HPTLC硅膠板實(shí)用問答

樂研化學(xué)薄層層析硅膠板適用于醫(yī)藥，化工，生化，環(huán)保等系統(tǒng)的科研和檢測(cè)；對(duì)于某些微量以及成分復(fù)雜的化合物有很好的分離效果，適用于定性和半定量分析。

相信很多人，還是對(duì)這方面有些疑問的，小編搜集了一些常見的問題及答案，供大家參考哦！

1、點(diǎn)樣是成功分離的關(guān)鍵，怎樣提高點(diǎn)樣效率？
（1）點(diǎn)樣圓點(diǎn)小而圓，直徑盡量不要超過2mm；
（2）在便于顯色的前提下，點(diǎn)樣量盡量少，同時(shí)就要注意點(diǎn)樣液體的濃度，防止過載拖尾；（3）點(diǎn)樣勿上薄層表面；
（4）點(diǎn)樣圓點(diǎn)盡量遠(yuǎn)離薄層邊緣，至少相隔3mm，減少邊緣效應(yīng)；
（5）所有點(diǎn)樣點(diǎn)盡量保持在一條與底邊平行的直線上，務(wù)必點(diǎn)交叉點(diǎn)；
（6）點(diǎn)樣完成后，溶劑用吹風(fēng)機(jī)盡量吹干。
2、兩個(gè)點(diǎn)離的太近怎么辦？
（1）在展開劑中多次展多次；
（2）增加展開劑的極性；
（3）選擇不同體系的展開劑展開。
3、TLC顯示一個(gè)點(diǎn)，是代表只有一個(gè)化合物嗎？
TLC點(diǎn)板顯示一個(gè)點(diǎn)，有可能是只有一個(gè)化合物，但也有特殊情況，一個(gè)點(diǎn)里面包含大于1個(gè)的化合物，這種情況我們可以選擇不同混合體系的展開劑看是否能分開，同時(shí)結(jié)合LCMS和核磁判斷。
4、板展開后，溶劑前沿的點(diǎn)是一個(gè)點(diǎn)嗎？原點(diǎn)上的點(diǎn)是一個(gè)點(diǎn)嗎？
前沿和原點(diǎn)的都不能確定是幾個(gè)點(diǎn)，要靠變換展開劑的極性，讓這些點(diǎn)爬到Rf=0.3-0.5左右來確定到底是幾個(gè)點(diǎn)。
5、TLC爬板為什么有時(shí)會(huì)爬歪?
（1）可能是板子沒有放平；
（2）可能是板子一邊貼到展缸壁，造成了虹吸現(xiàn)象，一邊爬的快，一邊慢，擴(kuò)散后就變歪了。6、如果化合物有酸堿基團(tuán)我們需要如何處理？
若樣品酸性比較大，一般在展開劑中加酸（0.1%-0.5%甲酸，乙酸）；
若樣品堿性比較大，一般在展開劑中加堿（0.1%-0.5%氨水，三乙胺）。
7、TLC為什么會(huì)拖尾？拖尾現(xiàn)象如何處理？
（1）樣品溶度過大，TLC板過載，這種情況通過降低樣品溶度或者上樣量驗(yàn)證；
（2）樣品未完全溶解，TLC板上有未溶的固體樣品，點(diǎn)板一定要是溶液形式；
（3）TLC板吸潮，放烘箱110oC活化30分鐘即可；
（4）樣品為強(qiáng)極性物質(zhì)，含有氨基或者羧基等極性官能團(tuán)，可以在展開劑中加入酸或者堿；（5）硅膠板在出廠是不合格，聯(lián)系售后，及時(shí)退換貨。
8、點(diǎn)板時(shí)，基點(diǎn)總有黑點(diǎn)的原因？
（1）產(chǎn)物或者副產(chǎn)物極性太大，如鹽類，這種情況，可以調(diào)pH后再點(diǎn)板；
（2）可以將化合物預(yù)處理下，除去那些不溶性的無機(jī)物，這樣可能會(huì)不一樣，點(diǎn)板會(huì)變得清晰。
9、有強(qiáng)酸或者強(qiáng)堿的反應(yīng)體系TLC跟蹤反應(yīng)需注意那些方面？
