Morris水迷宮不僅用于研究與空間學(xué)習(xí)記憶相關(guān)的腦區(qū)功能評價, 被廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開發(fā)/篩選/評價、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個學(xué)科的科學(xué)研究和計算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,在世界上已經(jīng)得到廣泛地認(rèn)可,是醫(yī)學(xué)院校開展行為學(xué)研究尤其是學(xué)習(xí)與記憶研究的首選經(jīng)典實(shí)驗。
一、水迷宮的實(shí)驗分類
1. 適應(yīng)性訓(xùn)練:
在Morris水迷宮實(shí)驗中,適應(yīng)性訓(xùn)練是實(shí)驗的第一步,通常在實(shí)驗前一天進(jìn)行。在這個階段,實(shí)驗者不會放置平臺,而是讓實(shí)驗動物(通常是小鼠)在水迷宮中自由游泳120秒。這個過程的目的是讓動物適應(yīng)新的環(huán)境,提前消除對水迷宮的陌生感。適應(yīng)性訓(xùn)練的重要性在于減少動物對實(shí)驗環(huán)境的壓力,確保它們在實(shí)驗中表現(xiàn)出更自然的行為。
2. 定位航行實(shí)驗:
定位航行實(shí)驗是Morris水迷宮實(shí)驗的核心部分。在這個實(shí)驗中,一個隱藏的平臺被放置在水迷宮的特定象限中。動物被釋放到水迷宮中,其任務(wù)是通過學(xué)習(xí)環(huán)境的空間信息找到并定位平臺。研究者通過記錄動物到達(dá)平臺的時間、路徑和其他行為來評估其學(xué)習(xí)和記憶能力。定位航行實(shí)驗通常包括多個試驗,以獲取更準(zhǔn)確和可靠的數(shù)據(jù)。
3. 空間探索實(shí)驗:
空間探索實(shí)驗是Morris水迷宮實(shí)驗的延伸,旨在評估動物對環(huán)境空間的認(rèn)知和記憶。在這個實(shí)驗中,平臺被移除,動物被釋放到水迷宮中,而其行為將被觀察和記錄。研究者關(guān)注動物對先前放置平臺的象限的偏好和探索行為,以了解其空間記憶的表現(xiàn)。這一階段的實(shí)驗有助于揭示動物對空間布局的長期記憶。
二. 水迷宮的優(yōu)缺點(diǎn):
優(yōu)點(diǎn):
操作簡便,數(shù)據(jù)誤差。篗orris水迷宮的操作相對簡單,研究者容易掌握實(shí)驗原理,使實(shí)驗過程更加順利。其簡明的構(gòu)造也有助于減小數(shù)據(jù)誤差,提高實(shí)驗的可靠性。
構(gòu)造簡明,檢測靈敏:Morris水迷宮的結(jié)構(gòu)簡潔明了,使其對實(shí)驗動物學(xué)習(xí)記憶能力的損傷研究變得更加有效。其靈敏的檢測性能使其成為評估動物認(rèn)知功能的重要工具。
消除氣味影響:Morris水迷宮能夠有效消除氣味對實(shí)驗結(jié)果的影響,確保實(shí)驗環(huán)境的純凈性,使研究者更好地理解動物行為。
無需傷害性刺激:與其他傷害性刺激迷宮不同,Morris水迷宮無需實(shí)驗動物接受傷害性刺激。同時,它提供豐富的實(shí)驗參數(shù),如潛伏期、目標(biāo)象限停留時間比、運(yùn)動距離等,更全面地反映動物的空間記憶認(rèn)知過程。
缺點(diǎn):
數(shù)據(jù)處理繁多,對實(shí)驗者要求高:由于水迷宮實(shí)驗的標(biāo)準(zhǔn)較高,產(chǎn)生的數(shù)據(jù)較為繁多,對實(shí)驗者的數(shù)據(jù)處理能力提出了較高的要求。這可能增加實(shí)驗的復(fù)雜性和時間成本。
對實(shí)驗室條件要求高:Morris水迷宮對實(shí)驗室條件有較高的要求,包括溫度、聲音等環(huán)境因素的一致性。保持這些條件的一致性可能需要使用實(shí)驗跟蹤監(jiān)控系統(tǒng)等設(shè)備,增加了實(shí)驗的技術(shù)難度。
對實(shí)驗動物要求嚴(yán)格:實(shí)驗動物的選擇也對實(shí)驗結(jié)果有影響。一般要求實(shí)驗動物為年輕體壯的老鼠,而老年老鼠可能難以完成水迷宮訓(xùn)練。某些鼠種如近交系BALB/c小鼠和129/SvJ小鼠可能不適合該實(shí)驗,而C57BL/6鼠由于存在嚴(yán)重的禿頭癥可能影響游泳能力,從而影響實(shí)驗成績。
年齡相關(guān)性問題:有些鼠種,如129/SvJ株的小鼠,在衰老時完成以視覺為基礎(chǔ)的學(xué)習(xí)記憶任務(wù)可能會出現(xiàn)困難,受年齡相關(guān)性視路病變的影響。
三. 實(shí)驗中應(yīng)注意的問題:
在進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗時,有一些關(guān)鍵問題需要注意,以確保實(shí)驗的可靠性和準(zhǔn)確性。
3.1 水溫:
在實(shí)驗過程中,水的溫度是一個重要的因素。為了保證實(shí)驗動物的適應(yīng)性和結(jié)果的準(zhǔn)確性,應(yīng)當(dāng)保持水溫的恒定。對于大鼠,水溫應(yīng)控制在23±2℃,而對于小鼠則為20±2℃。過高或過低的水溫都可能影響動物的行為,包括動物將水迷宮誤認(rèn)為“浴盆”或產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)。特別是在冬天溫差較大時,需要時刻監(jiān)測水溫,確保水溫保持恒定。
3.2 平臺的位置:
在定位航行實(shí)驗中,平臺的位置至關(guān)重要。平臺應(yīng)該放置在某一象限的中央位置,以避免動物在訓(xùn)練初期采用邊緣式的搜索策略而誤碰到平臺。平臺位置過于靠近池壁或中央都可能影響實(shí)驗結(jié)果,因此需要仔細(xì)選擇平臺的位置。
3.3 空間標(biāo)記物:
空間標(biāo)記物的選擇和布置也是需要注意的方面。這些標(biāo)記物應(yīng)當(dāng)是不同形狀的幾何圖形,懸掛于池壁四周,高度必須高于水面且在動物游泳時可見。標(biāo)記物的顏色也應(yīng)考慮到嚙齒類動物對黑色的敏感性,通常應(yīng)涂成黑色。
3.4 入水象限:
動物從不同象限入水是為了避免重復(fù)入水的情況發(fā)生。此外,避免動物在放置平臺的象限入水,以免影響實(shí)驗結(jié)果。確保動物在每次入水時都面朝池壁,防止它們因轉(zhuǎn)身而迅速登上平臺。
3.5 其他注意事項:
一些研究者建議在水中加入牛奶等物質(zhì)使其渾濁,以幫助隱藏水面下的平臺。然而,需要注意的是,實(shí)際上由于隱藏平臺低于水面1~2cm,動物在游泳逃避時抬起頭部,其在游泳時并不能看見隱藏平臺的位置。
在實(shí)驗過程中,每天在固定時間進(jìn)行測試,并保持操作輕柔,避免不必要的應(yīng)激刺激。實(shí)驗結(jié)束后,將小鼠擦干后放置在籠內(nèi),以避免大小鼠生病。