實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫方案一覽
瀏覽次數(shù):2222 發(fā)布日期:2012-6-18
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1、抗原: 蛋白質(zhì)、多肽、細(xì)胞器、細(xì)胞、組織等。
2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等。
3、不同動(dòng)物免疫所需抗原量(以蛋白免疫為例)
>18-20kDa <18-20kDa
動(dòng)物 抗原量 最佳抗原量 抗原量 最佳抗原量
兔子 20-200 100 50-400 200
小鼠 2-40 15 4-60 40
大鼠 10-50 30 20-150 50
綿羊 100-1000 200 200-1000 400
母雞 20-200 100 50-400 200
單位:微克
4、免疫方案(以免疫兔子為例):
天數(shù) 0 14 28 38 56 66 87
注射 x x x x
采血 2ml 2ml 2+20ml 2+50-70ml
5、注意:
1)第一次免疫用完全佐劑與免疫原混合,以后加強(qiáng)免疫用不完全佐劑與免疫原混合,采取多點(diǎn),時(shí)間間隔式免疫法。
2) 如果用細(xì)胞免疫兔子,那么每次免疫所需細(xì)胞量為2-3 x 107 cells。
3) 在連續(xù)免疫完三次后,需要少量取血進(jìn)行ELISA檢測(cè),檢測(cè)所免疫動(dòng)物的抗體滴度,一般滴度能達(dá)到1:10,000-50,000。在處死所免疫的動(dòng)物前一周應(yīng)加強(qiáng)一次免疫。
4) 如果用小鼠免疫,可以尾靜脈小量采血(大約50µl),最后取眼球大量采血(大約500-1000µl);如果用兔子免疫,可以耳緣靜脈小量取血(大約2mL),最后心臟大量取血(50-100mL)
5) 按血清制備的標(biāo)準(zhǔn)方法將血清分離,并且分裝成小份,儲(chǔ)藏在-80oC。
相關(guān)生物試劑:
弗氏完全佐劑FCA
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