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單細(xì)胞分離與孔板成像組合的高效細(xì)胞株開發(fā)流程

瀏覽次數(shù):1631 發(fā)布日期:2020-6-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

 

細(xì)胞活率低?實(shí)驗(yàn)效率低?新方式助力細(xì)胞株開發(fā)

 

在生物藥物分子?(如抗體)?的生產(chǎn)過程中細(xì)胞株開發(fā)及單克隆性確認(rèn)是非常關(guān)鍵的步驟。細(xì)胞株開發(fā)起于將表達(dá)目的蛋白的基因轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞。通過分離高效表達(dá)目的蛋白的單個(gè)活細(xì)胞即可建立細(xì)胞株。在這個(gè)過程中,單克隆性的記錄至關(guān)重要,用于確保細(xì)胞株的基因重現(xiàn)性。隨后的步驟涉及細(xì)胞克隆的產(chǎn)量、質(zhì)量和穩(wěn)定性的表征?(如下圖)。

 

細(xì)胞株開發(fā)的典型工作流程

當(dāng)前細(xì)胞株開發(fā)的工作流程有一些局限,如低細(xì)胞活率、低效的單細(xì)胞分離以及有限的單克隆性證據(jù)。有限稀釋,一種傳統(tǒng)分離單細(xì)胞的方法,依賴于統(tǒng)計(jì)概率,無法提供單克隆性的可視化證據(jù)。此外,該技術(shù)的效率非常低,最終導(dǎo)致每塊微孔板上可供篩選的克隆非常少。

 

CloneSelectTM高通量單細(xì)胞分離系統(tǒng)是一個(gè)新穎的臺式設(shè)備用于柔和精確地從液體樣品中分離出單個(gè)活細(xì)胞。單細(xì)胞分離系統(tǒng)采用微流控分離槽以精確地分離單個(gè)細(xì)胞,同時(shí)最小化分離不同細(xì)胞可能帶來的交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。當(dāng)單細(xì)胞分離系統(tǒng)與?CloneSelectTMImager?(CSI)?細(xì)胞生長分析系統(tǒng)的快速成像技術(shù)配合,可以顯著提高細(xì)胞株開發(fā)流程的效率。

 

CloneSelectTM單細(xì)胞分離系統(tǒng)的技術(shù)原理

 

本篇應(yīng)用文章我們將介紹結(jié)合單細(xì)胞接種和單克隆性驗(yàn)證的工作流程。我們利用單細(xì)胞分離系統(tǒng)和CSI接種單細(xì)胞至微孔板,然后確認(rèn)這些細(xì)胞的存在并記錄他們在隨后幾天里的生長過程。最后,我們將介紹如何生成包含單克隆性證據(jù)的文件用于提交監(jiān)管機(jī)構(gòu)審批。

 

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來源:美谷分子儀器(上海)有限公司
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