色譜分析樣品過濾時,濾膜是否會釋放浸出物?
瀏覽次數(shù):3370 發(fā)布日期:2021-5-18
來源:賽多利斯
針頭濾器和濾膜是分析實驗室的常用耗品,相信實驗汪寶寶們都不陌生。在液相色譜檢測之前,一般需要對樣品和流動相進行預處理,除去顆粒雜質(zhì)以保護色譜柱和儀器設備。樣品過濾通常用針頭濾器;流動相的預處理則通常用真空抽濾(全玻璃夾具+過濾膜片)的方法,可以從相應的溶劑中去除顆粒雜質(zhì),如沉淀物或灰塵,同時也可對流動相進行脫氣。
色譜分析實驗有時候會很傷腦筋,因為濾膜與流動相接觸時,有可能會產(chǎn)生浸出物,對色譜分析產(chǎn)生干擾。比如,賽多利斯的科學家們最近做的一個研究,實驗結(jié)果表明,
再生纖維素RC膜不會釋放浸出物,而聚酰胺PA (尼龍) 膜可能會釋放少量的有機物。
在此項研究中,評估了再生纖維素RC膜和聚酰胺PA膜(尼龍)這兩種常用濾膜在對液相色譜分析中常用溶劑/洗脫液進行過濾時,釋放浸出物的可能性。使用經(jīng)RC膜過濾的純水和磷酸鹽緩沖液作為洗脫液進行HPLC-UV/VIS和LC-HRMS分析時,譜圖中沒有出現(xiàn)雜峰。而在對經(jīng)PA 膜過濾的洗脫液分析時,早期能檢測到小的洗脫峰,這可能是聚酰胺低聚物導致的。即聚酰胺濾膜可能會釋放少量的有機物,在其應用時應考慮這一點。
同理,在樣品過濾過程中,針頭濾器在與樣品接觸時也可能會有這樣的風險。因此可見,再生纖維素RC膜是樣品/流動相過濾的首選,因為它的有機化合物釋放量極低,不會對分析結(jié)果造成干擾。
RC膜材質(zhì)純凈,并且化學兼容性廣泛。不僅非常適合有機溶劑/混合溶劑的過濾,如DMSO 和酮類/酯類/醚類等常用有機溶劑均可過濾,同時也能過濾水溶液,是真正的萬能濾膜。
具體實驗情況如何,讓我們一探究竟吧:
實驗濾膜:0.2μm孔徑的再生纖維素RC膜和聚酰胺(尼龍)PA膜
實驗溶劑:純水、NaH2PO4緩沖液、純乙腈三種溶劑,模擬要過濾的洗脫液
實驗方法:HPLC-UV/VIS紫外可見分光光度法、TOC、高分辨率質(zhì)譜(HRMS)
實驗1
使用HPLC-UV/VIS來考察在常規(guī)分析中不同濾膜對于洗脫液過濾的影響
實驗結(jié)果表明,總體來看,浸出物的含量非常低。聚酰胺PA膜過濾的洗脫液,早期能檢測到洗脫峰。RC濾膜的譜圖與對照品并無差異。
實驗2
分析純水經(jīng)再生纖維素RC膜或聚酰胺PA膜過濾后的TOC
實驗結(jié)果表明,對照品及兩種洗脫液提取物的TOC值均在≤200ppb(ng/mL)范圍內(nèi),說明其有機污染物含量水平非常低。不過通過PA膜過濾后的濾液的TOC值稍高,說明這些樣品中有機物的含量稍高。
實驗3
采用高分辨質(zhì)譜法HRMS測定兩種膜對乙腈的影響
過濾后乙腈的質(zhì)譜如下圖所示:
實驗結(jié)果表明,洗脫液和對照品的所有質(zhì)譜圖只有微小的差別。但在ESI正電離模式下所得的乙腈濾液質(zhì)譜圖顯示了一些PA膜的小信號,這些信號可能歸屬為聚酰胺低聚物。這個結(jié)果與該過濾膜材料的TOC和HPLC-UV/VIS結(jié)果一致。
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再生纖維素RC膜針頭濾器有4mm、15mm、25mm三種直徑,0.2um、0.45um兩種孔徑,規(guī)格多樣。