組織研磨-QuEChERS-HPLC-MS法測定動物源食品中磺胺類藥物殘留

​食品工業(yè)科技2020年第10期分析檢測部分，發(fā)表了蘭州市食品藥品檢驗所張虹艷、邱國玉等老師的研究文章，此項研究使用SPEX高通量組織研磨儀建立了新的磺胺類藥物殘留的分析檢測方法。

建立起組織研磨－QuEChERS－高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法測定動物源食品中磺胺類藥物殘留的分析檢測方法。樣品用 EDTA 緩沖液溶解后，通過組織研磨儀高速處理樣品，以乙腈提取目標化合物，經(jīng) Bond QuEChERS 提取、QuEChERS EMR－Lipid 凈化，使用三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀進行分析。C18色譜柱分離，0.1% 甲酸－乙腈梯度洗脫，外標法定量。結(jié)果表明，10 種磺胺在一定濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，決定系數(shù)( R2) 均大于 0.99，目標化合物檢出限( S/N = 3) 為0.2 μg / kg，定量限( S /N = 10) 為 0.5 μg / kg。方法平均回收率為 89.4% ～111.0% ，相對標準偏差( n = 6) 為 0.8% ～4.9% ，該方法操作簡單，回收率高，適用于動物源食品中磺胺類藥物殘留的測定。低質(zhì)量濃度的磺胺類藥物在豬肉、牛奶、雞蛋中均存在明顯基質(zhì)效應，采用基質(zhì)匹配標準曲線校正法可以對基質(zhì)效應產(chǎn)生的影響進行補償與消除。

此實驗以豬肉、牛奶、雞蛋為研究對象，采用組織研磨儀－QuEChERS－三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀，對動物源性食品中磺胺類獸藥殘留進行研究。組織研磨儀采用上下垂直高速振蕩模式。本文作者還討論研究了不同條件下，組織研磨儀對磺胺類藥物提取效果的影響，并探索豬肉、雞蛋、牛奶三種動物源性食品的基質(zhì)效應，為優(yōu)化獸藥殘留檢測方法、提高獸藥殘留檢測技術(shù)提供數(shù)據(jù)支持和理論依據(jù)。

研磨條件優(yōu)化

傳統(tǒng)的渦旋振蕩提取方式，動能低，樣品均勻性無法得到保證，導致實驗結(jié)果重現(xiàn)性不好。為了使得樣品研磨更加均勻、充分，樣品重復性好，保證樣品的重現(xiàn)性、有效性、可比性，組織研磨儀可設置研磨時間、研磨速率，保證每次研磨條件的一致性。分別設置不同研磨速率以及研磨時間，對比10 種磺胺類藥物的回收率，確定最優(yōu)研磨速率以及研磨時間。以豬肉為實驗對象，添加混合標準溶液100 μL( 見1.2.1) ， 10 種磺胺類藥物的添加量為50 μg /kg。

設定研磨速率為1000 r /min，研磨時間分別為0.5、1、1.5、2、3 min，其余步驟按1.2.2 進行樣品前處理，每個樣品平行測定3 次，外標法定量。結(jié)果見圖2，隨著研磨從0.5 min 逐漸升至3 min，10 種磺胺類藥物的平均回收率呈現(xiàn)逐漸增大再回落的趨勢，研磨時間為2 min 時，10 種磺胺類藥物的平均回收率最高，研磨時間為3 min 時， 10 種磺胺類藥物的平均回收率略有降低。因為動物組織隨著研磨時間增長，細胞破碎越充分，細胞內(nèi)蛋白質(zhì)等物質(zhì)大量釋放，不利于磺胺類藥物的提取。

圖2 不同研磨時間對10 種磺胺類藥物回收率的影響

設定研磨時間為2 min，研磨速率分別為500、800、1000、1200、1400、1600 r /min ( 最大速率1750 r /min) ，其余步驟按1.2.2 進行樣品前處理，每個樣品平行測定3 次，外標法定量。豬肉在不同研磨速率下均可研磨呈肉糜狀，豬肉提取液隨著研磨速率升高，組織破碎越細膩均勻，顏色越淺，結(jié)果見圖3。研磨速率從500 r /min 提高至1600 r /min 時，10 種磺胺類藥物回收率呈現(xiàn)整體緩慢增大之后保持平穩(wěn)的趨勢。研磨速率提高至1000 r /min 時， 10 種磺胺類藥物的平均回收率最高，研磨速率從1000 r /min提高至1600 r /min，回收率維持在穩(wěn)定水平，說明當研磨速率提升至1000 r /min 時，豬肉組織已研磨均勻，豬肉組織達到平衡狀態(tài)，因此選擇1000 r /min 作為最適宜研磨速，如圖3 所示。

圖3 不同研磨速率對10 種磺胺類藥物回收率的影響

感謝張虹艷等老師們對垂直高速振蕩模式組織研磨的認可，美國SPEX SamplePrep 公司1954年成立至今，一直致力于向市場提供最專業(yè)、最實用的前處理儀器，是冷凍研磨、垂直振蕩高通量動植物組織研磨、∞式三維高能球磨等前處理方式的發(fā)明者。SPEX高通量組織研磨儀采用上下垂直高速振蕩模式，可以促進細胞快速破碎、細胞裂解、組織勻漿，使得樣品研磨更加均勻、充分，樣品重復性好，樣品之間沒有交叉污染，同時節(jié)省了時間和人力成本的消耗，是一種高通量高速率高效的樣品前處理技術(shù)。欲下載文章全文，請與我們聯(lián)系。

高通量組織研磨儀

超高通量：一次可處理576個樣品或16個50mL樣品瓶

超高效率：垂直振蕩專利技術(shù)，1-2min完成困難樣品研磨、均質(zhì)

高均一性：批量處理樣品，程序化處理機制，均一性、重復性更好

更人性化：可調(diào)角度彩色觸摸顯示屏，可編輯、調(diào)用、存儲500種方法

適用性廣：程序可調(diào)，更多研磨瓶、研磨介質(zhì)可供選擇，完美契合不同樣品研磨、混勻需求

安全可靠：雙重門鎖，研磨過程更安全；設置保密程序，限制查看特定方法

低溫研磨：專業(yè)Kryo-Tech低溫組件及可調(diào)循環(huán)程序，維持研磨全過程低溫，適合溫度敏感型樣品