激光全息細胞成像及分析系統(tǒng)應(yīng)用于乳腺癌的遷移運動分析

近年來，我國乳腺癌的發(fā)病率呈持續(xù)增高的趨勢，在某些發(fā)達城市，乳腺癌在女性惡性腫瘤中已位居首位，根據(jù)雌激素受體的ER的類型是呈現(xiàn)激素非依賴性和依賴性，研究ER對乳腺癌的發(fā)病機制，臨床治療和預(yù)后判斷，有著重要的意義。

ER是乳腺癌重要的生物學(xué)標志物，在乳腺的發(fā)育生長過程中受體內(nèi)雌激素和孕激素的調(diào)控，ER是乳腺細胞中的雌激素受體，癌癥發(fā)生時，對于陽性ER的患者可以通過內(nèi)分泌的治療達到70-80%的效果，而對于陰性ER患者的治療效果還不到10%，表明陰性ER患者已經(jīng)完全脫離激素的調(diào)控。本研究中，主要對陰性ER乳腺癌細胞侵入淋巴細胞探究ERα對乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移過程中的相關(guān)關(guān)系，

實驗材料：

以MCF-7乳腺癌細胞株為實驗材料，使用基因編輯技術(shù)處理后的Cas9-ERα,基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑MG6001處理的后的Cas9-ERα+ERα,以及 Cas9-vinculin，使用瑞典的HoloMonitor M4進行拍攝細胞的運動和遷移，觀察4小時，每2min拍攝一次。對比不同實驗組的細胞遷移運動情況。

實驗結(jié)果,對比于對照組發(fā)現(xiàn)Cas9-ERα的細胞遷移性明顯增高，并分別捕捉到細胞變形過程中的五種不同形態(tài)，（文章補充材料中1-5movie）。并且在Cas9-ERa+MG6001該實驗組中金屬蛋白酶抑制劑并沒有能抑制細胞缺少ERα后的高侵襲性。并分析了五種不同形態(tài)的細胞百分比。Cas9-vinculin的細胞遷移及細胞運動速率同樣明顯高于對照組，同時也觀察到可細胞變形過程中的五種不同形態(tài)，（文章補充材料中6-10movie）。綜合文章數(shù)據(jù)表明了在乳腺癌細胞中，ERα的缺失會導(dǎo)致黏著斑蛋白（Vinculin）的表達量下降會直接導(dǎo)致細胞內(nèi)的肌球蛋白輕鏈p-MLC的增加，從而導(dǎo)致細胞的侵襲性增加。

HoloMonitor M4 非標記，活細胞成像及分析系統(tǒng)，實時追蹤細胞的運動過程及分析細胞運動軌跡和運動速率，實時高效地提供給科研工作者更多數(shù)據(jù)及分析結(jié)果