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淺談中藥行業(yè)LC及應(yīng)用常見問題解答
瀏覽次數(shù):1194 發(fā)布日期:2022-5-14 來源:本站
僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
做中藥分析,因?yàn)橹兴幤贩N太多,樣品也比較臟,液相遇到最多的問題就是壓力過高,首先要確認(rèn)是哪個(gè)部件造成的,可以用兩通替換掉色譜柱,用純水1ml流速看一下系統(tǒng)壓力,一般LC-20AT/AD的壓力在1MPa以下就是正常的。既然液相系統(tǒng)沒有堵塞,那么就是緩沖鹽或者某些雜質(zhì)把色譜柱堵了,這時(shí)就需要用10%甲醇水長(zhǎng)時(shí)間沖洗,可以嘗試用0.2ml/min流速?zèng)_一晚,記得不要接檢測(cè)器,防止雜質(zhì)堵塞流通池,可以在色譜柱出口接一個(gè)燒杯,一般情況下不建議反沖。
一些品種實(shí)驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng)
這里選取一些有代表性的品種,分別是:制川烏、枳實(shí),薏苡仁。
首先說一說制川烏,它代表了流動(dòng)相中含四氫呋喃的品種,四氫呋喃的極性較弱,洗脫能力較強(qiáng),而且四氫呋喃溶解性較強(qiáng),會(huì)對(duì)色譜柱填料造成不可逆的損傷。
實(shí)驗(yàn)時(shí)要注意色譜柱平衡時(shí)間需要更長(zhǎng)(1小時(shí)以上),梯度時(shí)間程序回到初始比例后的時(shí)間也要設(shè)定長(zhǎng)一些,做完實(shí)驗(yàn)后沖洗時(shí)間要更長(zhǎng),不然容易發(fā)生堵塞情況。建議“專柱專用",用過四氫呋喃的色譜柱不要再做其它實(shí)驗(yàn)。
然后聊一聊枳實(shí),它代表了流動(dòng)相中含離子對(duì)試劑(十二烷基磺酸鈉,辛烷磺酸鈉等)的品種。離子對(duì)試劑是由強(qiáng)親水離子形成,反作用于樣品分子的中性離子對(duì)。因此,可用于同時(shí)分離帶電分子和非帶電分子。
實(shí)驗(yàn)時(shí)要注意離子對(duì)試劑盡量和有機(jī)相混在一起配制,平衡時(shí)間需要更長(zhǎng)。枳實(shí)的對(duì)照品和樣品溶液的溶劑都是水,所以要做到臨用新制。不然可能會(huì)發(fā)生溶劑效應(yīng)或者保留時(shí)間不一致的現(xiàn)象。
最后講一講薏苡仁,薏苡仁用到的是蒸發(fā)光檢測(cè)器,使用的是乙腈和二氯甲烷流動(dòng)相。二氯甲烷與水不能互溶,所有二氯甲烷所接觸的容器都要保證干燥。
實(shí)驗(yàn)時(shí)要注意實(shí)驗(yàn)全程不能接觸水,包括流動(dòng)相瓶、液相管路(除了洗針液),色譜柱。此品種建議配制混合流動(dòng)相,分析時(shí)先用純乙腈沖洗系統(tǒng)1小時(shí),然后換成流動(dòng)相平衡30分鐘直至基線穩(wěn)定再進(jìn)樣,使用250mm色譜柱時(shí)建議在藥典允許范圍內(nèi)調(diào)整流動(dòng)相比例至乙腈-二氯甲烷(65:35),如果有水,可能會(huì)發(fā)生不出峰的情況。建議分配一根色譜柱給此品種專用,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用純乙腈沖洗系統(tǒng)1小時(shí)后再取下。
譜質(zhì)分析檢測(cè)技術(shù)(上海)有限公司 - 主營(yíng)產(chǎn)品: 二手ICP-MS,二手島津QP-2010氣質(zhì)聯(lián)用儀,二手石墨
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