鱟試劑選購(gòu)導(dǎo)讀--細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)新手指南

 

鱟試劑是從棲生于海洋的節(jié)肢動(dòng)物“鱟”的藍(lán)色血液中提取變形細(xì)胞溶解物，經(jīng)低溫冷凍干燥而成的生物試劑，專用于細(xì)菌內(nèi)毒素與β-葡聚糖檢測(cè)。

 

鱟試劑按原料來(lái)源分：
全世界目前有4個(gè)種屬的鱟，其中僅有東方鱟(Tachypleus tridentatus Leach) 和美洲鱟(Limulus polyphemus Linnaeus)可制造鱟試劑，對(duì)應(yīng)生產(chǎn)出來(lái)的鱟試劑分別為東方鱟鱟試劑（Tachypleus Amebocyte Lysate, TAL）和美洲鱟鱟試劑（Limulus Amebocyte Lysate，LAL），TAL與LAL具有相同的功效。

 

 

 

凝膠法系通過(guò)鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來(lái)定性檢測(cè)或半定量?jī)?nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見(jiàn)規(guī)格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量，使用時(shí)應(yīng)加除熱原水（細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水）復(fù)溶后使用。凝膠法是通過(guò)觀察有無(wú)凝膠形成作為反應(yīng)的終點(diǎn)。此法操作比較簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)，不需要專用測(cè)定設(shè)備，可以進(jìn)行定性或半定量測(cè)定。

 

特異性鱟試劑，即棄G因子鱟試劑，是國(guó)內(nèi)首創(chuàng)的產(chǎn)品， 它專一對(duì)內(nèi)毒素起反應(yīng)，避免了G因子旁路的干擾，使檢測(cè)結(jié)果更加可靠，在藥檢和臨床檢驗(yàn)方面是不可或缺的理想檢測(cè)試劑。

 

動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑、終點(diǎn)濁度法鱟試劑、動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑、終點(diǎn)顯色法鱟試劑，這四種方法都是定量檢測(cè)內(nèi)毒素的。

 

根據(jù)檢測(cè)原理，終點(diǎn)濁度法和動(dòng)態(tài)濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測(cè)鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過(guò)程中的濁度變化而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法。終點(diǎn)濁度法未見(jiàn)商品化產(chǎn)品。動(dòng)態(tài)濁度法（又稱動(dòng)態(tài)比濁法）是檢測(cè)反應(yīng)混合物的濁度上升某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時(shí)間，或是檢測(cè)濁度增加速度的方法。

 

終點(diǎn)顯色法和動(dòng)態(tài)顯色法都是屬于顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團(tuán)的多少而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法，根據(jù)產(chǎn)物顏色判斷內(nèi)毒素濃度，又稱為比色法。廈門鱟試劑廠于2005年推出以鱟四肽為顯色底物的鱟試劑盒，抗干擾能力強(qiáng), 靈敏度高達(dá)0.005EU/ml, 質(zhì)量達(dá)到國(guó)際領(lǐng)先水平。目前已有500多家單位使用該試劑盒，并有部分單位發(fā)表相應(yīng)文獻(xiàn)。國(guó)內(nèi)有少量國(guó)外產(chǎn)品，但價(jià)格遠(yuǎn)高于國(guó)產(chǎn)試劑，到貨周期長(zhǎng)。

 

如果您僅需要檢測(cè)樣品的內(nèi)毒素限量，可以選擇凝膠法鱟試劑，通過(guò)確定內(nèi)毒素限值及最大有效稀釋倍數(shù)，做樣品的干擾試驗(yàn)從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。

如果您需要定量測(cè)定樣品中內(nèi)毒素含量則應(yīng)選擇顯色基質(zhì)鱟試劑盒或動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑。

 

動(dòng)態(tài)濁度法與動(dòng)態(tài)顯色法需要帶溫育系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)光度測(cè)定儀器及配套軟件，例如，微板鱟試儀ELx808及軟件TALgent 或Gen5。動(dòng)態(tài)濁度法與動(dòng)態(tài)顯色法簡(jiǎn)單方便、一步即成，線性范圍寬。

 

終點(diǎn)顯色法需要配套酶標(biāo)儀或可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)。配套帶有溫育系統(tǒng)的酶標(biāo)儀，如微板鱟試儀ELx808，可減少試劑用量。