SEA鏈交換擴(kuò)增技術(shù)檢測單增李斯特菌的性能指標(biāo)

基于變性泡介導(dǎo)的鏈交換擴(kuò)增技術(shù)（Strand Exchange Amplification, SEA）是我公司自主知識產(chǎn)權(quán)的新一代等溫核酸檢測技術(shù)，具有簡單、快捷、經(jīng)濟(jì)、高特異性、高靈敏度，高擴(kuò)展性等特點，在醫(yī)療健康、食品安全、檢驗檢疫、環(huán)境監(jiān)測、動物疫病等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。

單核增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）是一種常見的土壤細(xì)菌，在土壤中它是一種腐生菌，以死亡的和正在腐爛的有機(jī)物為食。它也是某些食物（主要是鮮奶產(chǎn)品）中的一種污染物，能引起嚴(yán)重食物中毒。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病，感染后主要表現(xiàn)為敗血癥、腦膜炎和單核細(xì)胞增多，嚴(yán)重威脅人類的健康，因此單增李斯特菌在食品中的檢測尤為重要。

應(yīng)用SEA技術(shù)以單增李斯特菌為研究對象，本團(tuán)隊開發(fā)了檢測單增的核酸快速檢測試劑盒，并將研究結(jié)果發(fā)表在Anal,Biochem.2018, 545: 38-42 ，結(jié)果表明具有產(chǎn)品較高的特異性，檢測限可以達(dá)到1.0 × 10^-14 M，重復(fù)性好，可以商品化使用。

特異性和抗干擾能力

A: SEA方法的特異性。1-6分別表示的是：以單核細(xì)胞增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門氏菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌和大腸桿菌O157：H7的增菌液為基礎(chǔ)，稀釋1000倍后為擴(kuò)增靶標(biāo)；7表示NTC。

B: SEA方法的抗干擾能力。1ˊ 表示靶標(biāo)為稀釋1000倍的單核細(xì)胞增生李斯特菌的增菌液；2ˊ 表示靶標(biāo)為增菌液的混合物，即單核細(xì)胞增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門氏菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌和大腸桿菌O157：H7的增菌液稀釋1000倍后，按1:1:1:1:1:1的比例混合。3ˊ 表示NTC。

檢測限和重復(fù)性

A: 不同濃度的單核細(xì)胞增生李斯特菌基因組DNA的實時熒光曲線。1-5分別表示為1.0 × 10^-10至1.0 × 10^-14 M，稀釋10倍，6表示NTC。

B: T_t值與基因組DNA靶標(biāo)量（C_LM）的負(fù)對數(shù)值之間的關(guān)系。誤差棒顯示三次測定的平均標(biāo)準(zhǔn)偏差。

C: 使用PAGE電泳觀察相應(yīng)的SEA反應(yīng)產(chǎn)物。

除此之外，我公司在食品安全領(lǐng)域其他致病菌，如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157：H7、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌等均有系列核酸檢測試劑盒，產(chǎn)品在多省市食藥監(jiān)局盲樣抽檢中表現(xiàn)優(yōu)異，已和國內(nèi)知名食品企業(yè)簽訂戰(zhàn)略合作協(xié)議，獲得良好的客戶反應(yīng)度，歡迎廣大客戶及經(jīng)銷商采購。