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免疫組化 (IHC) 實(shí)驗(yàn)操作步驟和注意事項(xiàng)

瀏覽次數(shù):382 發(fā)布日期:2024-7-26  來(lái)源:MedChemExpress (MCE)


免疫組織化學(xué) (Immunohistochemistry,IHC),一種用于檢測(cè)組織切片中特定抗原或蛋白質(zhì)的方法。以已知的抗體為探針,與組織或細(xì)胞中的特定抗原 (如多肽、蛋白質(zhì)等) 進(jìn)行特異性的結(jié)合。隨后,利用化學(xué)反應(yīng)將這些抗原-抗體復(fù)合物進(jìn)行可視化,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)未知抗原在組織或細(xì)胞中的定性、定位甚至定量研究。

 
圖 1. 免疫組織化學(xué) (IHC) 原理圖。

IHC 檢測(cè)可分為直接法 (又稱(chēng)一步法) 和間接法 (二步、三步或多步法)。直接檢測(cè)方法是直接與偶聯(lián)物 (例如熒光染料、酶、膠體金或生物素) 結(jié)合標(biāo)記的一抗的一步過(guò)程。直接法快速,但對(duì)于檢測(cè)常規(guī)處理的組織中的大多數(shù)抗原缺乏足夠的靈敏度 (圖 2)。

圖 2. 直接和間接免疫組織化學(xué) (IHC) 方法[1]。

為了滿足靈敏度更高的抗原檢測(cè)的需求,Coons 等人開(kāi)發(fā)了一種兩步法。第一層抗體未標(biāo)記,而第二層抗體 (針對(duì)一抗而產(chǎn)生) 則被標(biāo)記 (圖 2)。
 

間接法的靈敏度高于直接法: 

未標(biāo)記的一抗保留了完全的親和力,具有更強(qiáng)的抗原結(jié)合力,并且每分子一抗的標(biāo)記物(例如過(guò)氧化物酶)數(shù)量更多,從而增加了反應(yīng)強(qiáng)度。
  • 間接法可以用較少的一抗檢測(cè)較少量的抗原,用于放大一抗信號(hào),因?yàn)橐粋(gè)一抗至少可以結(jié)合兩個(gè)帶標(biāo)記的二抗。
  • 間接法也比直接法更方便,因?yàn)橄嗤亩箍捎糜跈z測(cè)不同的一抗,前提是后者是在同一物種中產(chǎn)生的。



IHC 實(shí)驗(yàn)流程:通常包括樣本固定、包埋、切片、脫蠟水化、抗原修復(fù)、滅活、封閉、一抗孵育、二抗孵育、顯色、復(fù)染、封片觀察 12 個(gè)部分。

圖 3. 免疫組化(IHC)流程圖[2]

1

樣本固定

目的

1) 充分保存細(xì)胞成分,包括可溶性和結(jié)構(gòu)性蛋白質(zhì);

2) 防止細(xì)胞成分 (包括抗原和酶) 自溶和置換;
3) 穩(wěn)定細(xì)胞材料,避免后續(xù)程序產(chǎn)生有害影響;
4) 便于常規(guī)染色和免疫染色[1]。

甲醛是常規(guī)組織學(xué)和免疫組織化學(xué)固定劑的金標(biāo)準(zhǔn)。甲醛主要保存肽和細(xì)胞器的一般結(jié)構(gòu)。

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基本步驟:

1)取材:從動(dòng)物或人體取得所需的組織樣本。對(duì)于組織塊,要確保其大小適中,不宜過(guò)大,以便于固定液能夠充分滲透。

2)初步處理:如果組織樣本帶有血液或其他體液,應(yīng)先用生理鹽水或 PBS 進(jìn)行沖洗,以去除這些可能影響固定效果的物質(zhì)。

3)固定:將組織樣本放入固定液中。常用的固定液包括 10% 中性緩沖福爾馬林 (Formalin,也稱(chēng)為甲醛)、甲醇、乙醇或它們的混合液等。固定液的量通常為組織體積的 10-20 倍,以確保組織能夠充分浸入固定液中。大組織標(biāo)本應(yīng)切開(kāi)固定,以免中間部分自溶解腐敗。

