測(cè)定新增產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌常見的三類設(shè)備及方法

2023年3月17日經(jīng)國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局（國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)）批準(zhǔn)發(fā)布GB/T 5750-2023《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》系列標(biāo)準(zhǔn)，代替實(shí)施16年之久的GB/T 5750-2006 《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》。新標(biāo)準(zhǔn)將于2023年10月1日起正式實(shí)施。 GB/T 5750-2023標(biāo)準(zhǔn)歷時(shí)5年，經(jīng)過了3輪意見征求，有280+單位參與研制與驗(yàn)證，有超過500名行業(yè)專家參與的GB/T 5750修訂工作，最終大功告成。

本次修訂微生物指標(biāo)主要內(nèi)容：新增腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌兩個(gè)檢測(cè)指標(biāo)、3種檢測(cè)方法和增加菌落總數(shù)酶底物法新方法。其中產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌是厭氧菌，標(biāo)準(zhǔn)中要求使用厭氧培養(yǎng)裝置在36℃下培養(yǎng)，如何選擇合適的厭氧培養(yǎng)裝置達(dá)到最好的培養(yǎng)效果就顯得尤為重要。

目前市場(chǎng)上常見的有三類設(shè)備或手段：

一、厭氧培養(yǎng)箱（厭氧工作站）

厭氧培養(yǎng)箱（工作站）是偏重于厭氧環(huán)境下的操作。在厭氧環(huán)境下氧氣濃度＜1%，不能做到氧濃度為0%；并且厭氧培養(yǎng)箱（工作站）只能做厭氧環(huán)境培養(yǎng)，不能在一個(gè)箱體內(nèi)同時(shí)實(shí)現(xiàn)不同的氣體環(huán)境；厭氧培養(yǎng)箱的控溫效果不如普通培養(yǎng)箱，同時(shí)由于厭氧培養(yǎng)箱（工作站）普遍體積較大，使用中耗氣量特別大，操作和維護(hù)也比較繁瑣，不適合小批量的實(shí)驗(yàn)需求。

二、產(chǎn)氣袋

在沒有購置儀器時(shí)的替代方案，使用產(chǎn)氣袋進(jìn)行厭氧菌、微需氧菌培養(yǎng)，優(yōu)點(diǎn)是體積小，使用方便靈活，臨時(shí)性、應(yīng)急性較好。產(chǎn)氣袋不足之處是，要達(dá)到厭氧環(huán)境所需時(shí)間較長，大概在40-60分鐘左右，存在時(shí)間過長、培養(yǎng)效果差、陽性率低的普遍現(xiàn)象，沒有質(zhì)量保障體系，不能保證百分之百的厭氧環(huán)境，這也是誤檢和漏檢的重要原因之一。

另外，產(chǎn)氣袋會(huì)產(chǎn)生大量實(shí)驗(yàn)室垃圾，且單次使用成本較高，更適合應(yīng)急或外出采集標(biāo)本時(shí)使用。

三、智能厭氧微需氧培養(yǎng)系統(tǒng)（厭氧罐法）

此類設(shè)備偏重于厭氧環(huán)境下的培養(yǎng)。工作原理是通過真空抽排置換使培養(yǎng)罐內(nèi)快速達(dá)到所需要的氣體培養(yǎng)環(huán)境，此方法具有良好的操控性與重復(fù)性�？稍趲追昼妰�(nèi)使培養(yǎng)罐內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境、微需氧環(huán)境，也可以根據(jù)需求任意調(diào)節(jié)培養(yǎng)罐內(nèi)的氧氣濃度；更加簡單化、智能化。主要有幾個(gè)特點(diǎn)：

(1)靈活性強(qiáng)：可連接不同容量的培養(yǎng)罐、每個(gè)培養(yǎng)罐可提供不同的培養(yǎng)環(huán)境。并可根據(jù)標(biāo)本量的多少相應(yīng)增加或減少罐體，不會(huì)出現(xiàn)超負(fù)荷和利用率低的情況。

(2)制備氣體環(huán)境速度快：短時(shí)間內(nèi)達(dá)到所需的氣體環(huán)境，厭氧環(huán)境3分鐘，微需氧環(huán)境僅需1分鐘。

(3)使用成本低：耗氣量特別少，后期使用成本非常低，也避免經(jīng)常更換培養(yǎng)氣體導(dǎo)致的麻煩。

(4)有質(zhì)量保障體系：設(shè)備主機(jī)在將培養(yǎng)罐內(nèi)氣體環(huán)境制備成所需的氣體環(huán)境過程中，主機(jī)會(huì)對(duì)培養(yǎng)罐做全方位的密封檢測(cè)，保證培養(yǎng)罐的密封培養(yǎng)效果；培養(yǎng)罐與主機(jī)脫開后，仍可全程監(jiān)控培養(yǎng)罐內(nèi)的氧氣濃度，如有漏氣報(bào)警提示。

