上的磷酸基團(tuán)去磷酸化，參與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)并調(diào)控應(yīng)對(duì)DNA損傷，在正常的細(xì)胞周期中具有重要的作用。哺乳動(dòng)物至少有3種CDC25磷酸酶亞型，分別為CDC25A、CDC25B和CDC25C。近年來的研究顯示，CDC25A主要在細(xì)胞的G1/S期轉(zhuǎn)變中發(fā)揮作用，CDC25B在S期被激活，繼而在細(xì)胞質(zhì)中激活CDK1(Cdc2)/周期蛋白B，被活化的CDK1/周期蛋白B再激活CDC25C，通過正反饋機(jī)制調(diào)控有絲分裂。

 

研究表明，Cdc25在多種癌癥中過表達(dá)。Cdc25磷酸酶的兩種亞型Cdc25A和Cdc25B，一種或兩種同時(shí)在多種癌癥中過表達(dá)，如乳腺癌、肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、食道癌、胃癌、肺癌、肝細(xì)胞癌、非小細(xì)胞肺癌、非霍奇金淋巴瘤、胰導(dǎo)管癌、甲狀腺和頭頸癌等.目前也有研究證實(shí)CDC25C功能的失調(diào)將導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。因此，以磷酸酶Cdc25為靶標(biāo)的抑制劑藥物的研發(fā)，對(duì)于開發(fā)抗腫瘤藥物具有重要意義。

 

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蛋白磷酸酶Cdc25組合熒光（人）檢測(cè)試劑盒原理：熒光底物鄰甲基熒光磷酸酯 (OMFP), 經(jīng)CDC25去磷酸化后得到的產(chǎn)物鄰甲基熒光素 (OMF) 在被482-502nm激發(fā)光激發(fā)后可發(fā)射出波長(zhǎng)為510-540 nm的可檢測(cè)的熒光信號(hào), 通過觀察熒光信號(hào)的強(qiáng)弱，得到抑制劑或調(diào)節(jié)劑對(duì)蛋白磷酸酶Cdc25A、Cdc25B和Cdc25C的抑制情況。

 

細(xì)胞分裂周期因子25(Cdc25)檢測(cè)試劑盒
 

結(jié)果1——抑制劑分析

 

釩酸鈉對(duì)Cdc25A的抑制曲線	釩酸鈉對(duì)Cdc25B的抑制曲線	釩酸鈉對(duì)Cdc25C的抑制曲線

結(jié)果2——Cdc25酶活分析

 

Cdc25A催化結(jié)構(gòu)域重組蛋白的劑量酶活曲線	Cdc25B催化結(jié)構(gòu)域重組蛋白的劑量酶活曲線	Cdc25C催化結(jié)構(gòu)域重組蛋白的劑量酶活曲線

 

結(jié)果3——Cdc25酶酶動(dòng)力學(xué)分析

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