☑ 固定時(shí)間根據(jù)組織類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)要求而定,一般固定時(shí)間室溫 18-24 h。
4)固定后的處理:固定完成后,將組織從固定液中取出,用流水沖洗數(shù)分鐘,以去除殘留的固定液和可能產(chǎn)生的結(jié)晶。
 

   注意事項(xiàng):

  • 固定的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以免導(dǎo)致組織過(guò)度硬化和抗原性的喪失。
  • 固定的溫度通常為室溫或 4°C,避免高溫導(dǎo)致組織損傷。

  • 在固定過(guò)程中,要確保組織樣本完全浸入固定液中,避免出現(xiàn)未固定的部分。

  • 固定的容器應(yīng)干凈、無(wú)雜質(zhì),避免對(duì)組織造成污染。

2

包埋

目的

保護(hù)和支撐組織樣本,以便在切片時(shí)保持其完整性。通過(guò)將組織樣本嵌入到固體介質(zhì)中,可以制作出適合在顯微鏡下觀察的薄切片。

常用的包埋介質(zhì)包括石蠟、樹(shù)脂等。石蠟包埋是免疫組化中最常用的方法,因?yàn)樗梢杂行?span style="background-color:rgb(255, 255, 255)">保存組織形態(tài),提升切片質(zhì)量。樹(shù)脂包埋則常用于需要更高分辨率或特殊染色方法的樣本。

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基本步驟:

1)脫水:在組織樣本固定后,需要將其中的水分去除,以便于包埋介質(zhì)能夠充分滲透。酒精梯度脫水: 75% 乙醇、85% 乙醇、95% 乙醇、無(wú)水乙醇 (I)、無(wú)水乙醇 (II) 分別浸泡 1 min。

2)透明:脫水后,組織樣本會(huì)變得不透明,需要使用透明劑(如二甲苯)來(lái)去除其中的酒精和其他溶劑,使組織樣本變得透明。通常用二甲苯浸泡兩次,每次浸泡 1min。
3)浸蠟:將透明后的組織樣本放入熔化的石蠟中,讓石蠟充分滲透到組織樣本中。這個(gè)過(guò)程通常需要在溫箱中進(jìn)行,以確保石蠟的均勻滲透。
4)包埋:將浸蠟后的組織樣本放入模具中,倒入熔化的石蠟,然后讓石蠟冷卻凝固。這樣,組織樣本就被包埋在石蠟中了。

   注意事項(xiàng):

  • 在包埋過(guò)程中,要控制好溫度和時(shí)間,以確保石蠟的均勻滲透和組織的完整性。
  • 包埋后的組織塊需要冷卻凝固后才能進(jìn)行切片。在冷卻過(guò)程中,要避免過(guò)度冷卻導(dǎo)致石蠟碎裂或組織變形。

  • 在包埋前,要對(duì)組織樣本進(jìn)行充分的固定和脫水處理,以確保其抗原性和完整性。

3

切片

目的

將包埋后的組織樣本切割成薄片,以便于在顯微鏡下觀察和檢測(cè)。

基本步驟:

1)切片前的準(zhǔn)備:確保包埋后的組織塊已經(jīng)充分冷卻并固化。使用適當(dāng)?shù)那衅瑱C(jī)進(jìn)行切片。

2)切片:將包埋好的組織塊固定在切片機(jī)的樣本夾上。調(diào)整切片機(jī)的切片厚度,通常為 4-5 微米厚,這個(gè)厚度是根據(jù)需要檢測(cè)的抗原和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定的。

3)展片:使用刷子或毛筆輕輕地將切好的組織切片從刀上取下,并放在溫水 (40℃) 中展開(kāi)。

4)烤片:60℃ 烤片 2 h。

   注意事項(xiàng):

  • 在切片過(guò)程中,要控制好切片機(jī)的速度和切片刀的鋒利度,以獲得高質(zhì)量的切片。
  • 切片后,要及時(shí)對(duì)切片進(jìn)行處理,以避免抗原的損失和組織的變性。

  • 使用適當(dāng)?shù)酿べN劑,確保切片牢固地附貼在載玻片上,以便于后續(xù)的免疫組化實(shí)驗(yàn)。

4

脫蠟水化

目的

將組織切片從石蠟中釋放出來(lái),并使其恢復(fù)到適合進(jìn)行后續(xù)抗原檢測(cè)和染色的狀態(tài)。

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基本步驟:

