Elisa試劑盒實驗的技巧及注意事項

在操作elisa試劑盒實驗前，不少老師會找尋很多的相關實驗資料，網(wǎng)上的資料一大堆，然而真正所能夠需要用到的技巧和注意也就那幾條，熟練的了解并掌握之后再應用到實驗中就會簡單的多。

一、加樣的經(jīng)驗總結
加樣或加試劑時，請注意在吸取標本/標準品，酶結合物或底物時，個孔與一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 “預孵育”時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間控制 在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。 

二、孵育的三條必知
1.為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標 板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；
2.洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài)；
3.同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

三、ELISA洗滌小技巧
洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直 接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響*后的酶標儀讀數(shù)。 

四、反應時間的控制
加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化（比如，每隔 10分鐘），如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。 

五、操作說明 
1.封板膜只做一次性使用。 
2.標本中待測物質含量過高時先將樣本稀釋一定倍數(shù)后再測定，計算時請乘以稀釋倍數(shù)。
3.各步加樣均使用加樣器，并經(jīng)常校對其正確性，一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)（標本數(shù)目多的時候，上海研域推薦使用排槍加樣）。
4.液體標本置4℃保存應小于1周，-20℃或-80℃均應密封保存，-20℃不應超過1個月，-80℃不應超過2個月；標本溶血會影響檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。