帕金森病大小型動(dòng)物模型的簡(jiǎn)單制備方法

概述

為模擬人類PD，理想的動(dòng)物模型應(yīng)具備以下一些特點(diǎn)：

(1)多巴胺能神經(jīng)元在出生時(shí)數(shù)量及形態(tài)正常，青年時(shí)期開始逐漸選擇性地減少，減少量超過50％，且容易通過神經(jīng)化學(xué)和神經(jīng)生理學(xué)的方法檢測(cè)到；

(2)模型應(yīng)能容易檢測(cè)其運(yùn)動(dòng)功能的損傷，包括運(yùn)動(dòng)遲緩、肌僵直和靜止性震顫等PD的主要癥狀；

(3)模型應(yīng)能顯示出路易小體的形成；

(4)如果模型是遺傳性的，應(yīng)基于單一突變而使突變模型有著強(qiáng)大的傳播能力；

(5)模型應(yīng)有相對(duì)較短的疾病周期(如數(shù)月)，以使藥物篩選得以經(jīng)濟(jì)、快速地進(jìn)行。

模型制備

一，靈長類PD模型

恒河猴在戊巴比妥(40mg／kg)腹腔麻醉下，切開頸部皮膚，經(jīng)鈍性分離暴露一側(cè)頸總動(dòng)脈。對(duì)動(dòng)物行頸總動(dòng)脈注射，即將新鮮配制的MPTP(Sigma)按1.0～1.5mg／kg體重溶于2mL生理鹽水中，逆血流方向緩慢注入血管中。若動(dòng)物在第1次手術(shù)后PD癥狀不明顯，故分別在每隔5d后又給予第2～4次注射，直至PD癥狀出現(xiàn)。用MPTP建立的靈長類雙側(cè)及偏側(cè)PD模型，在癥狀、體證、病理、生化、對(duì)藥物治療的反應(yīng)方面與人類PD的特征極為相似，被認(rèn)為是最具代表性的PD動(dòng)物模型。

二，MPTP用于帕金森病小鼠模型制作

小鼠對(duì)MPTP的敏感性存在種系和年齡的差異。一般選10~12周齡，體重25~30g成年C57BL褐鼠，按體重30~40 mg／kg腹腔注射MPTP，連續(xù)7d。于第6~7次注射后出現(xiàn)暫時(shí)性(2~3h)軀干震額、豎毛、尾巴過伸、動(dòng)作減少及爬桿試驗(yàn)障礙。

帕金森病小鼠模型行為學(xué)改變的定量觀察

1）爬桿試驗(yàn)

2）懸掛實(shí)驗(yàn)

3）游泳實(shí)驗(yàn)

以上幾種定量觀察法為帕金森病小鼠模型行為學(xué)的研究提供了一些較為準(zhǔn)確和客觀的方法，同時(shí)也提高了整個(gè)實(shí)驗(yàn)的客觀性。

康森特生物科技（長沙）有限公司總代理的德國Simi精細(xì)行為記錄分析系統(tǒng)是為捕捉及分析動(dòng)物精細(xì)行為而設(shè)計(jì)。該系統(tǒng)可為您獲取精確量化的運(yùn)動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)；可為您客觀評(píng)估疾病治療效果，輔助優(yōu)化治療方案；可運(yùn)用到神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域相關(guān)實(shí)驗(yàn)中，如帕金森、阿爾茲海默癥、亨廷頓等神經(jīng)退行性疾病研究，脊髓損傷等中樞神經(jīng)損傷研究。動(dòng)物精細(xì)行為捕捉對(duì)于研究基因突變、藥物作用和環(huán)境刺激等導(dǎo)致的行為和生理病變具有十分重要的作用。實(shí)時(shí)視頻追蹤記錄分析系統(tǒng)能夠?qū)χT如每個(gè)關(guān)節(jié)的平移、旋轉(zhuǎn)，每個(gè)抓指的抓取動(dòng)作精細(xì)分析；對(duì)細(xì)胞的分裂分化及位移進(jìn)行跟蹤監(jiān)測(cè)；對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行精確記錄和評(píng)估，提供持續(xù)不斷的進(jìn)程監(jiān)控。該系統(tǒng)集成多種運(yùn)動(dòng)分析方法，獲取優(yōu)于傳統(tǒng)方法的分析結(jié)果，實(shí)現(xiàn)對(duì)患有中樞神經(jīng)系統(tǒng)障礙動(dòng)物模型運(yùn)動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)的全面評(píng)估。

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