1)脫蠟:切片首先被置于二甲苯中浸泡,以溶解和去除切片上的石蠟。通常,這個(gè)過(guò)程會(huì)分為多個(gè)步驟,每步大約持續(xù) 5 分鐘,以確保石蠟被完全去除。例如,可以使用二甲苯 Ⅰ、二甲苯 Ⅱ 和二甲苯 Ⅲ 分別浸泡 5 min。

2)水化:依次置于無(wú)水乙醇 I、無(wú)水乙醇 II,95% 乙醇、85% 乙醇和 70% 乙醇中,各浸泡 1 次,5 min/ 次;再放入純化水中清洗浸泡 5 min。

   注意事項(xiàng):

  • 徹底脫蠟:脫蠟過(guò)程必須徹底,以確保石蠟被完全去除。否則,殘留的石蠟會(huì)影響后續(xù)的抗原檢測(cè)和染色。
  • 避免干燥:在整個(gè)脫蠟水化過(guò)程中,應(yīng)確保切片始終保持在濕潤(rùn)的狀態(tài),避免干燥。干燥會(huì)導(dǎo)致非特異性抗體結(jié)合,從而出現(xiàn)高背景染色。

5

抗原修復(fù)

目的

重新暴露或修正這些被封閉或扭曲的抗原,以提高免疫組化實(shí)驗(yàn)中的抗體與抗原的結(jié)合率,增強(qiáng)信號(hào)的強(qiáng)度和特異性[3]。

最常用的修復(fù)緩沖液是 10 mM 的 pH 6.0 枸櫞酸鈉、pH 9.0 的 Tris-EDTA 、pH 8.0 的 EDTA。建議測(cè)試多種方法以尋找染色效果最佳的方法

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抗原修復(fù)的方法:

(1) 微波熱修復(fù):加入抗原修復(fù)液,放入切片,置于微波爐中火 8 min,; 7 min,轉(zhuǎn)小火 8 min;取出染色盒,冷卻至室溫。

(2) 水浴熱修復(fù): 加入抗原修復(fù)液,放入切片,置于水溶鍋中加熱,其間不斷用溫度計(jì)測(cè)其溫度,待抗原修復(fù)液的溫度達(dá)到有效度 (92℃),維持 40 min 后取出染色盒,冷卻至室溫。
(3) 高壓熱修復(fù): 在染色盒中加入抗原修復(fù)液,放入切片,置于高壓鍋內(nèi)加熱至飽壓后繼續(xù)加熱 5 min,關(guān)閉電源,10 min 后取出染色盒,冷卻至室溫。

(4) 酶解修復(fù):常用的消化酶有胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶 K 等。將切片置于含有酶解液的載玻片上,然后在適當(dāng)?shù)臏囟群蜐穸葪l件下進(jìn)行酶解 (通常為 37°C,20 min)。酶解后,同樣需要冷卻切片至室溫再進(jìn)行后續(xù)處理。

   注意事項(xiàng):

  • 加熱后需自然降溫;
  • 使用過(guò)量的抗原修復(fù)液;

  • 修復(fù)液的不同 pH 值對(duì)染色結(jié)果的影響比較大;

  • 沒(méi)有一種抗原修復(fù)緩沖液可以適用于所有抗原。不同的抗體可能需要不同的抗原修復(fù)方法和條件,因此需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和抗體特性選擇合適的抗原修復(fù)方法。

6

滅活

目的

消除細(xì)胞或組織中內(nèi)源性酶和活性物質(zhì)的影響,降低背景噪音,提高實(shí)驗(yàn)的特異性和敏感性[4]。

(1) 滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶:HRP 檢測(cè)系統(tǒng),常用的去除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的方法是 3% 過(guò)氧化氫水溶液,室溫 10 min。

(2) 洗滌:用 PBS 或 TBS 等緩沖液洗滌切片、浸泡 2 次,5 min/ 次。


   注意事項(xiàng):
  • H2O2 需現(xiàn)用現(xiàn)配,且 4℃ 避光保存,否則易引起非特異背景。
  • H2O孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)易引起脫片。

  • 部分組織還含有內(nèi)源性堿性磷酸酶,可用左旋咪唑進(jìn)行滅活。

     

