ELISA酶標板分類方法
酶標板(ELISA PLATE):在酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中, 參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例；緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。酶標板分類：根據不同的分類標準，酶標板有著不同的分類。
一、根據孔數(shù)，可分為96孔、48孔等，由于酶標板主要是配合酶標儀用，目前市面上的酶標儀最多為96孔，因此酶標板最為常用的也是96孔。
二、根據其底部的不同，又分為平底的，u型底、v型底等。平底的折射率低，適于在酶標儀檢測；u型底的酶標板折射率較高，方便加樣、吸樣、混勻等操作，可以不用放在酶標儀上，直接通過目測觀察顏色變化情況，從而判定有無相應的免疫反應。v底的酶標板可以精確的吸取樣品。
三、根據酶標板與蛋白和其它分子結合能力的不同，又分為高結合力、中結合力和氨基化等。
(1）、 高結合力
此種酶標板，表面經處理后，其蛋白結合能力大大增強，可達300~400ng igg/cm2，主要結合的蛋白分子量＞10kd。使用該類酶標板可提高敏感性，并可相對減少包被蛋白的濃度和用量，不足之處為較易產生非特異性反應。抗原或抗體包被后，以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位，需使用蛋白作為封閉劑。
（2) 、中結合力
此類酶標板經表面疏水鍵被動與蛋白結合，適合作為分子量＞20kd的大分子蛋白的固相載體，其蛋白結合能力為200~300ng igg/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體，可降低潛在的非特異性交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。
（3) 、氨基化
這種酶標板經表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基，其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和ph值，其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結合的能力，可用于固定溶于triton-100、tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性，一部分蛋白分子無法結合；此外，其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性，使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團發(fā)生作用。
四、根據顏色可分為透明、黑色、白色。
透明的是最常用的，用于最一般的酶聯(lián)免疫實驗。相對于透明的的酶標板，還有用于發(fā)光檢測用的不透明的酶標板，一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標板自身會有光吸收，所以它的信號相對于白色酶標板要低很多，因此一般用于檢測較強的光，如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測，常用于一般的化學發(fā)光。另外黑色的酶標板還可以消弱非特異反應帶來的問題。同時需要注意的是，用一般的酶標板不可以進行發(fā)光檢測，因為一般從化學發(fā)光反應中發(fā)射出的光是各向同性，如果用透明的酶標板，光不僅會從垂直方向發(fā)散，還會從水平方向發(fā)散，使得光極易通過各個孔之間的間隙和孔壁，從而導致各孔的光吸收值受到相鄰孔發(fā)射光的影響。
一、根據孔數(shù)，可分為96孔、48孔等，由于酶標板主要是配合酶標儀用，目前市面上的酶標儀最多為96孔，因此酶標板最為常用的也是96孔。
二、根據其底部的不同，又分為平底的，u型底、v型底等。平底的折射率低，適于在酶標儀檢測；u型底的酶標板折射率較高，方便加樣、吸樣、混勻等操作，可以不用放在酶標儀上，直接通過目測觀察顏色變化情況，從而判定有無相應的免疫反應。v底的酶標板可以精確的吸取樣品。
三、根據酶標板與蛋白和其它分子結合能力的不同，又分為高結合力、中結合力和氨基化等。
(1）、 高結合力
此種酶標板，表面經處理后，其蛋白結合能力大大增強，可達300~400ng igg/cm2，主要結合的蛋白分子量＞10kd。使用該類酶標板可提高敏感性，并可相對減少包被蛋白的濃度和用量，不足之處為較易產生非特異性反應。抗原或抗體包被后，以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位，需使用蛋白作為封閉劑。
（2) 、中結合力
此類酶標板經表面疏水鍵被動與蛋白結合，適合作為分子量＞20kd的大分子蛋白的固相載體，其蛋白結合能力為200~300ng igg/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體，可降低潛在的非特異性交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。
（3) 、氨基化
這種酶標板經表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基，其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和ph值，其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結合的能力，可用于固定溶于triton-100、tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性，一部分蛋白分子無法結合；此外，其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性，使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團發(fā)生作用。
四、根據顏色可分為透明、黑色、白色。
透明的是最常用的，用于最一般的酶聯(lián)免疫實驗。相對于透明的的酶標板，還有用于發(fā)光檢測用的不透明的酶標板，一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標板自身會有光吸收，所以它的信號相對于白色酶標板要低很多，因此一般用于檢測較強的光，如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測，常用于一般的化學發(fā)光。另外黑色的酶標板還可以消弱非特異反應帶來的問題。同時需要注意的是，用一般的酶標板不可以進行發(fā)光檢測，因為一般從化學發(fā)光反應中發(fā)射出的光是各向同性，如果用透明的酶標板，光不僅會從垂直方向發(fā)散，還會從水平方向發(fā)散，使得光極易通過各個孔之間的間隙和孔壁，從而導致各孔的光吸收值受到相鄰孔發(fā)射光的影響。
