生物化學(xué)發(fā)光測量儀原理，作用和特點

再論生物化學(xué)發(fā)光測量儀原理，作用和特點

生物化學(xué)發(fā)光測量儀的化學(xué)發(fā)光作為一種分析工具的吸引之處就在于檢測的簡單性�；瘜W(xué)發(fā)光的實質(zhì)是自身發(fā)光，這意味著化學(xué)發(fā)光的分析測試儀器只需要提供一種可以檢測光信號和紀(jì)錄結(jié)果的方法就可以了。自發(fā)光檢測儀需要一個閉光的樣品室和光檢測器。最簡單的便是相片紙或X 光片，甚至視覺檢測器都可以。

化學(xué)發(fā)光檢測方法的簡單性使得它的應(yīng)用很簡單并且完全可以自動化。但是它的靈敏度又是怎么樣的呢？化學(xué)發(fā)光有如下兩個內(nèi)在的優(yōu)勢：

1.絕大多數(shù)的樣品沒有“背景”信號，如它們自身不發(fā)光。

2.化學(xué)發(fā)光的檢測不是一個比例測試，這是與熒光和吸收或比色測試不同的。在熒光測試中，具有小的Stokes Shift的熒光基團(tuán)非常難檢測。熒光很難從激發(fā)波長中分辨出來。 另外一個問題是，特別在樣品是渾濁的情況下有一部分雜光會進(jìn)入到檢測器。

在吸收光測試上，其靈敏度受到限制的根本因素是需要在兩個相對較強(qiáng)的信號之間去區(qū)分一個較小的差別。

需要注意的是檢測器對光譜的敏感性近可能接近化學(xué)發(fā)光的光譜，以得到最大化的靈敏度。一般在自發(fā)光儀中的光電倍增管對藍(lán)光有最佳的反應(yīng)，對紅光的末端光譜不太敏感。固態(tài)檢測器對紅光有較好的反應(yīng)。

X 光片廣泛用于記錄在尼龍膜、纖維素膜或PVDF 膜上的化學(xué)發(fā)光印跡分析。但是我們需要牢記在心的是X 光片僅能夠用于檢測紫外到藍(lán)光光譜范圍內(nèi)的光信號，雖然有一些特殊的光片對增強(qiáng)的綠光有敏感性。

生物化學(xué)發(fā)光測量儀液體樣品的檢測

有一些特定的詞來描繪化學(xué)發(fā)光檢測：靈敏度、線性和動態(tài)范圍。每一個詞的意義如下：

1.靈敏度指的是某種東西可靠檢測的最低水平。“某種東西”是指在一個分析測試中的測試物。測試物是被標(biāo)記了一種可檢測的東西，如化學(xué)發(fā)光化合物或的一種酶。分析物也可以是一種通過與具有標(biāo)記的親合物有特異性結(jié)合反應(yīng)而檢測的物質(zhì)。所謂的可靠檢測指的是針對一個空白測試樣品，檢測器能夠重復(fù)感應(yīng)到最低水平的信號，而這種信號是由所檢測物本身產(chǎn)生的。

2.線性描述的是信號與分析檢測物濃度范圍之間的關(guān)系。理想的比例因子是常數(shù)；信號點與分析檢測物是一條直線關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)曲線可以不是直線，如s 形，仍是有用的。

3.動態(tài)范圍指的是被檢測物濃度與信號單一模式的變換范圍。它定義的是分析的工作范圍。

通過生物化學(xué)發(fā)光測量儀的化學(xué)發(fā)光得到什么水平的靈敏度呢？答案不一定會滿足你的要求，“它是有條件的”。在很少情況下，檢測器的靈敏度或化學(xué)發(fā)光方法會是檢測的局限因素�，F(xiàn)在的檢測器可以達(dá)到很高的靈敏度。大多數(shù)情況下，而是其它的一些因素顯示了分析檢測的靈敏度。最通常的是生物成分（抗體、酶等）的非特異性結(jié)合到反應(yīng)容器和支持物的表面。例如，免疫分析，印跡實驗，核酸雜交和其它的酶聯(lián)結(jié)合實驗都是受制于此因素。