7

封閉

目的

封閉組織切片上非特異性結(jié)合位點(diǎn),防止抗體與這些位點(diǎn)結(jié)合,從而減少背景信號(hào)。

基本步驟:

1)非特異位點(diǎn)封閉:將封閉液 (如 5% BSA 或血清等) 滴加到組織切片上,確保封閉液均勻覆蓋整個(gè)組織區(qū)域。然后將切片放入濕盒中,在室溫或 37°C 下孵育 30 min,讓封閉液與組織切片充分作用。

2)洗滌:封閉結(jié)束后,用 PBS 或 TBS 等緩沖液洗滌切片,以去除未結(jié)合的封閉液和可能存在的雜質(zhì)。

8

一抗孵育


免疫組化中的一抗孵育是免疫組化實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟之一。

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基本步驟:

1)選擇一抗:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇特異性高、親和力強(qiáng)的一抗。一抗應(yīng)該與目標(biāo)抗原的種屬來(lái)源、類(lèi)型等相匹配。

2)稀釋一抗:根據(jù)一抗的效價(jià)和實(shí)驗(yàn)要求,用適當(dāng)?shù)南♂屢?span style="color:rgb(136, 136, 136)"> (如 PBS、TBS 等) 稀釋一抗。
3)涂覆一抗:將稀釋好的一抗均勻涂覆在已封閉的組織切片上,確?贵w能夠充分接觸組織切片上的抗原。
4)孵育:將稀釋好的一抗均勻滴加在已封閉的組織切片上,放入濕盒中,室溫 (或 37°C) 孵育 1 h,使一抗與抗原充分結(jié)合。

   注意事項(xiàng):

  • 確保一抗的質(zhì)量和特異性,避免使用過(guò)期或質(zhì)量不佳的一抗。
  • 充分洗滌組織切片,去除未結(jié)合的一抗和其他雜質(zhì),減少背景染色。

9

二抗孵育

二抗的作用是與一抗結(jié)合,形成抗原-抗體-抗體復(fù)合物,從而增強(qiáng)信號(hào)的強(qiáng)度和特異性。

在免疫組化實(shí)驗(yàn)中,二抗通常帶有標(biāo)記酶 (如 HRP.AP 等),這些標(biāo)記物在后續(xù)的顯色步驟中可以產(chǎn)生可見(jiàn)的染色信號(hào),便于在顯微鏡下觀察目標(biāo)抗原在組織中的分布和表達(dá)情況。

二抗孵育的基本步驟:

1) 稀釋二抗:參考二抗的說(shuō)明書(shū),按照適當(dāng)比例用封閉液或其他適當(dāng)?shù)娜芤合♂尪埂?nbsp;

2) 孵育二抗:將稀釋好的二抗滴加在已經(jīng)過(guò)一抗孵育并洗滌的組織切片上,室溫孵育 30 min-60 min。

3) 洗滌:孵育完成后,使用洗滌液 (如 PBST 或 TBST) 在搖床上緩慢搖動(dòng)洗滌切片,以去除未結(jié)合的二抗和其他雜質(zhì)。洗滌通常需要重復(fù)幾次,每次洗滌時(shí)間一般為 5-10 分鐘。‍‍‍‍‍‍

注意事項(xiàng):

二抗的選擇和稀釋比例應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體要求和一抗的特性來(lái)確定。

對(duì)于抗體的選擇還有疑惑的小伙伴可以翻翻小 M 的往期推文:官宣! MCE 迎來(lái)了一位新成員——抗體

10

顯色

顯色檢測(cè)中需要考慮的其他因素有酶和顯色底物的選擇。每種檢測(cè)酶都有幾種不同的顯色劑。HRP-DAB 是最常用的顯色劑組合。

原理:在免疫組化中通常使用辣根過(guò)氧化物酶 (HRP) 或堿性磷酸酶 (AP) 等作為標(biāo)記酶。這些酶能催化底物發(fā)生顏色反應(yīng),從而在抗原所在的位置形成可見(jiàn)的沉淀物。

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基本步驟:

1)加入酶的底物 (如 HRP 的底物為 DAB,AP 的底物為 BCIP/NBT)。

2)底物在酶的作用下發(fā)生化學(xué)反應(yīng),形成有色沉淀物,通常呈現(xiàn)棕色 (對(duì)于HRP-DAB 系統(tǒng)) 或藍(lán)色 (對(duì)于 AP-BCIP/NBT 系統(tǒng))。