三個(gè)培養(yǎng)方法對(duì)比表：

四、HD-AN系列智能厭氧微需氧培養(yǎng)系統(tǒng)

華端生物研發(fā)生產(chǎn)的HD-AN系列智能厭氧微需氧培養(yǎng)系統(tǒng)適用于厭氧氣體環(huán)境下的培養(yǎng)，該系統(tǒng)根據(jù)真空置換抽排方法，把罐內(nèi)氣體更換為氣瓶內(nèi)的氣體，從而創(chuàng)造您所希望的培養(yǎng)條件。HD-AN系列智能厭氧微需氧培養(yǎng)系統(tǒng)可以做厭氧氣體環(huán)境的培養(yǎng)、微需氧氣體環(huán)境的培養(yǎng)，還具有自定義設(shè)定氧氣濃度的氣體環(huán)境培養(yǎng)。食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)中微生物的生長環(huán)境不同，要求的氣體環(huán)境不同；微需氧菌的生長環(huán)境一般在氧濃度4%-6%的條件下生長較好，比如幽門螺旋桿菌在4%的氧濃度條件下長得最好、空腸彎曲桿菌在5%的氧濃度條件下長得最好、嗜血桿菌適合在12%的氧濃度環(huán)境中生長。華端生物的厭氧、微需氧培養(yǎng)系統(tǒng)的氧氣濃度調(diào)節(jié)功能最寬泛，調(diào)節(jié)范圍0.1%-18%，調(diào)節(jié)精度最高，氧濃度調(diào)節(jié)步進(jìn)最高為0.1%。這就滿足了不同厭氧微生物的生長氣體環(huán)境。

(1)檢測(cè)培養(yǎng)罐與主機(jī)的連接是否完好。這樣可以保證主機(jī)系統(tǒng)各個(gè)元器件工作正常；連接的培養(yǎng)罐也正常。
(2)檢測(cè)輸入氣體壓力是否符合要求。這樣可以保證培養(yǎng)罐在達(dá)到氣體環(huán)境時(shí)，罐內(nèi)既不會(huì)帶正壓、也不會(huì)帶負(fù)壓。
(3)檢測(cè)罐體在低氣壓狀態(tài)下是否有泄漏。這樣可以保證罐體沒有任何泄漏。
(4)檢測(cè)罐蓋在近大氣壓狀態(tài)下是否有泄漏。這樣可以保證罐蓋絕對(duì)密封。
(5)檢測(cè)催化劑（鈀顆粒）活性是否符合要求。在執(zhí)行厭氧程序時(shí)，主機(jī)系統(tǒng)要對(duì)催化劑活性進(jìn)行檢測(cè)，有活性的催化劑才能把培養(yǎng)罐中剩余的0.16%氧氣完全消耗掉。從而達(dá)到100%的厭氧環(huán)境。

使用培養(yǎng)罐進(jìn)行培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)
(1)每一個(gè)培養(yǎng)罐可以有獨(dú)立的氣體環(huán)境，不同的培養(yǎng)罐可以有不同的氣體環(huán)境。
(2)每一個(gè)培養(yǎng)罐是獨(dú)立的空間，不同性質(zhì)的樣本可以放在不同的罐體內(nèi)，避免交叉污染。
(3)不同規(guī)格的培養(yǎng)罐，可以放置不同數(shù)量的培養(yǎng)樣本，還可以放置不同規(guī)格的培養(yǎng)樣本；隨著培養(yǎng)樣本數(shù)量的多少，隨時(shí)增減培養(yǎng)罐的數(shù)量。
(4)培養(yǎng)罐使用的是PMMA材料，高光潔度，清晰透明，罐體與罐蓋透明便于使用者在培養(yǎng)過程中隨時(shí)觀察培養(yǎng)樣本的培養(yǎng)狀況，不必打開培養(yǎng)罐觀察培養(yǎng)效果。
(5)罐體與罐蓋抗震抗沖擊，氣密性好；罐蓋凹型槽設(shè)計(jì)與高質(zhì)量O型橡膠圈確保罐體與罐蓋緊密結(jié)合，有效避免泄漏。
(6)培養(yǎng)罐體積小，重量輕，密封性好，便于攜帶；可用于短期菌株保藏，還可做長途運(yùn)輸樣本。

使用該儀器設(shè)備后，可以有效提高微生物室的工作效率，保證食品安全風(fēng)險(xiǎn)微生物診斷的準(zhǔn)確性，避免漏檢和誤檢，所以開展厭氧菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)檢測(cè)項(xiàng)目是極為必要的。