如何結(jié)合液氮使用Bullet Blender破碎組織細(xì)胞

      對(duì)于一些特別堅(jiān)硬或韌性比較強(qiáng)的樣品，如：硬骨骼、軟骨、指甲、魚(yú)鱗、結(jié)締組織、種子等，使用普通機(jī)械研磨方法很難即保證研磨破碎效果又保證樣品一直處于低溫狀態(tài)。傳統(tǒng)手工研磨方法雖然能二者兼顧，但是當(dāng)樣品數(shù)量比較多時(shí)，手動(dòng)研磨非常費(fèi)時(shí)費(fèi)力，而且經(jīng)常存在交叉污染的可能。如果提取RNA、酶等對(duì)溫度比較敏感的物質(zhì)，使用液氮進(jìn)行預(yù)處理，保證樣品在破碎過(guò)程中一直處于低溫是非常重要的。

        使用Bullet Blender進(jìn)行組織細(xì)胞的破碎時(shí)，將樣品用液氮進(jìn)行預(yù)冷凍，這樣既能保證樣品的破碎效率又能保證樣品一直處于低溫狀態(tài)。以骨骼和植物葉片為例，具體操作方法如下：

        骨骼：

        取0.3克骨骼，用濾紙吸取骨骼表面水分，放入樣品管，加入1.6mm不銹鋼研磨珠5粒，再加3勺0.5mm不銹鋼研磨珠，蓋上管蓋。將整個(gè)試管放入液氮中冷凍10到20秒鐘，然后放入機(jī)器處理20秒鐘。取出樣品管可見(jiàn)樣品被破碎成乳白色粉末，然后加入提取緩沖液，再處理1分鐘或直接進(jìn)行后續(xù)提取，加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直為-20℃以下。

        葉片：

        取0.2克植物葉片，清潔葉片表面后放入樣品管，加入2.0mm氧化鋯研磨珠5粒，再加3勺1.0mm氧化鋯研磨珠，蓋上管蓋。將整個(gè)試管放入液氮中冷凍10到20秒鐘，然后放入機(jī)器處理20秒鐘。取出樣品管可見(jiàn)葉片被破碎成綠色粉末，然后加入提取緩沖液，再處理1分鐘或直接進(jìn)行后續(xù)提取，加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直為-20℃以下。

注意：樣品管必需使用Eppendorf 1.5mL Safe-Lock微量離心管（訂貨號(hào)：0030 120.086）。

產(chǎn)品詳細(xì)介紹見(jiàn)：

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