不同基因型HCV臨床意義及干擾素治療效果探討

       丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是造成慢性肝炎、肝硬化及肝癌的重要因為之一。在我國,HCV是僅次于乙型肝炎病毒(Hepatitis virus,HBV)引起慢性肝炎的因素。據(jù)WHO統(tǒng)計，全球丙肝炎病毒(HCV)感染率約為3%，全球約有1.7億～2億的感染者，且每年仍有300萬～450萬的新發(fā)病例，加之目前尚無安全有效的丙型病毒性肝炎疫苗 ，丙型病毒性肝炎感染例數(shù)將持續(xù)增，我國是世界上HCV感染率較高的國家之一，目前約有3800萬HCV感染者。丙型病毒性肝炎可引起肝臟慢性炎癥及纖化，最終可進(jìn)展為肝硬化甚至肝癌，嚴(yán)重威脅患者的生命健康。目前，干擾素仍是臨床上治療HCV感染的有效藥物受宿主和病毒等多種因素的影響干擾素治療對不同患者的效果差大。研究發(fā)現(xiàn)，不同基因型丙型病毒性肝炎患者對干擾素治療效果也顯著差別 。

　　HCV是一種經(jīng)血液傳播引起慢性肝臟疾病的RNA病毒，由于HCV RNA復(fù)制所依賴的聚合酶缺乏校正功能，致使其基因組發(fā)生突變的頻率較高，從而更容易逃避機(jī)體的免疫識別。HCV的高度變異性，使其在不同地區(qū)、不同患者、甚至同一患者的不同病程中均呈現(xiàn)不同基因型。目前國際通用HCV命名系統(tǒng)是Simmonds系統(tǒng)，將HCV分為6種主要基因型(以1~6表示)和一系列的亞型(以a,b,c等表示)。不同HCV基因型感染患者的臨床表現(xiàn)、肝病嚴(yán)重程度及慢性化病程進(jìn)展均有差異，其抗病毒治療的效果也不同。因此通過檢測HCV基因型有助于了解HCV感染的分布特征、變異及進(jìn)化演變情況，同時，HCV基因型與病程發(fā)展和治療應(yīng)答有一定相關(guān)性，例行檢測有助于判斷治療的難易程度，制定抗病毒治療的個體化方案。

本研究旨在探討HCV基因型的分布特點及臨床意義，并探討不同基因型丙型病毒性肝炎患者應(yīng)用干擾素治療效果的差異，為臨床制訂治療方案和判斷預(yù)后提供參考依據(jù)�！�​

　　收集116例(男62例，女54例)，平均年齡(49.3±16.9)歲;HCV1型感染者65例，2型感染者49例，3型感染者2例;排除合并其他肝炎病毒感染、酒精性、藥物性、免疫性、中毒性肝病及其他臟器嚴(yán)重疾患者。血液標(biāo)本均于抗病毒治療前收集。

　　采用二氧化硅吸附法提取血清中的HCV-RNA，并測定HCV載量，通過PCR-反向點雜交法檢測HCV基因分型。同時收集患者的基本資料、感染途徑、肝功能檢查結(jié)果等進(jìn)行登記分析。

　　在一般保肝藥物治療的前提下，采用聚乙二醇干擾素a-2a聯(lián)合利巴韋林抗病毒治療：根據(jù)患者病情嚴(yán)重程度選擇135ug或180ug韋林抗病毒治療劑量為800～1200mg/d，分2～3次口服療程為1年。干擾素治療應(yīng)答標(biāo)準(zhǔn)為 HCV-RNA陰性或較治療前降低50%以上 ，肝功能基本恢復(fù)正常，其他即為無應(yīng)答。​

　　(1)不同疾病程度HCV感染者的基因型分布差異具有顯著性，血源性感染61.33%為基因型1型，其次為2型占36%;散發(fā)性感染53.66%為2型，其次為1型占46.34%，疾病的嚴(yán)重程度上，1型更容易發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。(表1) 。

　　(2)對不同基因型HCV感染者血清RNA及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)含量測定后發(fā)現(xiàn)，1型HCV感染者RNA含量高于2型(P< 0.05)，3種基因型HCV感染者血清ALT含量比較無顯著差異(P> 0.05)(表 2)。

　　(3)1型HCV感染者對干擾素治療的應(yīng)答率低于2型，干擾素治療應(yīng)答者的HCV-RNA含量低于無應(yīng)答者(P< 0.05)(表 3)。

