限制性內(nèi)切酶實驗操作中的問題及其解決方案

限制性內(nèi)切酶不僅在分子克隆中有著廣泛應(yīng)用，還可以應(yīng)用于疫苗研發(fā)生產(chǎn)、基因測序、SNP 鑒定、ddPCR 等領(lǐng)域。在往期的內(nèi)容中，我們已經(jīng)介紹了什么是限制性內(nèi)切酶以及內(nèi)切酶的分類，本期就來為大家盤點一下在使用內(nèi)切酶過程中最容易出現(xiàn)的問題以及解決方法。

限制性內(nèi)切酶的名稱通常由其來源物種的分類決定，屬名首字母 + 種名前兩位字母 + 血清型/菌株 + 同菌株的多種限制酶流水號羅馬數(shù)字。

為了方便大家理解，咱們以 Hind III  為例：

‍‍‍▐  問題 1：酶切不完全

▐  問題 2：酶切后 DNA 瓊脂糖凝膠電泳呈彌散狀

▐  問題 3：膠中條帶與預(yù)期不符

▐  問題 4：克隆很少或沒有

▐  問題 5：假陽性過多

限制性內(nèi)切酶在實驗中的應(yīng)用非常廣泛，實驗過程中會遇到的問題也多種多樣。有了小 M 給大家總結(jié)的各類實驗問題及解決方案，相信大家的實驗會更加順利~

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