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核酸脂質(zhì)納米粒科普——超濾管規(guī)格
瀏覽次數(shù):1080 發(fā)布日期:2021-10-22 來源:本站
僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
在上一期的
核酸脂質(zhì)納米粒
主題文章中,我們列舉了后處理的步驟及細節(jié),其中一項關鍵內(nèi)容——超濾除溶劑——使用的就是市面上較為常見的超濾管。但看似相同的超濾管實際上有多種規(guī)格,通常以相對分子質(zhì)量(Dal或kD)來標示,如10 kD、50 kD、100 kD等。數(shù)字越大,代表了濾膜的孔徑越大,截留下來的物質(zhì)分子量也相應更大。
在我們銷售微流控儀器時,就經(jīng)常會接到客戶的提問:究竟多少規(guī)格的超濾管適合自己制作的核酸脂質(zhì)納米粒呢?同時,我們也發(fā)現(xiàn),盡管有些客戶包裹的是相似長度的核酸,使用的超濾管規(guī)格卻完全不同。因此在這篇文章中,我們將通過計算來確定使用的超濾管規(guī)格。
一般而言,為了保證我們需要的物質(zhì)能夠幾乎完全被截留,選用的規(guī)格大小在目標物質(zhì)的分子量的1/3甚至1/4較為合適(這是在蛋白組學、生物化學等領域的一個經(jīng)驗值,也可根據(jù)實際產(chǎn)物進行調(diào)整)。規(guī)格過大會導致大部分目標產(chǎn)物流失;規(guī)格過小則會導致超濾時間急劇增大,這對于在有機溶劑中不穩(wěn)定的核酸脂質(zhì)納米粒而言是非常致命的。
確定了規(guī)格大小和目標物質(zhì)分子量之間的比例后,下一步需要確定目標物質(zhì)的相對分子質(zhì)量。在這里,首先需要明確相對分子質(zhì)量(
M
r
)單位Dal與物質(zhì)的摩爾質(zhì)量(
M
)單位g/mol之間的關系。相對分子質(zhì)量是該分子的質(zhì)量與“一個
1
2
C原子質(zhì)量的1/12”的比值;摩爾質(zhì)量則是單位物質(zhì)的量的物質(zhì)所具有的質(zhì)量——看似非常繞,但實際上兩者的數(shù)值是相等的。例如膽固醇的摩爾質(zhì)量為386.65 g/mol,而
一個
膽固醇分子的相對分子質(zhì)量也為386.65 Dal,唯一的不同就是摩爾質(zhì)量是一個宏觀整體的概念,而相對分子質(zhì)量則需要確定對象的具體情況,對于核酸而言就是要確認組成核酸的堿基數(shù)量。在
氮磷比計算
一文中,我們提到堿基的平均摩爾質(zhì)量為330 g/mol,所以一個堿基的相對分子質(zhì)量為330 Dal。
假設我們的mRNA具有n個堿基,則其相對分子質(zhì)量為330n Dal,如果我們希望這個值為超濾管規(guī)格的3倍,則意味著超濾管的規(guī)格不得大于110n Dal,由此我們就可以得到下方一個簡單的表格。
由此我們可以看到,其關系非常直接明了。在實際使用過程中,超濾管通常不會超過100 kD,因此,只要我們的核酸堿基超過909個,便可以使用100 kD的超濾管。當然,為了保險起見,也可以使用50 kD超濾管。需要注意的是,以上均以mRNA為例。如果為短鏈siRNA,通常在一個納米粒中會有多個的siRNA鏈,因而在計算的時候要乘以相對應的數(shù)量。
隨著納米技術的不斷發(fā)展,納米藥物在醫(yī)藥領域的應用越來越廣泛,尤其在疫苗的研發(fā)、基因治療,腫瘤靶向等方面顯現(xiàn)了不可替代的優(yōu)勢。
锘海生物為科研工作者和企業(yè)提供全面的納米藥物制備、生產(chǎn)及檢測服務,囊括了納米藥物研發(fā)過程中,從處方篩選到制劑表征的全線過程。為客戶簡化流程,節(jié)約時間成本,同時提供高質(zhì)量的數(shù)據(jù)分析與技術支持服務。
納米藥物制備系統(tǒng)
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