采用活細(xì)胞分析系統(tǒng)最大限度地洞察細(xì)胞生長(zhǎng)

Overview
白皮書(shū)《采用活細(xì)胞分析系統(tǒng)最大限度地洞察細(xì)胞生長(zhǎng)》展示如何利用Incucyte系統(tǒng)的活細(xì)胞分析能力更快、更深入、更高通量地提供對(duì)生物學(xué)事件的新見(jiàn)解，從細(xì)胞凋亡、免疫細(xì)胞殺傷、神經(jīng)突生長(zhǎng)和吞噬作用，到3D 腫瘤球生長(zhǎng)和活性等各種應(yīng)用場(chǎng)景。

這為研究人員提供了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)新方法，用來(lái)解決之前無(wú)法解決的問(wèn)題�；罴�(xì)胞分析監(jiān)測(cè)細(xì)胞行為隨著時(shí)間的變化，增加了動(dòng)力學(xué)測(cè)量數(shù)據(jù)的潛力，而不再受單一時(shí)間點(diǎn)終點(diǎn)分析的影響，簡(jiǎn)化了各種應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)操作流程，包括細(xì)胞健康和活性、免疫學(xué)和免疫腫瘤學(xué)、細(xì)胞療法和神經(jīng)科學(xué)。

Incucyte® 活細(xì)胞分析系統(tǒng)

可以預(yù)見(jiàn)，隨著人工智能和機(jī)器學(xué)習(xí)能力的不斷增強(qiáng)，未來(lái)將有可能在細(xì)胞層面實(shí)現(xiàn)更深入的理解。使用活細(xì)胞分析系統(tǒng)，任何用戶都可以動(dòng)態(tài)地了解其細(xì)胞模型的健康、形態(tài)、運(yùn)動(dòng)和功能，并能夠實(shí)時(shí)、全天候地對(duì)細(xì)胞類(lèi)型特異性和時(shí)間依賴性的生物活動(dòng)進(jìn)行分析。至關(guān)重要的是，Incucyte獨(dú)特的技術(shù)結(jié)合細(xì)胞非干擾試劑，可確保細(xì)胞培養(yǎng)不受外界影響，并獲取高質(zhì)量的結(jié)果。

無(wú)標(biāo)記分析
- 相差成像

該方法最適合在2D模型中對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和形態(tài)進(jìn)行測(cè)量；Incucyte采用專(zhuān)有技術(shù)獲取高清的相差圖像，確保得到細(xì)胞增殖定量的可靠結(jié)果。   

- 明場(chǎng)成像

采用活細(xì)胞分析成像可直觀地監(jiān)測(cè)球體大小隨著時(shí)間的變化，而不會(huì)破壞組織培養(yǎng)物，并有助于了解有絲分裂過(guò)程中細(xì)胞生物量的積累。與2D 單層模型相比，這些3D 細(xì)胞模型更能代表和預(yù)測(cè)體內(nèi)條件，可提供更多體內(nèi)相關(guān)性和轉(zhuǎn)化性的觀察結(jié)果。

細(xì)胞熒光標(biāo)記
- 單獨(dú)細(xì)胞的標(biāo)記
熒光標(biāo)記可有力地驗(yàn)證之前所述的無(wú)標(biāo)記技術(shù)，反之亦然，無(wú)標(biāo)記技術(shù)對(duì)于確認(rèn)潛在的熒光探針是否對(duì)細(xì)胞無(wú)干擾，并優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。

- 混合培養(yǎng)物中的細(xì)胞標(biāo)記
活細(xì)胞ICC可用于識(shí)別混合培養(yǎng)中的特定細(xì)胞群，使人們對(duì)細(xì)胞過(guò)程（如細(xì)胞生長(zhǎng)）有更深入的了解。

- 復(fù)雜共培養(yǎng)
活細(xì)胞分析系統(tǒng)可以獲得比以往更多的細(xì)節(jié)，產(chǎn)生有價(jià)值的縱向數(shù)據(jù)，以了解細(xì)胞之間的相互作用和過(guò)程，例如免疫細(xì)胞激活和免疫細(xì)胞殺傷腫瘤。

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數(shù)據(jù)結(jié)果搶先看

無(wú)標(biāo)記細(xì)胞增殖的動(dòng)力學(xué)分析——將MDA-MB-231（A&B）或A549（C&D）細(xì)胞以不同密度接種在96孔板中，采集圖像，并用Incucyte®活細(xì)胞分析系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行分析，通過(guò)basic模塊分析計(jì)算匯合度（A&B）或cell-by-cell模塊分析計(jì)數(shù)細(xì)胞（C&D）。圖像顯示了匯合度mask（A）或cell-by-cell mask（C），曲線（B&D）顯示了細(xì)胞隨著時(shí)間變化的增殖情況。數(shù)據(jù)顯示為4個(gè)孔的均值± SEM。

3D 結(jié)構(gòu)的明場(chǎng)成像。示例顯示了MDA-MB-231 細(xì)胞形成的單球體明場(chǎng)圖像，A549 細(xì)胞作為多球體培養(yǎng)物接種在Matrigel™ 上，以及嵌入在Matrigel 膠滴中的小鼠胰腺類(lèi)器官。mask 以黃色顯示，以用來(lái)定量細(xì)胞增殖隨時(shí)間的變化。定量結(jié)果如曲線圖所示。

在共培養(yǎng)前熒光標(biāo)記細(xì)胞。將相同數(shù)量的AU565-Nuclight green 細(xì)胞和MDA-MB-231-Nuclight Near IR 細(xì)胞接種到96 孔板中，并用谷氨酰胺酶抑制劑CB-839（1 μM）處理。之前已經(jīng)證明三陰性細(xì)胞（例如MDA-MB-231）對(duì)這種化合物敏感。使用Incucyte 活細(xì)胞分析系統(tǒng)中，持續(xù)四天采集相差和熒光圖像。綠色和Near IR 熒光（A）的圖像顯示，在正常情況下，兩種細(xì)胞類(lèi)型均會(huì)增殖，而在CB-839 情況下，Near IR 細(xì)胞明顯減少。隨著時(shí)間進(jìn)展，AU565 細(xì)胞生長(zhǎng)受到極輕微的影響（B），而MDA-MB-231 細(xì)胞增殖明顯受到抑制（C）。此外還發(fā)現(xiàn)，與MDA-MB-231 細(xì)胞相比，AU565細(xì)胞生長(zhǎng)速率較慢。