賽業(yè)云課堂：大片段基因組人源化小鼠的制備及應(yīng)用

瀏覽次數(shù)：3730　發(fā)布日期：2021-7-23　來源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

新藥研發(fā)的經(jīng)驗(yàn)已經(jīng)證明，開展新藥物研發(fā)過程中的初步安全性、有效性與預(yù)測(cè)性、可重復(fù)性，以及臨床上的適用性等相關(guān)研究，需要建立理想的臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。將人相關(guān)基因引入小鼠，構(gòu)建能較好模擬和預(yù)測(cè)人疾病過程的基因工程人源化小鼠，為解決當(dāng)前小鼠模型作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所面臨的挑戰(zhàn)，提供了一個(gè)可被廣泛接受，且更具應(yīng)用優(yōu)勢(shì)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。基因工程人源化小鼠，包括點(diǎn)突變小鼠、小片段敲入和大片段基因組敲入小鼠。其中點(diǎn)突變及小片段敲入小鼠制備比較容易，相比之下大片段基因組人源化小鼠的制備在技術(shù)上有一定的挑戰(zhàn)性。

那么為什么要制備大片段基因組人源化小鼠？大片段基因組人源化小鼠有哪些應(yīng)用？制備大片段基因組人源化小鼠有哪些技術(shù)難點(diǎn)？該如何突破？敬請(qǐng)關(guān)注7月29日（周四）晚七點(diǎn)賽業(yè)生物云課堂，賽業(yè)生物高級(jí)科學(xué)家歐陽應(yīng)斌博士將為大家一一講解。參與課程互動(dòng)還有機(jī)會(huì)抽中賽業(yè)生物精美禮盒一份，快長按下方二維碼免費(fèi)報(bào)名參加課程吧！

課程時(shí)間：2021年7月29日（周四）19:00—20:00

通過本期視頻，您將學(xué)習(xí)到

☑ 基因工程人源化小鼠的種類

☑ 大片段基因組人源化小鼠的必要性

☑ 制備大片段基因組人源化小鼠的難點(diǎn)及應(yīng)對(duì)策略

☑ 大片段基因組人源化小鼠的應(yīng)用

☑ 在線答疑

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講師簡介

歐陽應(yīng)斌博士賽業(yè)生物高級(jí)科學(xué)家

歷任美國Oklahoma醫(yī)學(xué)研究基金會(huì)和Thios生物制藥公司高級(jí)科學(xué)家以及Taconic生物科技公司分子生物學(xué)部主管，二十多年來一直致力于基因工程鼠研究。目前任職于賽業(yè)生物，成功開發(fā)了數(shù)千例轉(zhuǎn)基因和基因敲除/敲入小鼠及大鼠模型；在PNAS、JBC等高水平學(xué)術(shù)期刊發(fā)表多篇論文，提供的技術(shù)服務(wù)被Nature等國際頂尖雜志直接引用達(dá)數(shù)百次。

講座報(bào)名

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賽業(yè)生物TurboKnockout-Pro基因編輯技術(shù)助力新藥研發(fā)

TurboKnockout-Pro基因編輯技術(shù)是將賽業(yè)自主研發(fā)的TurboKnockout技術(shù)融合了BAC重組技術(shù)進(jìn)行技術(shù)創(chuàng)新。BAC可容納高達(dá)300kb的外源DNA。通過BAC重組可引入更大的基因及調(diào)控序列，從而更接近于內(nèi)源基因的表達(dá)模式。

TurboKnockout-Pro不僅具有傳統(tǒng)ES打靶技術(shù)成熟、修飾準(zhǔn)確、效果穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，通過在ES水平實(shí)現(xiàn)多步BAC重組，可大大縮短項(xiàng)目周期，且與CRISPR/Cas9技術(shù)相比，TurboKnockout-Pro技術(shù)無脫靶效應(yīng)，無專利糾紛困擾，是涉及新藥研發(fā)項(xiàng)目常用的技術(shù)。

應(yīng)用方向1：
制備全人源化小鼠
TurboKnockout-Pro基因編輯技術(shù)可通過BAC重組實(shí)現(xiàn)高達(dá)300kb的大片段基因敲入，將更完整的人類基因?qū)胄∈蠹?xì)胞中，制備復(fù)雜全人源化小鼠模型，節(jié)省項(xiàng)目研發(fā)成本，且無脫靶效應(yīng)，無專利糾紛困擾，更快助力新藥研發(fā)。

以CD3人源化小鼠模型為例。小鼠CD3復(fù)合體的胞外區(qū)與人類種間同源性相對(duì)較低，人CD3特異性治療抗體不能有效激活小鼠效應(yīng)T細(xì)胞，需建立一個(gè)適合于評(píng)估人類CD3特異性治療的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。賽業(yè)生物采用TurboKnockout-Pro技術(shù)為北京免疫方舟醫(yī)藥科技有限公司成功構(gòu)建CD3人源化小鼠模型，助力創(chuàng)新多特異性抗體藥物研發(fā)。此外，賽業(yè)生物利用該技術(shù)已和多家科研機(jī)構(gòu)及企事業(yè)單位合作，構(gòu)建大片段人源化小鼠模型。

應(yīng)用方向2：
制備全人源化點(diǎn)突變小鼠
因?yàn)槿祟惣膊≈谢虍a(chǎn)物并非總是如轉(zhuǎn)基因一樣的高表達(dá)，也不是像基因敲除一樣完全不表達(dá)。很多情況下疾病的發(fā)生是由單個(gè)或者數(shù)個(gè)堿基的改變而造成的蛋白結(jié)構(gòu)改變，表現(xiàn)為非正常激活或者抑制。因此，構(gòu)建精細(xì)的可表征疾病的基因突變模型便成為了疾病臨床前研究的最佳方案。當(dāng)研究的人源基因與小鼠基因同源序列同源性較高，直接制作點(diǎn)突變小鼠模型即可模擬；當(dāng)目的人源基因與小鼠基因同源序列同源性較低，則需要制作帶有突變的人源化小鼠，更好的模擬人的疾病表型。在基因治療研究策略中，以基因組學(xué)或蛋白組學(xué)的方式找到致病基因，再結(jié)合人源化點(diǎn)突變小鼠模型進(jìn)行驗(yàn)證，產(chǎn)出的高質(zhì)量文章也是層出不窮。