LS18平鋪光片顯微鏡成像應(yīng)用案例

​如cell reports: 適用于透明組織成像的多功能平鋪光片顯微鏡文章所述，平鋪光片顯微鏡不僅可以提高樣本成像的空間分辨率及成像效率，還可通過更換不同NA的檢測物鏡，放大倍數(shù)，調(diào)整激發(fā)光片實(shí)現(xiàn)對(duì)厘米級(jí)的組織樣本進(jìn)行多分辨率級(jí)別快速成像。下面就請(qǐng)跟著小編一起來看看锘海LS18平鋪光片顯微鏡在不同的分辨率下分別能看到哪些結(jié)構(gòu)吧！

（1）小鼠全腦毛細(xì)血管染色成像

如圖1所示，為LS18平鋪光片顯微鏡對(duì)染色的小鼠腦進(jìn)行3小時(shí)成像獲取的整腦血管網(wǎng)絡(luò)。該成像結(jié)果展示了能識(shí)別到的幾乎所有的毛細(xì)血管，該成像分辨率為橫向3.3um，縱向7um。

圖1. 小鼠全腦毛細(xì)血管染色成像

 

如圖2 所示，分別從該小鼠腦的橫斷面和冠狀面提取的100um局部投射結(jié)果，提取局部100um子區(qū)域，由此可見，采用平鋪光片顯微鏡在微米級(jí)空間分辨率下對(duì)3D組織進(jìn)行成像，其成像結(jié)果近乎各向同性！

 

圖2. 橫斷面（XY面）100um投射（左），冠狀面（XZ面）100um投射（右）

 

為觀察到更細(xì)微的組織結(jié)構(gòu)，我們將平鋪光片顯微鏡的檢測路徑放大倍數(shù)提升至12.6X，此時(shí)成像的voxel size 為500nm*500nm*1.5um，如圖3所示，從該成像結(jié)果我們可以觀察到每一根毛細(xì)血管之間的相互連接關(guān)系，方便后續(xù)進(jìn)一步分析不同功能性腦區(qū)之間血管之間的相互關(guān)系。

 

圖3. 高分辨率下100um投射（voxel size: 500nm*500nm*1.5um）

 

（2）小鼠腎臟血管染色成像

平鋪光片技術(shù)為科研工作者對(duì)完整組織器官成像及局部高分辨成像需求提供了完美捷徑！如圖4所示，LS18光片顯微鏡呈現(xiàn)對(duì)血管染色的小鼠腎臟進(jìn)行整體快速成像，局部高分辨率成像，如圖5所示，整個(gè)成像過程在3小時(shí)內(nèi)完成。

 

圖4. 小鼠腎臟血管染色成像

 

圖5. 局部高倍成像層切面

 

 

（3）小鼠肺的神經(jīng)結(jié)構(gòu)成像

2019年突如其來的新冠肺炎疫情迅速蔓延全國，學(xué)術(shù)界工作者們快速響應(yīng)，追逐溯源，研究機(jī)理，到臨床疫苗研發(fā)，在國家資本及學(xué)術(shù)熱情的支持下，科研成果呈井噴式爆發(fā)，LS18光片顯微鏡也努力為取得進(jìn)一步科研成果貢獻(xiàn)自己的一份力量！圖6 展示了小鼠肺的神經(jīng)結(jié)構(gòu)成像，可以輔助科研工作者了解肺當(dāng)中的神經(jīng)與各氣管之間相互關(guān)系。如圖7所示，科研工作者可根據(jù)自己感興趣的部位進(jìn)行結(jié)構(gòu)提取，或是從層切面對(duì)單根神經(jīng)進(jìn)行逐條追蹤。

 

圖6. 小鼠肺的神經(jīng)結(jié)構(gòu)成像

 

圖7.  300um截面神經(jīng)結(jié)構(gòu)提�。ㄉ希�，

層切面神經(jīng)追蹤（下）。

 

 

結(jié)論

綜上所述， LS18光片顯微鏡對(duì)厘米級(jí)的透明化樣本組織可進(jìn)行不同分辨率級(jí)別快速成像，快速滿足科研工作者的成像需求。LS18不僅能夠兼容所有的組織透明化方法，還具有半自動(dòng)校準(zhǔn)功能，實(shí)現(xiàn)多通道成像，保證成像結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、易用，它將為科研工作者們帶來更多的驚喜，敬請(qǐng)期待！
 
宗旨：
锘海生命科學(xué)為科研工作者提供生物組織透明化、免疫染色、平鋪光片顯微鏡3D熒光成像、數(shù)據(jù)分析一站式服務(wù)，旨在通過精準(zhǔn)、快速、多樣化的科研服務(wù)為每一位生命科學(xué)工作者提供個(gè)體化/定制化的解決方案。