高通量流式細(xì)胞術(shù)在病毒學(xué)研究中的獨(dú)特作用

今天是小編居家的第66天，今天不聊疫情，聊聊病毒。本次疫情爆發(fā)的原點(diǎn)是奧密克戎突變株BA2，相比早期的病毒，本次突變體具有隱匿性高，傳染性強(qiáng)等特點(diǎn)。新病原體及其突變株的出現(xiàn)對(duì)抗擊傳染性疾病的新疫苗和新療法研發(fā)提出更嚴(yán)峻的考驗(yàn)。疫情就是命令，時(shí)間就是生命。高通量流式細(xì)胞分析技術(shù)可高效助力藥物和疫苗研發(fā)人員，加速病毒生物學(xué)和宿主免疫反應(yīng)表征等研究的工作流程。

接下來(lái)，小編帶您回顧兩個(gè)典型研究案例，一起了解iQue®高通量流式細(xì)胞儀在病毒學(xué)研究中發(fā)揮的獨(dú)特作用吧！ COVID-19席卷全球伊始在世界各地傳播速度非常之快，這也使得有效的SARS COV-2疫苗和治療劑成為全球健康的迫切需要。作為一種新出現(xiàn)的病原體，必須對(duì)該病毒的各方面都進(jìn)行研究，包括了解其體液免疫應(yīng)答以及快速出現(xiàn)的傳染性增強(qiáng)的變種。

來(lái)自哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Mercado等人^[1]使用iQue®對(duì)中和抗體滴度進(jìn)行定量，并對(duì)編碼全長(zhǎng)穩(wěn)定SARS-CoV-2棘突蛋白復(fù)制能力不強(qiáng)的重組腺病毒載體的免疫細(xì)胞功能進(jìn)行深入的研究。研究人員開發(fā)出了一系列可編碼SARS-CoV-2棘突蛋白不同變體的載體，并對(duì)它們的免疫原性和保護(hù)效果做了評(píng)估。也對(duì)抗體依賴性中性粒細(xì)胞吞噬作用（ADNP）、細(xì)胞吞噬作用（ADCP）、補(bǔ)體沉積（ADCD）以及自然殺傷激活（ADNKA）分析等效應(yīng)子功能進(jìn)行了研究。2021年2月，強(qiáng)生公司獲得美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）對(duì)Ad26.COV2.S疫苗的緊急使用授權(quán)。 (A) 本文展示了一種基于iQue®高通量流式細(xì)胞儀的快速定量ADCP分析設(shè)計(jì)及工作流，用以研究抗體開發(fā)領(lǐng)域的作用機(jī)制�？梢詼y(cè)試候選抗體結(jié)合經(jīng)過精心改造以顯示病原體抗原的靶細(xì)胞的能力。然后，該分析以高通量和多參數(shù)的方式為單核細(xì)胞的吞噬作用提供熒光讀數(shù)，并報(bào)告細(xì)胞活性，并且可以對(duì)其他感興趣的分泌蛋白（如細(xì)胞因子或效應(yīng)蛋白）進(jìn)行多重讀數(shù)。(B) iQue®的簡(jiǎn)化工作流程只需最少的清洗步驟，即可實(shí)現(xiàn)快速分析設(shè)置、采集和集成數(shù)據(jù)分析。

在開發(fā)疫苗的同時(shí)，研究人員基于COVID-19患者的不同臨床軌跡，探索了構(gòu)成這些軌跡的免疫機(jī)制和血清學(xué)特征。來(lái)自哈佛大學(xué)的Atyeo等人^[2]使用iQue®高通量流式細(xì)胞分析平臺(tái)評(píng)估患者血漿樣本中的抗原特異性抗體亞類、同型、唾液酸、半乳糖及Fcγ受體結(jié)合水平。還使用該平臺(tái)對(duì)血漿樣本進(jìn)行功能分析，以便對(duì)ADCP、ADNP、ADCD和ADNKA定量。作者在結(jié)果不同的個(gè)體中觀察到了不同的抗體特征�？梢钥闯�，龐大的數(shù)據(jù)量的背后，必須有一套完整的數(shù)據(jù)采集、篩選及分析工具輔助科學(xué)家很好地完成工作。iQue Forecyt®軟件可以在數(shù)分鐘內(nèi)快速?gòu)牟杉�轉(zhuǎn)變到分析，平臺(tái)與之相結(jié)合之后，無(wú)需進(jìn)行數(shù)據(jù)外推和導(dǎo)出，即可輕松將數(shù)據(jù)可視化并快速進(jìn)行解釋，對(duì)于復(fù)雜的生物分析也是如此。
Summary

以上研究證明，使用多功能iQue®可以提高通量，簡(jiǎn)化數(shù)據(jù)分析，應(yīng)用于各種多重檢測(cè)分析中，包括抗體同型、中和及功能研究，以及數(shù)據(jù)分析與作圖。

iQue®高通量流式細(xì)胞術(shù)平臺(tái)旨在不降低先進(jìn)分析能力的前提下簡(jiǎn)化蛋白分析、免疫表型、功能評(píng)估和分析，包括抗體篩選及免疫細(xì)胞激活�？梢栽趩蝹�(gè)多重分析中，使用每孔低至1-2 μL的樣品同時(shí)測(cè)定表型變化、增殖率及分泌因子等細(xì)胞特異性參數(shù)，從而獲得更加深入的生物學(xué)結(jié)果。

iQue®采用獲得專利的采樣方法，可達(dá)到業(yè)內(nèi)最快的樣本采集速度。該平臺(tái)還可以快速處理多個(gè)檢測(cè)培養(yǎng)板的數(shù)據(jù)，兼容96、384或1536孔板配置，并可連接任何自動(dòng)化系統(tǒng)，連續(xù)加載孔板。

鑒于這種獨(dú)特的取樣方法只使用幾微升的樣品，所以，研究人員可以保存檢測(cè)試劑和寶貴的患者來(lái)源樣品，同時(shí)保留材料，以供進(jìn)一步的下游表征研究使用。

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了解iQue®高通量流式細(xì)胞儀如何加速并促進(jìn)傳染病和腫瘤免疫學(xué)的研究，下載中文版應(yīng)用合輯《高通量流式細(xì)胞術(shù)在傳染病和腫瘤免疫學(xué)中的應(yīng)用》
-參考文獻(xiàn)-

1.Mercado NB, Zahn R, Wegmann F, et al. Single-shot Ad26 vaccine protects against SARS-CoV2 in rhesus monkeys. Nature. 2020;586(7830):583-588. doi: 10.1038/s41586- 020-2607-z.

2.Atyeo C, Fischinger S, Zohar T, et al. Distinct early serological signatures track with SARS-CoV-2 survival. Immunity. 2020; 53(3):524-532.e4. doi: 10.1016/j. immuni.2020.07.020.