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核酸絕對(duì)定量之?dāng)?shù)字PCR技術(shù)的實(shí)驗(yàn)流程與應(yīng)用

瀏覽次數(shù):599 發(fā)布日期:2024-7-8  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

數(shù)字PCR技術(shù)
數(shù)字PCR技術(shù)是將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬個(gè)納升級(jí)的微滴,其中每個(gè)微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴(kuò)增后,對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行檢測(cè),根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個(gè)數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。

 

數(shù)字PCR是一個(gè)全新的絕對(duì)定量方式,與傳統(tǒng)PCR定量PCR相比:其結(jié)果的精確度、準(zhǔn)確性和靈敏度更佳,結(jié)果不依賴Ct值,直接給出靶序列濃度,實(shí)現(xiàn)真正意義上的絕對(duì)定量。

數(shù)字PCR應(yīng)用

  • 定量癌癥標(biāo)志物;
  • 區(qū)分基因組變異;
  • 研究病毒載量;
  • NGS結(jié)果驗(yàn)證;
  • 基因表達(dá)分析;
  • 基因拷貝數(shù)檢測(cè);
  • ......
Sniper DQ-24數(shù)字PCR儀

平臺(tái)優(yōu)勢(shì)

  • 服務(wù)周期短:1.5-2h檢測(cè)時(shí)長
  • 可多重檢測(cè) :6色熒光通道
  • 靈敏度高 :>90%液滴有效率、樣本有效利用率可達(dá)95%
  • 精確度高 :一步法RT-PCR試劑,提高RNA樣本檢測(cè)精確度
  • 試劑開放 :兼容客戶試劑體系,增大特殊檢測(cè)成功率

實(shí)驗(yàn)流程

結(jié)果示例

樣品信息
DNA樣品:純度OD260/280 比值為 1.6-1.8,濃度≥10 ng/μl,體積≥20μl。
RNA樣品:純度OD260/280 比值為 1.8-2.0,濃度≥20 ng/μl,體積≥20μl。需要干冰運(yùn)輸。

應(yīng)用案例
數(shù)字PCR儀在食品和藥物檢測(cè)中的應(yīng)用(上)

杭州沃森生物技術(shù)有限公司應(yīng)用新一代Sniper DQ-24全自動(dòng)數(shù)字PCR,提供感染性疾病研究、遺傳疾病研究、腫瘤生物標(biāo)志物研究、NGS文庫定量、基因表達(dá)分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品安全檢測(cè)等服務(wù)。同時(shí)提供免費(fèi)Demo實(shí)驗(yàn),歡迎參觀及預(yù)約服務(wù)。

來源:杭州沃森生物技術(shù)有限公司
聯(lián)系電話:0571-86495259
E-mail:qlz@ws-bio.com

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