TLC跟蹤強(qiáng)酸或強(qiáng)堿反應(yīng)體系，最好先中和樣品的酸堿性再點(diǎn)板。一般強(qiáng)酸堿的產(chǎn)物極性比較大，注意選擇合適的展開劑。
10、水體系，TLC如何跟蹤反應(yīng)？
（1）待檢測(cè)化合物在不溶于水的有機(jī)溶劑溶解度大于水，可以用有機(jī)溶劑萃取，點(diǎn)有機(jī)相；（2）直接點(diǎn)樣，吹干后再展開。
11、反應(yīng)有固體或者兩相反應(yīng)時(shí)，TLC跟蹤反應(yīng)如何處理？
（1）反應(yīng)中有固體需要找合適的溶劑將固體溶解，體系澄清后點(diǎn)板；
（2）選擇一種溶劑既溶于水又溶于有機(jī)溶劑，兩相消失再點(diǎn)板，常用溶劑是甲醇。
12、用10%硫酸/乙醇溶液顯色，烤板為什么變糊？如何處理？
薄層板的粘合劑是羧甲基纖維素鈉，當(dāng)烘烤溫度超過100度，濃硫酸就會(huì)把羧甲基纖維素鈉碳化，變黑，所以我們?cè)谟糜袧饬蛩岬娘@色劑時(shí)，烤板顯色的要注意烤板溫度，實(shí)際應(yīng)用中用電吹風(fēng)就能顯色，也要控制時(shí)間，時(shí)間不能過長(zhǎng)。
13、如何提高PTLC展開效率？
（1）溶解樣品的溶劑極性要小，溶解性好；
（2）上樣的色帶要齊且不能太寬；
（3）展開之前要將溶劑吹干；
（4）所有展開劑極性較小板時(shí)略大。
14、如何確認(rèn)PTLC上樣量？
以20cm*20cm*1mm規(guī)格為例：若上樣帶寬是0.5cm，板兩邊空出0.5cm邊際,其中1mm厚的硅膠板負(fù)載量不要超過5mg/cm3，上樣量約為0.5*19*5=47.5mg，以此類推。
15、PTLC如何確認(rèn)疑似色帶？
（1）在制備板上點(diǎn)小樣對(duì)照點(diǎn)，展開后對(duì)比小樣，作為輔助判斷；
（2）展開后刮取少量硅膠與對(duì)照點(diǎn)展小板判斷。
16、樣品在紫外沒有吸收，如何通過PTLC進(jìn)行分離？
樣品展開完成后，用玻璃刀劃取一小整塊，用顯色劑顯色，找出目標(biāo)樣品，對(duì)照制備板，勾出相應(yīng)的位置，刮板、洗脫、過濾、旋干即可。
17、PTLC過程中如何減少產(chǎn)品損失？
制備板的上樣量40-60mg，產(chǎn)品吸附在硅膠上，分離后將硅膠刮出，產(chǎn)品用洗脫劑從硅膠上洗脫出來，為了減少產(chǎn)品的損失，
需要注意的是：
（1）將硅膠碾壓成細(xì)粉末，增加在溶劑中的接觸面積；
（2）常用的洗脫劑體系是二氯甲烷/甲醇，比例不要超過10/1，否則硅膠上的一些物質(zhì)會(huì)溶于其中；
（3）硅膠在溶劑中充分?jǐn)嚢�，超聲，過濾后，濾餅再用洗脫劑多洗滌幾次，這樣損失就會(huì)很少了。
18、如何利用TLC摸索最佳柱層析條件？
TLC的一個(gè)重要作用就是為柱層析選擇合適的洗脫體系和合適的洗脫比例，柱層析洗脫劑配制后用TLC驗(yàn)證Rf值，將需要的斑點(diǎn)Rf值調(diào)至0.2左右，梯度洗脫。
19、TLC為何與LCMS、MS、1H-NMR結(jié)合應(yīng)用？
（1）TLC-LCMS聯(lián)用，可以確認(rèn)純度；
（2）TLC-Ms聯(lián)用，一般情況下，可以確認(rèn)目標(biāo)產(chǎn)物，適用于得到標(biāo)樣點(diǎn)；
（3）TLC-NMR聯(lián)用，可以確認(rèn)點(diǎn)的結(jié)構(gòu)。