雙螺旋基因：教你怎樣快速鑒別溫和氣單胞菌與嗜水氣單胞菌

今天給大家介紹氣單胞菌屬的另一個(gè)具有運(yùn)動(dòng)性的細(xì)菌——溫和氣單胞菌（Aeromonas sobria，As）

溫和氣單胞菌的生長特性

溫和氣單胞菌屬于弧菌科，產(chǎn)氣單胞屬，革蘭氏陰性菌，菌體呈短桿狀，單側(cè)有鞭毛，具有運(yùn)動(dòng)性，無莢膜，無芽孢。在普通瓊脂培養(yǎng)基生長良好，菌落呈白色和淺黃色半透明的圓形，邊緣整齊，中央有凸起，表面光滑，在血瓊脂上產(chǎn)生β溶血。

溫和氣單胞菌的致病性

與嗜水氣單胞菌一樣，溫和氣單胞菌同樣分布廣泛，存在于淡水、污水、土壤，人的食物鏈中、供水系統(tǒng)中，可致使人、畜禽、魚、甚至兩棲類、爬行類動(dòng)物患病，同樣是是人—畜—魚共患病病原。溫和氣單胞菌可是一點(diǎn)都不溫和哦，致病能力比嗜水氣單胞菌還要強(qiáng)，主要的毒力因子有溶血素、氣溶素、細(xì)胞毒性腸毒素、脂酶和蛋白酶等外毒素。感染人類可導(dǎo)致的常見疾病有劇烈水樣腹瀉或慢性腹瀉（持續(xù)10天或以上）、蜂窩性組織炎、敗血癥等，非常見疾病有肌肉溶解、出現(xiàn)壞疽、腹膜炎、敗血癥肺炎、膽囊炎和骨髓炎等；溫和氣單胞菌常與嗜水氣單胞菌混合感染魚類，出現(xiàn)內(nèi)臟器官水腫、組織出血、潰爛等癥狀，往往給養(yǎng)殖業(yè)帶來慘重的損失。

鑒別嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的方法

主要有微生物培養(yǎng)法、免疫學(xué)法和分子生物學(xué)方法：

微生物培養(yǎng)法，采用選擇性培養(yǎng)基鑒定培養(yǎng)法和生化試驗(yàn)鑒定法；通過不同的生化反應(yīng)可以鑒別兩者；

免疫學(xué)方法主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、單克隆抗體—膠體金檢測(cè)法等；

分子生物學(xué)方法有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)、多重PCR法、基因測(cè)序和分子標(biāo)記等方法；雙重PCR或多重PCR法，利用16sRNA和毒力基因，如甘油磷脂膽固醇�；�轉(zhuǎn)移酶基因、氣溶素基因、溶血素基因、細(xì)胞毒性腸毒素基因、熱不穩(wěn)定性細(xì)胞興奮性腸毒素基因、熱穩(wěn)定性細(xì)胞興奮性腸毒素基因，兩種或兩種以上的基因進(jìn)行擴(kuò)增，可以鑒別嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌。

以上方法各有特點(diǎn)，但在實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用中，表現(xiàn)出檢測(cè)時(shí)間長、操作步驟多、準(zhǔn)確率低、敏感性和特異性不足等。

小編為大家介紹一種分子生物學(xué)方法中的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法（Loop-mediated isothermal amplification,LAMP），該技術(shù)根據(jù)靶基因的6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)4種特異性引物，利用一種鏈置換DNA聚合酶，持續(xù)恒溫60~65℃保持45~60min，即可完成擴(kuò)增。首次成功應(yīng)用LAMP法擴(kuò)增的水產(chǎn)動(dòng)物病原菌是遲緩愛德華氏菌，目前環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)已成功應(yīng)用于檢測(cè)多種氣單胞菌，利用LAMP法能快速、便捷、準(zhǔn)確有效地鑒別嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌，且無需專業(yè)背景技術(shù)人員和昂貴分子檢測(cè)儀器，為基層臨床診斷提供技術(shù)支持，同時(shí)能作為大量樣品的篩查方法和結(jié)果的初篩判斷。

目前，廣州雙螺旋基因技術(shù)有限公司推出的ZYD-S1恒溫?zé)晒夥肿訖z測(cè)儀，配套使用有嗜水氣單胞菌和溫和氣單胞菌的恒溫?zé)晒鈾z測(cè)試劑，其優(yōu)點(diǎn)是操作步驟少、簡(jiǎn)單，擴(kuò)增速度快，用時(shí)短，結(jié)果精準(zhǔn)、直觀。