　　(4)116例HCV感染者經(jīng)聚乙二醇干擾素a-2a(135或l80g)治療后共57例發(fā)生應(yīng)答，發(fā)生應(yīng)答的1型HCV感染者干擾素的用量高于2型，不同干擾素用量感染者初始 HCV-RNA含量差異無顯著性(P> 0.05)(表 4)。

　　(5)59例單用干擾素治療無效的HCV感染者加用利巴韋林治療后，1型 HCV感染者治療有效率為31.82%，高于2型感染者(7.14%)，治療有效者的RNA含量明顯低于治療無效者(P< 0.05)(表 5)。

　　HCV屬黃病毒科，其基因組為單股正鏈RNA，易變異，HCV可分為6個基因型及不同亞型，其中基因1型呈全球分布， 占所有HCV感染者的50%～70%【HCV感染后80%以上患者進(jìn)展為慢性肝炎，如未經(jīng)合理治療，10～ 20年后約10%～30%患者將進(jìn)展為肝硬化1%～ 3%患者進(jìn)展為原發(fā)性肝細(xì)胞癌】。近年來，基因分型成為HCV研究的重點。研究發(fā)現(xiàn)，不同基因型HCV感染者在地區(qū)分布、感染途徑、臨床表現(xiàn) 、抗病毒治療方法及預(yù)后方面均存在差異。

　　⑴不同型別HCV對干擾素治療的應(yīng)答率有差異，從而有助于預(yù)測治療效果，為調(diào)整用藥劑量及治療時間，制定個體化抗病毒治療方案提供指導(dǎo);

　�、撇煌�型別HCV對肝臟的損傷程度不同，導(dǎo)致疾病的嚴(yán)重程度不同，從而有助于預(yù)測疾病的進(jìn)展。

　　本文的局限之處在于文章所采用的技術(shù)不能細(xì)分丙肝病毒各類亞型，隨著疾病的進(jìn)展和各類亞型不一樣的治療方案，建議臨床采用可區(qū)分亞型的技術(shù)方法。Sanger測序是基因檢測的金標(biāo)準(zhǔn)，同時也是2019版《慢性丙型肝炎防治指南》推薦的基因分型檢測檢測技術(shù)。

作者及單位介紹

　　【楊寶山】

　　哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院感染科二病房主任，醫(yī)學(xué)博士，碩士研究生導(dǎo)師，黑龍江省醫(yī)學(xué)會傳染病專業(yè)委員會主任委員，中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會全國委員，中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會重肝與人工肝學(xué)組全國委員。其在慢性乙、丙型病毒性肝炎抗病毒治療和重癥肝炎人工肝治療方面積累了豐富的臨床經(jīng)驗，達(dá)到省內(nèi)領(lǐng)先水平。

　　【哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院】

　　哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院創(chuàng)建于1954年，是集醫(yī)療、教學(xué)、科研、預(yù)防、保健和康復(fù)為一體的大型綜合性三級甲等醫(yī)院。醫(yī)院重視科研工作，近五年獲各級、各類課題共1071項，其中科技部重點研發(fā)計劃1項、國家自然科學(xué)基金重點項目3項、重大國際合作項目1項、國家“973”分課題1項、國家科技重大專項(子課題)1項�，F(xiàn)在的哈醫(yī)大二院已成為學(xué)科齊全、設(shè)備先進(jìn)、技術(shù)精湛、環(huán)境優(yōu)美的現(xiàn)代化醫(yī)院和臨床醫(yī)學(xué)院。

立菲達(dá)安診斷

　　美國賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)旗下LSG(原 Life Technologies)和中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司共同出資成立立菲達(dá)安公司，目前主要以 AppliedBiosystems 毛細(xì)管電泳測序(也稱 Sanger 測序)平臺在臨床診斷的應(yīng)用為主，產(chǎn)品線涵蓋傳染病分型和耐藥、腫瘤、靶向治療、化療藥物毒性和遺傳病等領(lǐng)域。

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丙肝病毒基因分型檢測（Sanger測序法）
 

• 檢測HCV病毒6大基因型和70種亞型（含常見的1b，2a，3a，3b，6a）， 指導(dǎo)臨床制定個性化治療方案
• 金標(biāo)準(zhǔn)方法，在病毒變異和罕見型別上較其他方法學(xué)有絕對的優(yōu)勢
• 國內(nèi)唯一獲得CFDA認(rèn)證的丙肝病毒分型Sanger測序法產(chǎn)品
• CFDA注冊證：國食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2014第3401445號