脫鹽換液首選填料：Bestdex G-25系列葡聚糖凝膠的介紹及應用案例
說到分子篩，大家肯定都不陌生。分子篩又叫做凝膠過濾層析、空間排阻色譜等，是應用蛋白質(zhì)分子量或分子形狀的差異去進行分離的一項蛋白純化技術(shù)。通俗地說，該技術(shù)就是像篩子一樣，將分子依據(jù)“高矮胖瘦”進行分離。
這項技術(shù)使用的填料，是一類多孔性天然來源的聚合物材料。在層析過程中，直徑大于凝膠網(wǎng)孔的生物分子，只能沿凝膠顆粒間的空隙隨溶劑流動，流程短，移動速度快，首先被洗脫；中等大小的分子，可以在凝膠顆粒內(nèi)外分布，部分進入顆粒，因此在大分子物質(zhì)和小分子物質(zhì)之間被洗脫；直徑小于凝膠凝膠網(wǎng)孔的生物分子，可以自由進出網(wǎng)孔，移動速率慢而最后被洗脫。
Fig. 1 凝膠層析原理圖
凝膠過濾主要應用于兩類分離領(lǐng)域：
• 組分分離（脫鹽/換液）：上樣量可達柱體積的30%。
• 精細分離（分離不同大小分子量的生物分子）：上樣體積為0.5%~4%，柱床高度通常高于60cm。
博格隆Bestdex G-25系列產(chǎn)品是以葡聚糖為基架材料制成的凝膠過濾介質(zhì)，具有親水、多孔的特性。
根據(jù)顆粒大小，博格隆Bestdex G-25系列推出了四種類型的產(chǎn)品：Bestdex G-25 C（Coarse，粗）、Bestdex G-25 M（Medium，中）、Bestdex G-25 F（Fine，細）、Bestdex G-25 SF（Superfine，超細）。
+顆粒大小呈正態(tài)分布，在該范圍內(nèi)的顆粒占總數(shù)的80%以上
++不同溶液中顆粒大小會有差異，本數(shù)據(jù)為在PBS中顆粒大小
+++BXK26/70，柱高60cm，壓力0.3MPa測得
Fig. 2 博格隆Bestdex G-25系列
Bestdex G-25系列產(chǎn)品的主要特點
• 非吸附層析：靠分子量大小差異實現(xiàn)分離，無吸附與解吸附過程，樣品回收率高。
• 操作條件溫和：能夠在相當廣的溫度范圍內(nèi)進行操作。
• 僅需一種緩沖液：全程僅需一種緩沖液即可完成實驗，操作簡單。
Bestdex G-25系列產(chǎn)品的應用領(lǐng)域
Bestdex G-25系列凝膠過濾介質(zhì)通過分子篩效應，實現(xiàn)樣品的分離純化。常用于蛋白質(zhì)、多糖、核酸等生物樣品的緩沖液置換、脫鹽和去除小分子物質(zhì)，也可以用于多肽、寡核苷酸的分離純化，以及抗生素、化學合成藥物、天然產(chǎn)物的分離純化，還可用于化工中納米材料的提純以及環(huán)保領(lǐng)域的污水處理等領(lǐng)域。
實際應用案例——緩沖液置換
• 層析柱：EzFast 5mL G-25 F x 2
• 平衡液：0.2M NaHCO3、0.5M NaCl，pH8.3
• 上樣體積：1.9mL
Fig. 3 Bestdex G-25 凝膠層析圖譜
- 使用方法
由于介質(zhì)是以干粉的方式提供的，所以需要先溶脹，然后裝填層析柱后使用。
- 緩沖液選擇
一般選用水相緩沖液，緩沖液的pH和電導對于分離的效果影響不大，主要考慮樣品在緩沖液中的穩(wěn)定性。
- 流速
以推薦的流速運行，柱高越大流速越慢。
- 樣品準備
為防止樣品堵塞柱子，在上樣前樣品需要用0.45μm的微孔濾膜過濾，若目的物和雜質(zhì)差別比較小，上樣體積按照柱體積的1%~5%上樣；若目的物和要去除的雜質(zhì)差別比較大（如去除樣品中的無機鹽或緩沖液交換），上樣體積按照柱體積的10%~25%上樣。
