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聯(lián)科新品Western Blot 一抗二抗去除液(酸性)使用說(shuō)明

瀏覽次數(shù):2340 發(fā)布日期:2015-7-21  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

Western Blot 一抗二抗去除液

ECL 化學(xué)發(fā)光法是目前最常用、最靈敏的 Western Blot 檢測(cè)方法。由于這些底物不會(huì)在膜表面沉淀、牢牢結(jié)合在膜上,因此可以通過(guò)一抗二抗去除液(Stripping buffer)將親和結(jié)合的一抗和二抗去除。一抗二抗去除液既要足夠強(qiáng)烈而有效解離結(jié)合的抗體,也要足夠溫和使轉(zhuǎn)移的目標(biāo)蛋白仍能完整地留在 NC 膜或 PVDF 膜上。通過(guò)使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用過(guò)的膜檢測(cè)其它蛋白。和重新跑一次 SDS-PAGE 膠相比,不僅省時(shí)省力,而且可以消除重新上樣而帶來(lái)的誤差,使可比性更強(qiáng)。

一、 使用方法

1. 用本產(chǎn)品覆蓋經(jīng) ECL 發(fā)光的膜,室溫孵育 5 - 10 分鐘。

2. 棄去去除液,再加入新鮮的去除液覆蓋經(jīng)ECL發(fā)光的膜,室溫孵育5 - 10分鐘。

3. 棄去去除液,用 PBS 洗滌 10 分鐘兩次。

4. TBST洗滌5分鐘?捎糜诮酉聛(lái)的封閉、孵育。

二、注意事項(xiàng)

1. 如使用辣根過(guò)氧化物酶(HRP),封閉時(shí)應(yīng)當(dāng)使用脫脂奶粉或BSA,如使用堿性磷酸酯酶,封閉時(shí)應(yīng)當(dāng)使用酪蛋白。

2. 為取得最佳效果,推薦使用PVDF膜。但硝酸纖維素膜也可以使用本W(wǎng)estern一抗二抗去除液。

3. 本產(chǎn)品適用于使用ECL或類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western Blot檢測(cè)。使用非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western Blot檢測(cè),例如DAB、NBT/BCIP等,則不適用于本產(chǎn)品。

4. 本W(wǎng)estern一抗二抗去除液有輕微腐蝕性,使用時(shí)請(qǐng)注意防護(hù)。

5. 對(duì)于特定的抗原和抗體,很難說(shuō)哪一種Western Blot一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳時(shí),可以考慮適當(dāng)延長(zhǎng)一抗二抗去除液的孵育時(shí)間,同時(shí)確保孵育時(shí)的溫度不低于20℃。溫度過(guò)低時(shí)一抗二抗的去除效果會(huì)下降。同時(shí)也可以考慮嘗試其它的一抗二抗去除液,以摸索出最佳的適合您實(shí)驗(yàn)條件的Western Blot一抗二抗去除液。

6. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿戴實(shí)驗(yàn)防護(hù)服、手套、口罩等必要的防護(hù)裝備。

三、產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

目錄號(hào)

規(guī)格

目錄價(jià)

Western Blot一抗二抗去除液(酸性)

WB026

250ml

180

Western Blot一抗二抗去除液(中性)

WB0261

250ml

250

來(lái)源:杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司
聯(lián)系電話:4006721600
E-mail:network@liankebio.com

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