Countstar Rigel 熒光細(xì)胞分析儀在干細(xì)胞研究領(lǐng)域中的應(yīng)用

一、干細(xì)胞的分類
干細(xì)胞（stem cell）是一類具有多向分化潛能和自我復(fù)制能力的原始的未分化細(xì)胞，是形成哺乳類動物的各組織器官的原始細(xì)胞。根據(jù)其分化潛能，可以分為：
①全能干細(xì)胞：可分化成人體的各種細(xì)胞，從而組成各種組織和器官，最終發(fā)育成為一個完整的生物體（受精卵）；
②亞全能干細(xì)胞：是人體發(fā)育過程中存留于多種組織中的，其分化能力接近于全能的成體干細(xì)胞；
③多能干細(xì)胞：具有分化多種組織的潛能，但失去了發(fā)育完整個體的能力（間充質(zhì)干細(xì)胞）；
④專能干細(xì)胞：由多能干細(xì)胞分化而來，只能向一種類型的細(xì)胞分化（肝臟干細(xì)胞等）。

圖1.干細(xì)胞圖片（摘自網(wǎng)絡(luò)）

二、干細(xì)胞的特性
    ①自我更新：
    干細(xì)胞可以通過自我復(fù)制，產(chǎn)生與親本完全相同的子代細(xì)胞，以保持干細(xì)胞數(shù)量的恒定，可通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和大�。�
    ②多向分化：
    干細(xì)胞在一定條件下可以進(jìn)入分化程序，可進(jìn)一步多向（或定向）分化為逐步成熟的次級子代細(xì)胞，最終形成功能特異的組織細(xì)胞，在組織修復(fù)和新陳代謝中起重要作用；
    ③自動歸巢：
    干細(xì)胞在體內(nèi)定向遷移至特定的組織部位，在不同環(huán)境的誘導(dǎo)下，依賴性地分化為特定的組織細(xì)胞；
    ④免疫原性低：
    臍帶、胎盤來源的干細(xì)胞表面抗原不明顯，免疫原性低，不存在免疫排斥的特性。

三、干細(xì)胞治療的原理
   ①替代修復(fù)死亡和受損的細(xì)胞；
   ②激活休眠和處于抑制狀態(tài)的細(xì)胞；
   ③旁分泌作用（分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子、抗凋亡因子等）；
   ④促進(jìn)細(xì)胞間電能力、電傳導(dǎo)的恢復(fù)，如間充質(zhì)干細(xì)胞分泌連接蛋白幫組細(xì)胞間連結(jié)、促進(jìn)離子通道的開放等。

四、干細(xì)胞移植的優(yōu)點(diǎn)

• 高效性，療效肯定；
• 靶向性強(qiáng)，具有DC導(dǎo)航系統(tǒng)；
• 具有安全性，無排斥反應(yīng)，安全性高，副作用�。�
• 取材方便，治療方法簡便，痛苦性�。�
• 細(xì)胞治療的供體可以是自體，也可以是異體；
• 細(xì)胞治療為疑難雜癥的治療帶來新的希望。

五、干細(xì)胞制劑的制備工藝流程
 

六、干細(xì)胞企業(yè)質(zhì)量控制策略（MSC）

七、Countstar Rigel S2在干細(xì)胞研究過程中的應(yīng)用

• 干細(xì)胞濃度和活率的檢測

無論是對臍帶血樣本進(jìn)行檢測以篩選單核細(xì)胞，還是對純化培養(yǎng)的干細(xì)胞，又或者是檢測凍存復(fù)蘇的干細(xì)胞制品，Rigel 都可以排除雜質(zhì)干擾，進(jìn)行穩(wěn)定準(zhǔn)確的判斷。

圖2. A.明場圖片；B.Rigel 熒光圖片

• 干細(xì)胞運(yùn)輸前后的活率檢測

Countstar Rigel可以對干細(xì)胞運(yùn)輸前后進(jìn)行活率的精準(zhǔn)計(jì)數(shù)，傳統(tǒng)方法臺盼藍(lán)計(jì)數(shù)對運(yùn)輸后狀態(tài)不佳的細(xì)胞活率無法精確檢測，Rigel可以很好地解決這個問題。

圖3. 脂肪干細(xì)胞運(yùn)輸前后活率檢測

• 干細(xì)胞純度及均一性檢測

干細(xì)胞治療中，要保證干細(xì)胞的純度，排除免疫細(xì)胞等的干擾，可以通過Rigel對干細(xì)胞表面的Marker進(jìn)行檢測。同時為了保證干細(xì)胞的均一性，可以用Rigel對干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)進(jìn)行檢測。干細(xì)胞隨著傳代次數(shù)和運(yùn)輸，會發(fā)生形態(tài)學(xué)的變化，如直徑結(jié)團(tuán)率等。Rigel可以通過檢測干細(xì)胞表面相關(guān)Marker，堅(jiān)定干細(xì)胞的純度。

圖4. A.干細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化  B.Marker CD105檢測及分析（Rigel 拍攝）

• 干細(xì)胞入庫檢和放行檢的表型分析

根據(jù)國際細(xì)胞治療協(xié)會（ISCT）提出的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）標(biāo)志物，MSC的常用陽性指標(biāo)是CD73、CD90、CD105，陰性指標(biāo)是CD45、CD34、CD14、CD11b、CD19等。Countstar Rigel 可以對CD90、CD105、CD45、CD34等多個指標(biāo)進(jìn)行檢測并用類流式軟件FSC軟件進(jìn)行分析。

圖5. A. FSC軟件分析結(jié)果  B.Rigel 所攝圖片

• Countstar Rigel滿足干細(xì)胞研發(fā)-臨床-生產(chǎn)的多重需要和保持?jǐn)?shù)據(jù)一致性

• Countstar Rigel在使用過程中也智能、精準(zhǔn)、合規(guī)。