移液器雖小,但是作為實驗室常規(guī)儀器之一,對我們的實驗結(jié)果的準確性和精確性還是起著不小的作用,因此為了提高我們的實驗效果,萊貝在本文要說說移液器的消毒滅菌處理。對于移液器而言,移液器的消毒和滅菌這兩個概念經(jīng)常被大家混為一談。而事實上,兩者是有一定區(qū)別的:消毒只是要求使上的活菌控制在一定范圍內(nèi),達到無害化水平即可;而滅菌則更嚴格些,要求消滅所有活菌。因此,滅菌的處理要求要高于消毒。
一、移液器消毒
移液器消毒有兩種方法:
1.化學消毒。簡單說來,就是用酒精等擦拭移液器的外表面,然后晾干即可。這對于所有品牌而言應該是都可以做到的;如果說有某種移液器無法用化學消毒這種方法來進行消毒的話,只能證明其外殼的材質(zhì)非常之差。
2.紫外線消毒。就是用紫外線照射移液器的表面,通過破壞細胞的DNA結(jié)構(gòu)來達到消毒的目的。紫外線消毒的時間取決于輻射強度和細菌對紫外線的抵抗力強弱。大多數(shù)品牌的移液器是可以用紫外線消毒的,但仍需要事先與供應商進行確認,并非所有的移液器都能進行紫外線消毒。
二、移液器滅菌
首先,我們來說說常規(guī)的高溫高壓滅菌處理
1、 如果是不可整支消毒的移液器,先用滅菌袋、錫紙或者牛皮紙等材料包裝需要滅菌的部件,121℃,1bar大氣壓,20分鐘;滅菌完畢后,在室溫下完全晾干后,給活塞上油,再進行組裝。
2、 如果是可整支消毒的移液器(譬如德國IKA移液器),則可以將整支移液器放置于121℃,1bar大氣壓,進行20分鐘的整支高溫高壓消毒。
3、 如果有些不能進行高溫高壓消毒,但是又需要用于某些特殊的操作,比如RNA提取等,如果擔心移液器被污染影響實驗結(jié)果,那么就用75%的乙醇清洗移液器的頭部。
如果是用于提取RNA要用無RNase污染的75%乙醇。
注意:半支消毒的移液器不可以進行整支消毒,否則會出現(xiàn)讀數(shù)的數(shù)字部位變色,讀數(shù)不準等明顯現(xiàn)象。
其次是UV紫外線照射滅菌
是采用抗紫外線的高質(zhì)量材料制作的,整支移液器可暴露在紫外線照射下進行表面消毒。
三、移液器上DNA污染的去除
我們先來說說處理方法:
1、10X儲藏液稀釋成1倍緩沖液,將IKA® Alpha 或 Precision兩個系列下半部分被拆卸下來的內(nèi)外套筒,在95℃下浸泡30分鐘。
2、用蒸餾水將套筒沖洗干凈。
3、在60℃下進行烘干處理,或者完全晾干。
4、在活塞表面涂上硅油并組裝部件。
清洗液,10X儲藏液的配制:
30.6g NaCl
39.2g Glycine
523ml H2O
加1 N HC1 至 1000ml