3)通過(guò)顯微鏡觀察組織切片上的顏色變化,可以確定抗原在細(xì)胞或組織中的位置和表達(dá)水平。

   注意事項(xiàng):
  • 選擇適當(dāng)?shù)臋z測(cè)系統(tǒng):根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜆颖咎匦赃x擇合適的檢測(cè)系統(tǒng);
  • 優(yōu)化條件:對(duì)一抗、二抗的濃度、孵育時(shí)間和溫度等條件進(jìn)行優(yōu)化,以獲得最佳的檢測(cè)結(jié)果。

  • 注意防護(hù):DAB 為聯(lián)苯偶氨化合物,可誘發(fā)皮膚癌和膀胱癥,在顯色操作過(guò)程中需注意防護(hù)。

11

復(fù)染

為了形成細(xì)胞輪廓,更好的定位目標(biāo)蛋白,可進(jìn)行復(fù)染[5]。

復(fù)染:滴加 80-100 μL 蘇木素染色液至完全覆蓋組織,室溫孵育 5 min,自來(lái)水沖洗返藍(lán)。

   注意事項(xiàng):
  • 復(fù)染的時(shí)間是需要摸索的,這個(gè)與蘇木精的配制時(shí)間有關(guān)。
  • 如果染色過(guò)淺可重復(fù)染色,如果染色過(guò)深可使用鹽酸進(jìn)行分化。

12

封片觀察

在免疫組化實(shí)驗(yàn)中,封片觀察是最后的步驟,用于保護(hù)組織切片、增強(qiáng)對(duì)比度和穩(wěn)定性,并允許在顯微鏡下進(jìn)行長(zhǎng)期觀察和分析。


封片步驟:
1)脫水:在完成所有染色步驟后,通常需要將組織切片進(jìn)行脫水處理,以去除切片上的水分。切片依次使用 70%、85%、95% 乙醇、無(wú)水乙醇 I、無(wú)水乙醇 Ⅱ 分別浸泡 1 min。

2)透明:脫水后,切片需要進(jìn)行透明處理,以便封片劑能夠均勻分布在切片上。通常使用二甲苯浸泡兩次,每次 1 min。

3)封片:將一滴封片劑 (如中性樹(shù)膠、甘油明膠等) 滴在組織切片上,然后用蓋玻片輕輕覆蓋。封片劑的選擇取決于實(shí)驗(yàn)要求和標(biāo)本類(lèi)型。封片時(shí)要確保沒(méi)有氣泡產(chǎn)生,并且蓋玻片與切片之間緊密貼合。

4)干燥:讓封片劑自然干燥,或者可以在溫箱中加速干燥過(guò)程。干燥后的切片可以長(zhǎng)期保存,并隨時(shí)用于觀察。


   注意事項(xiàng):
  • 封好的切片可以長(zhǎng)期保存,但應(yīng)放置在干燥、避光、溫度適宜的環(huán)境中,以避免切片受潮、褪色或損壞。
  • 封片劑和某些化學(xué)試劑可能對(duì)人體有害,因此在進(jìn)行封片操作時(shí)要注意安全防護(hù)措施,如佩戴手套、眼鏡等。

     


▐ Q1:染色弱?
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,我們常會(huì)遇到染色較弱的情況,如下圖所示:

圖 4. 染色弱。

   可能性原因:
1)抗體濃度過(guò)低,孵育時(shí)間過(guò)短,可提高抗體濃度,延長(zhǎng)孵育時(shí)間;
2)檢查試劑是否超過(guò)有效期;
3)檢查標(biāo)本固定方式、抗原修復(fù)方式是否適合目標(biāo)抗原;
4)未瀝干切片水份,致使試劑稀釋。建議滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液(注意防止切片干燥)
5)孵育溫度過(guò)低,若室溫低于 15,要改放在 37℃ 孵育箱孵育 30-60 min (或 4℃ 冰箱過(guò)夜)。

▐ Q2:產(chǎn)生非特異性染色?

