多通道毛細(xì)管電泳儀系統(tǒng)在蛋白藥物純度及電荷異質(zhì)性表征中的應(yīng)用

蛋白藥物是一類重要的高效治療藥物，單克隆抗體已成功用于多種疾病的治療。新型的蛋白藥物如雙抗，融合蛋白，ADC藥物等也越來越多的出現(xiàn)在各種醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。蛋白藥物的純度和電荷異質(zhì)性表征在藥物生產(chǎn)的研發(fā)和質(zhì)控等階段都是至關(guān)重要的。然而，隨著生物制藥企業(yè)在其開發(fā)管線中的候選藥物的越來越多，分子復(fù)雜性增加，對(duì)分析通量的要求越來越高。
 

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BioPhase™ 8800系統(tǒng)是SCIEX推出的新一代多通道毛細(xì)管電泳儀(圖1)，它的卡盒由 8 根毛細(xì)管組成，其并行采集和處理數(shù)據(jù)的能力，將分析時(shí)間由原來的幾周甚至幾個(gè)月縮短到幾天。利用BioPhase™ 8800系統(tǒng)，分析科學(xué)家可以在有限的時(shí)間內(nèi)同時(shí)進(jìn)行大量樣本的表征研究，包括穩(wěn)定性，降解研究，優(yōu)化存儲(chǔ)條件或其他關(guān)鍵質(zhì)量屬性，極大地提高了分析的效率。
 
主要特點(diǎn)

• 多通道毛細(xì)管卡盒 (圖2)，可同時(shí)運(yùn)行多達(dá)8個(gè)樣品，實(shí)現(xiàn)平行樣品分析；
• 集成光學(xué)模塊通過軟件控制自動(dòng)切換，可以在單個(gè)序列中同時(shí)使用UV和LIF檢測(cè)；
• 使用符合ANSI標(biāo)準(zhǔn)的96孔板進(jìn)行樣品和試劑制備，允許自動(dòng)制備樣品和試劑；
• 基于循環(huán)液體的卡盒溫控系統(tǒng)，嚴(yán)格控制分離溫度。

 

與SCIEX PA 800 Plus系統(tǒng)相比，SCIEX BioPhase™ 8800系統(tǒng)具有以下特點(diǎn)：

1. 通量高，分析速度快。PA 800 Plus系統(tǒng)運(yùn)行16針樣品的時(shí)間，用 BioPhase™ 8800系統(tǒng)可運(yùn)行128針；

2. 與 PA 800 Plus系統(tǒng)結(jié)果一致，可以很方便的將 PA 800 Plus系統(tǒng)的方法轉(zhuǎn)移到 BioPhase™ 8800系統(tǒng)上實(shí)現(xiàn)。

3. 重復(fù)性好，8個(gè)通道連續(xù)運(yùn)行16針，在 BioPhase™ 8800系統(tǒng)上128個(gè)數(shù)據(jù)遷移時(shí)間RSD值為 1.10%。

二． 高通量多毛細(xì)管電泳進(jìn)行蛋白CIEF電荷異質(zhì)性表征

RUO-MKT-02-13492-A

十二烷基硫酸鈉毛細(xì)管凝膠電泳 (CE-SDS) 是蛋白質(zhì)藥物快速表征、釋放和穩(wěn)定性測(cè)試最常用的技術(shù)之一。SCIEX BioPhase™ 8800系統(tǒng)采用了多毛細(xì)管設(shè)計(jì)，能夠同時(shí)進(jìn)行多個(gè)樣本的純度表征。

圖4.  同一樣品( NIST 單抗)在 8 通道中的CIEF結(jié)果

BioPhase™ 8800系統(tǒng)進(jìn)行CIEF實(shí)驗(yàn)具有以下特點(diǎn)：

1.多重批量數(shù)據(jù)采集和處理能力，以支持蛋白的高通量電荷異質(zhì)性篩選；

2.改進(jìn)的算法可以基于pI進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和峰值報(bào)告，減少數(shù)據(jù)處理時(shí)間和人為干預(yù)；

3.多通道毛細(xì)管并行采集樣品，縮短開發(fā)和分析時(shí)間，96孔板樣品分析的時(shí)間從單通道的5天縮短為12小時(shí)；

4.結(jié)果與單通道PA 800 Plus系統(tǒng)的等電聚焦參數(shù)具有良好的相關(guān)性，可以很容易將方法從單毛細(xì)管系統(tǒng)向多毛細(xì)管系統(tǒng)的轉(zhuǎn)移。