English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
當(dāng)前位置 > 首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 核酸脂質(zhì)納米粒解析——氮磷比計(jì)算

核酸脂質(zhì)納米粒解析——氮磷比計(jì)算

瀏覽次數(shù):1469 發(fā)布日期:2021-7-20  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
​在使用帶電荷的原料進(jìn)行納米粒子合成時(shí),正電荷與負(fù)電荷的數(shù)量比將影響到納米粒子的穩(wěn)定性、電位等性能。而在核酸脂質(zhì)納米粒中,正電荷通常為具有可電離銨根(N)的陽(yáng)離子脂質(zhì),而負(fù)電荷則為帶有大量磷酸根(P)的核酸分子,兩者可通過(guò)靜電吸附的方式結(jié)合在一起。因此,不合理的比例可能會(huì)導(dǎo)致粒徑過(guò)大、穩(wěn)定性差等缺陷,正確計(jì)算正電荷與負(fù)電荷的比——N/P比——就顯得尤為重要。
 
作為計(jì)算舉例,我們挑選一個(gè)常見(jiàn)的配方,計(jì)算的關(guān)鍵數(shù)值如下:
  •  陽(yáng)離子脂質(zhì)濃度(即N的濃度):6.25 mmol/L

  • 有機(jī)相體積(含陽(yáng)離子脂質(zhì)):1 mL

  • 核酸濃度:0.17 mg/mL

  • 水相體積(含核酸):3 mL

  •  堿基的平均分子量:330 g/mol

其中堿基的平均摩爾濃度為經(jīng)驗(yàn)的平均值,如果使用的核酸序列已知,則能夠計(jì)算得到精確的摩爾濃度。
 

在以上條件下,N的物質(zhì)的量為:

而P的物質(zhì)的量為:


因此N/P比為:


以上即為N/P比的計(jì)算過(guò)程,不過(guò)在實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中,也可以先定下N/P比,再確定有機(jī)相或水相的濃度,此時(shí)只需要逆向計(jì)算即可。例如我們將N/P比改為6:1,在其他濃度不變的情況下,核酸的濃度就需要降到原有的2/3,即0.113 mg/mL。

細(xì)心的讀者可能也發(fā)現(xiàn)了,在計(jì)算的過(guò)程中并沒(méi)有明確的核酸長(zhǎng)度,這是因?yàn)楹怂岬拈L(zhǎng)度并不會(huì)影響使用到的質(zhì)量濃度。以單鏈RNA和上方計(jì)算得到的數(shù)值為例,在保持N/P比和N的物質(zhì)的量不變的情況下,所需的P的物質(zhì)的量也固定為1.545×10
-6mol,而核酸的質(zhì)量濃度與P的物質(zhì)的量關(guān)系為:



n核酸為核酸的物質(zhì)的量(摩爾數(shù)),M核酸為核酸的摩爾質(zhì)量對(duì)于1000 nt的mRNA,一個(gè)mRNA分子就有1000個(gè)陰離子;而對(duì)于2000 nt的mRNA來(lái)說(shuō),一個(gè)mRNA分子則有2000個(gè)陰離子,所需的物質(zhì)的量(摩爾數(shù))只需1000 nt的一半,但相對(duì)應(yīng)的,其核酸的摩爾質(zhì)量則會(huì)提升一倍(不考慮不同堿基的重量差異)。所以?xún)烧呦喑耍罱K的數(shù)值并沒(méi)有變化。因此,在使用mRNA的時(shí)候,換算成質(zhì)量濃度對(duì)于計(jì)算更為方便。

納米藥物制備系統(tǒng)


應(yīng)用范圍:


點(diǎn)擊以下鏈接,查看往期回顧
核酸脂質(zhì)納米粒(LNP)科普 —— 組成成分及作用

大小、結(jié)構(gòu)不同的mRNA-LNP,細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達(dá)會(huì)不同嗎?—— 粒徑大小篇
mRNA體內(nèi)遞送載體有哪些?

NanoAssemblr制備的LNP實(shí)現(xiàn)對(duì)CRISPR-Cas9的高效遞送

重塑T細(xì)胞基因遞送—GenVoy-ILM T細(xì)胞試劑盒

 

來(lái)源:锘海生物科學(xué)儀器(上海)有限公司
聯(lián)系電話(huà):86-21-37827858 或 13818273779
E-mail:info@nuohailifescience.com

用戶(hù)名: 密碼: 匿名 快速注冊(cè) 忘記密碼
評(píng)論只代表網(wǎng)友觀點(diǎn),不代表本站觀點(diǎn)。 請(qǐng)輸入驗(yàn)證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2024 生物器材網(wǎng) 電話(huà):021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com