在使用檢測(cè)進(jìn)行診斷之前,必須了解反應(yīng)在細(xì)胞或組織內(nèi)的預(yù)期抗原分布。如下圖所示,CD79a 抗體僅染色了漿細(xì)胞瘤細(xì)胞的細(xì)胞核。根據(jù)目前對(duì)該抗原位置(細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)膜) 的了解,該反應(yīng)被認(rèn)為不是特異性的。

注:非特異的原因也有是因?yàn)樾迯?fù)方式不對(duì),可能是修復(fù)太強(qiáng)了。

圖 5. 非特異性染色[6]。

下部插圖是異常染色的細(xì)節(jié);上部插圖描繪了漿細(xì)胞瘤中 CD79a 的典型細(xì)胞質(zhì)染色。條 = 60 μm,兩個(gè)插圖條 = 5 μm。


   可能性原因:
1)抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過(guò)縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制;

2)一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看;

3)內(nèi)源性過(guò)氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高 (含血細(xì)胞多的組織),需要通過(guò)延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來(lái)降低背景染色;

4)非特異性組分與抗體結(jié)合,需延長(zhǎng)封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來(lái)加強(qiáng)封閉效果;

5)DAB 孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或濃度過(guò)高;

6)洗滌不充分,可增加洗滌次數(shù)和洗滌時(shí)間;

7)染色過(guò)程中出現(xiàn)干片。干片容易導(dǎo)致非特異性染色,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需避免干片。

▐ Q3:免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因?

圖 6. 免疫組化陰性染色。  


   可能性原因:
1)抗體濃度和質(zhì)量問(wèn)題以及抗體來(lái)源選擇錯(cuò)誤,重新確認(rèn)抗體信息;

2)確認(rèn)試劑是否遺漏,添加順序是否正確;

3)抗原修復(fù)條件不合適,摸索最合適抗原修復(fù)條件;

4)組織切片本身這種抗原含量低,建議用已知陽(yáng)性樣本作陽(yáng)性對(duì)照。

▐ Q4:背景強(qiáng)?

 
圖 7. 免疫組化染色背景強(qiáng)。   


   可能性原因:
1)檢查一抗和二抗?jié)舛冗^(guò)高,需摸索合適的抗體濃度;

2)是否有效去除內(nèi)源性酶和生物素,可延長(zhǎng)內(nèi)源性酶滅活時(shí)間;

3)血清封閉時(shí)間是否過(guò)短,可延長(zhǎng)封閉時(shí)間;

4)檢查一抗的特異性是否良好,選擇特異性高的抗體;

5)適當(dāng)增加抗體孵育后的洗滌次數(shù)和延長(zhǎng)洗滌時(shí)間。
 

IRF3 Antibody

IRF3 Antibody 是一個(gè)非偶聯(lián)、兔源、抗 IRF3 單克隆抗體。它可用于人、小鼠背景下 WB、ICC/IF、IHC-P、FC 實(shí)驗(yàn)。 
Ki-67 Antibody
該抗體是一個(gè)非偶聯(lián)、兔來(lái)源、抗 Ki-67 多克隆抗體。同時(shí)是直腸癌、宮頸癌等免疫組化檢查指標(biāo)之一?捎糜谌恕⑿∈、背景下的 WB, ELISA, IHC-P, IHC-F, Flow-Cyt, ICC, IF 實(shí)驗(yàn)。
p16 Antibody
該抗體是一個(gè)非偶聯(lián)、兔來(lái)源、抗 p16 單克隆抗體。它是宮頸癌等免疫組化檢查指標(biāo)之一,可用于人背景下 WB, IHC-P 實(shí)驗(yàn)。
p53 Antibody
該抗體是一個(gè)非偶聯(lián)、兔源、抗 p53 單克隆抗體。它可用于人背景下 WB、ICC/IF、IHC-P、IP 實(shí)驗(yàn)。
HRP-conjugated AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG H&L
該抗體是偶聯(lián)了 HRP 標(biāo)記、山羊來(lái)源的抗小鼠 IgG 抗體。它可結(jié)合小鼠 IgG 抗體的輕鏈和重鏈,用于小鼠背景下 WB、ELISA、IHC 實(shí)驗(yàn)。 
HRP-conjugated AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG H&L   

該抗體是偶聯(lián)了 HRP 標(biāo)記、山羊來(lái)源的抗兔 IgG 抗體。它可結(jié)合兔 IgG 抗體的輕鏈和重鏈,用于兔子背景下 WB、IHC-P、ELISA 實(shí)驗(yàn)。


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