洛美沙星檢測(cè)卡使用說(shuō)明書（膠體金法）

 
1、 原理及用途
本產(chǎn)品應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制膠體金免疫層析的原理制成，用于快速檢測(cè)畜牧、水產(chǎn)等養(yǎng)殖業(yè)中的洛美沙星（Lomefloxacin，LOM）殘留。
樣本溶液滴入金標(biāo)微孔后，樣本溶液中的洛美沙星與金標(biāo)抗體相結(jié)合，從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上洛美沙星偶聯(lián)物結(jié)合。

2、 技術(shù)指標(biāo)
2.1組織樣本檢測(cè)下限：5ppb（ng/ml）

3、 試劑盒組成

名稱	10T/盒	20T/盒
檢測(cè)卡（含金標(biāo)微孔）	10個(gè)	20個(gè)
提取劑B	30ml×2	30ml×3
溶解劑	30ml×1	30ml×2
Nacl	25ml×1	25ml×2
LOM復(fù)溶液	4ml×1	8ml×1
說(shuō)明書	1份	1份

4、 需要的器材和試劑
4.1 儀器：均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：?jiǎn)蔚?0µl-200µl，100µl-1000µl

5、 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知：
實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5.2 配液：無(wú)
5.3 樣本前處理步驟：
5.3.1魚蝦組織
（建議蝦要去掉頭和殼后徹底清洗干凈，魚要去鱗后取魚背部油脂較少的部位進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，樣本應(yīng)當(dāng)避光冷藏保存）
1．魚、蝦、畜禽肉、雞肉等去皮，用均質(zhì)器均質(zhì)樣本，取3g去脂肪組織樣本，加入到配套的15ml離心管中。
2．向離心管中準(zhǔn)確加入提取劑B 4ml，加入Nacl溶液2ml,將瓶塞蓋緊密封，劇烈振蕩3分鐘，4000rpm離心3分鐘。
3．用吸管取分層后的上層清液(切勿吸取下層)2ml±0.2ml加入到配套5ml離心管中，用氮吹儀或吹風(fēng)機(jī)吹干（離心管管底有部分顆粒狀未吹干黃色油脂屬正�，F(xiàn)象）.
4. 向吹干的離心管中加入1mL溶解劑，劇烈振蕩復(fù)溶離心管底及內(nèi)壁固體殘留物，然后加入0.3mL配套稀釋液，充分混勻30s后靜置1分鐘至明顯分層；
5. 吸取120ul分層后的下層溶液，此溶液即為待檢液；

6、 實(shí)驗(yàn)步驟
6.1 撕開(kāi)檢測(cè)卡鋁箔包裝袋，取出檢測(cè)卡，放于平整、潔凈的臺(tái)面上。
6.2 取已準(zhǔn)備好的待測(cè)樣本溶液120ul（5-6滴）加入到金標(biāo)微孔中，等待反應(yīng)2分鐘后，用滴管吹打至完全溶解孔內(nèi)紫紅色物質(zhì)，再等待2分鐘，吸取孔內(nèi)90ul（4-5滴）溶液滴加到加樣孔中，加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí)；
6.3 按室溫下放置5-8分鐘判斷結(jié)果，其他時(shí)間結(jié)果判讀無(wú)效。

7、 結(jié)果判斷
陰性              陽(yáng)性                無(wú)效
陰性：在檢測(cè)窗內(nèi)，對(duì)照線（C）出現(xiàn)紫紅色線，檢測(cè)線（T）顯色與對(duì)照線一致或更深，表示樣品中濃度低于檢測(cè)限，或不含有。
陽(yáng)性：在檢測(cè)窗內(nèi)，對(duì)照線（C）出現(xiàn)紫紅色線，檢測(cè)線（T）不顯色或比對(duì)照線淺（備注：5分鐘后，T線明顯顯綠色的可判定為陽(yáng)性），表示樣品中濃度高于檢測(cè)限。
無(wú)效：在檢測(cè)窗內(nèi)，對(duì)照線（C）不出現(xiàn)紫紅色線。

8、 注意事項(xiàng)
8.1 過(guò)期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品，均不可使用。
8.2 檢測(cè)卡從冰箱中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開(kāi)，打開(kāi)的檢測(cè)卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測(cè)卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用，以免交叉污染。
8.5 待檢樣品溶液需清亮、無(wú)混濁顆粒、無(wú)細(xì)菌污染，否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異�，F(xiàn)象，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。

9、 貯藏及保存期
儲(chǔ)藏條件：試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒。