多功能酶標(biāo)儀的新發(fā)展 －濾光片和光柵以外的新濾光技術(shù)��！
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多功能酶標(biāo)儀是現(xiàn)今生物技術(shù)和研究中不可缺少的工具。隨著高通量檢測(cè)和微孔板技術(shù)的日漸成熟，多功能酶標(biāo)儀已漸漸成為現(xiàn)今實(shí)驗(yàn)室必備的系統(tǒng)。市場(chǎng)上有很多多功能酶標(biāo)儀的廠家，可謂百花齊放。消費(fèi)者往往會(huì)花多眼亂，很難取舍。其實(shí)，現(xiàn)今的酶標(biāo)儀主要有兩種光學(xué)技術(shù)：一種是利用濾光片技術(shù)；另一種是光柵技術(shù)。 前者的技術(shù)發(fā)展比較早，后者則是較近期的技術(shù)。但是兩者其實(shí)各有好處，可以互補(bǔ)不足。而不論是哪種技術(shù)，選擇酶標(biāo)儀的第一原則是選擇有最好的信噪比（Signal to Noise Ratio, SNR）。 | |||||||||
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濾光片的好處： | |||||||||
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濾光片具有非常好的透光率 (可高于90%)，也就是說(shuō)光能量的損失比較少。如下圖(圖1)，在一個(gè)熒光檢測(cè)中，經(jīng)過(guò)濾光片進(jìn)入樣本的激發(fā)光和從樣本透過(guò)濾光片進(jìn)入檢測(cè)器的發(fā)射光都只有少量的損失(大約10%)。光的損失較少，光的能量自然較大，熒光的信號(hào)自然很容易檢測(cè)。這是獲得高信噪比（SNR）的最初始保證。 | |||||||||
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所以，由于有高的信噪比（SNR）保證，濾光片系統(tǒng)從酶標(biāo)儀誕生以來(lái)一直就是高靈敏度檢測(cè)的黃金標(biāo)準(zhǔn)。我們也不難發(fā)現(xiàn)很多有光柵型酶標(biāo)儀的廠家在一些檢測(cè)靈敏度要求比較高的高端應(yīng)用(如：TRF、TR-FRET、等)中，都會(huì)有另外配上濾光片模塊的設(shè)計(jì)。因?yàn)檫@些高端的應(yīng)用，光柵系統(tǒng)未能有滿(mǎn)意的效果或干脆做不到。 | |||||||||
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濾光片的缺點(diǎn)： | |||||||||
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光柵的好處: | |||||||||
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光柵系統(tǒng)的好處就是可隨意選擇波長(zhǎng)和進(jìn)行波長(zhǎng)掃描，這方便了使用者。現(xiàn)今大部份的研究單位都設(shè)有公用平臺(tái)，把一些高端的儀器集中一起管理，高端的多功能酶標(biāo)儀也是其中之一。光柵型的多功能酶標(biāo)儀在公用平臺(tái)中為使用者提供了便利，因不需更換和保管濾光片，在儀器管理的層面也比較簡(jiǎn)單。 | |||||||||
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光柵的缺點(diǎn)： | |||||||||
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雖然光柵系統(tǒng)帶來(lái)方便，但也有一些致命缺點(diǎn)。首先，基于光路設(shè)計(jì)的問(wèn)題，光柵的光能損失比濾片大很多。如下圖(圖2)，在熒光檢測(cè)中，光源經(jīng)過(guò)光柵而成的激發(fā)光已比原來(lái)的少了大概70%的能量。樣本被激發(fā)后會(huì)放出發(fā)射光，發(fā)射光會(huì)透過(guò)光柵去分隔出需要的波長(zhǎng)。被分隔后的發(fā)射光能量再損失了70%。假設(shè)熒光被激發(fā)的效率為50%，那么可以進(jìn)入檢測(cè)器被檢測(cè)的光只有原來(lái)光源的 4.5% �。� 這就是為什么光柵酶標(biāo)儀的 | |||||||||
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靈敏度遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒(méi)有濾光片酶標(biāo)儀好的原因，也正因?yàn)檫@個(gè)原因，在高端光柵型的酶標(biāo)儀也要配備濾光片模塊才能進(jìn)行TRF、TR-FRET等高靈敏度需求的檢測(cè)。 | |||||||||
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集兩家之長(zhǎng)? | ||||||||||||||
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鑒于市場(chǎng)上開(kāi)始意識(shí)到光柵和濾光片的問(wèn)題，于是一些酶標(biāo)儀廠家推出了一些稱(chēng)為混合型 (Hybrid Technology)的型號(hào)。這些混合型系統(tǒng)配有濾光片和光柵兩種光路，用戶(hù)可以按需要選擇其一去做檢測(cè)。這種概念聽(tīng)起來(lái)是不錯(cuò)，可是實(shí)際上混合型的酶標(biāo)儀并沒(méi)有解決濾光片和光柵互有缺點(diǎn)的問(wèn)題。它只是把兩種技術(shù)放在一起，供使用者選擇，每種技術(shù)本身的問(wèn)題仍然存在。這種儀器的賣(mài)點(diǎn)似是市場(chǎng)推廣的手法較真正解決問(wèn)題為多。 | ||||||||||||||
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要真正集兩家之長(zhǎng)，就是要使酶標(biāo)儀能擁有濾光片的高信噪比同時(shí)也擁有光柵的靈活 | ||||||||||||||
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性。德國(guó)專(zhuān)業(yè)酶標(biāo)儀廠家BMG Labtech剛在今年七月推出了突破性的新技術(shù)—線(xiàn)性漸變?yōu)V光片（LVF）技術(shù)。這個(gè)技術(shù)利用漸變?yōu)V光片技術(shù)實(shí)現(xiàn)了光柵的功能，且同時(shí)保證了濾光片本身的高信噪比特性。LVF系統(tǒng)既可以隨意挑選波長(zhǎng)和進(jìn)行波長(zhǎng)掃描。更具突破性的是，LVF技術(shù)完全克服了傳統(tǒng)光柵帶寬選擇的局限性，可按實(shí)驗(yàn)需在8nm-100nm之間選擇任意帶寬（0.1nm遞進(jìn)）！也就是說(shuō)LVF集合了濾光片的高信噪比、更大彈性帶寬選擇的優(yōu)點(diǎn)和傳統(tǒng)光柵波長(zhǎng)選擇和波長(zhǎng)掃描等所有優(yōu)點(diǎn)，諸多優(yōu)點(diǎn)的有機(jī)結(jié)合造就了新一代的多功能酶標(biāo)儀——LVF酶標(biāo)儀。 | ||||||||||||||
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現(xiàn)在，LVF酶標(biāo)儀的使用者可以利用LVF技術(shù)像傳統(tǒng)光柵酶標(biāo)儀一樣去自由制定任意波長(zhǎng)的濾光片。LVF酶標(biāo)儀與傳統(tǒng)濾光片酶標(biāo)儀相比較，在普通熒光檢測(cè)、TRF、TR-FRET等高端領(lǐng)域檢測(cè)效果與濾光片系統(tǒng)酶標(biāo)儀同樣出色！LVF技術(shù)是市場(chǎng)上唯一可以改變波長(zhǎng)和帶寬的濾光片/光柵，這種特破性的設(shè)計(jì)使LVF酶標(biāo)儀可完成任何波長(zhǎng)、任何帶寬、任何檢測(cè)的完美檢測(cè)！ | ||||||||||||||
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